1 BACTERIOLOGIA OBJETIVO GENERALConocer las características macroscòpicas, microscópicas, fisiopatològicas e inmunológicas de los diferentes grupos bacterianos frecuentes en nuestro medio así como las técnicas y procedimientos para identificarlos y caracterizarlos en el laboratorio
2 OBJETIVOS Reconocer los diferentes tipos de bacterias, que proporcionan elementos que facilitan el diagnostico de la bacteria en una muestra clínica Desarrollar talleres que facilitan la profundización y comprensión de diferentes aspectos de la fisiopatogenia de los microorganismos a estudio. Favorecer la formación integral a través de las diferentes actividades propuestas en el aula y por fuera de esta.
3 FAMILIA MICROCOCCACEAEGÉNEROS Staphylococcus Micrococos Planococcus Stomatococcus
4 ESTUDIOS DE HOMOLOGIAS DE ACIDOS NUCLEICOSMicrococcus= Actinomyces Artrobacterias Staphylococcus= Streptococcus Enterococcus Lactobacillus Bacillus
5 Habitat PIEL MUCOSAS OTROS SITIOS DEL CUERPO NATURALEZA AMBIENTE
6 AMPLIA DISTRIBUCION Difícil interpretación-Correlación con el cuadro clínico
7 Bacterias Gram PositivasAislados con mayor frecuencia de muestra clínicas
8 Prueba de catalasa positiva
9 PATOLOGIAS FOLICULITIS FURÙNCULOS ABSCESOS FARINGITIS ENDOCARDITISERISIPELA CELULITIS NEUMONIA BACTEREMIA
10 Planococcus
11 Especies Planococcus citreus ( 12% Na cl) Planococcus kocuriPlanococcus halophilus( exmiembro del gènero) = Micrococcus No han sido implicados en enfermedades humanas.
12 Micrococcus Ambiente Piel Pigmentos carotenoides Uso industrial:Detección Agentes antimicrobianos en comidas para animales y cosméticos.
13 Aislamiento OCASIONALMUESTRAS CON CONTAMINANTES DE LA PIEL , MUCOSAS O AMBIENTES. OPORTUNISTA: sepsis, peritonitis meningitis.
14 Especies M. luteus únicas especies que se mantienen en el género ARN 16 S M. lylae M. varians M. roseus M. agilis M. kristinae M. nishinomiyaensis M sedentarius M. halobius
15 Stomatococcus S. mucilaginosus. Coco Gram positivo.Microbiota normal T.R Inmóvil. Encapsulado Catalasa positivo dèbil o negativo. Falta de desarrollo en agar nutritivo con 5% de NaCl. Lo diferencia de los Micrococcus y Staphylococcus.
16 Infecciones humanas Endocarditis post cateterismo cardiacoEndocarditis en válvulas naturales y protésicas. Sepsis asociada a trauma de cabeza y cuello, quimioterapia del cáncer. Endoftalmitis con posterioridad a implante de cristalino Procesos malignos
17 Staphylococcus 33 especies 17 encontrados en muestras clínicas.Contacto cercano con animales Staphilococcus capitis: Microbiota normal humana: piel y glándulas sebáceas del cuero cabelludo, frente y cuello. Staphilococcus auricularis: conducto auditivo externo. Staphilococcus hyicus: dermatitis en ganado porcino Staphilococcus intermedius: infecciones en perros ( Infecciones cutáneas), mordeduras por perros. Staphilococcus delphini: delfines Staphilococcus felis: gatos domésticos
18 HABITAT PIEL MUCOSAS DEL HOMBRE Y ANIMALESSERES HUMANOS INFECTADOS POR CONTACTO FRECUENTE
19 ENZIMA COAGULASA IDENTIFICA Staphylococcus patògenos.Coagulasa positivo: Staphilococcus aureus Coagulasa negativo: Staphilococcus epidermidis Staphilococcus saprophyticus
20 Saphylococcus aureus Patógeno humano Ambiente externoFosas nasales % adultos. pliegues cutáneos. Perinè Axilas Vagina Microbiota normal oportunista
21 Staphilococcus aureus
22 Cocos gram positivos
23 FACTORES PREDISPONENTES A INFECCIONES GRAVESDEFECTO EN LA DESTRUCCIÒN INTRACELULAR DESPUÈS DE LA FAGOCITOSIS
24 FACTORES PREDISPONENTES A INFECCIONES GRAVESLESIONES CUTÀNEAS cirugías cuerpos extraños, suturas, catéteres prótesis. infecciones por otros agentes como virus. tumores malignos
25 FACTORES PREDISPONENTES A INFECCIONES GRAVESadministración profiláctica o terapéutica de agentes antimicrobianos
26 Propiedades Vs enfermedadFACTORES DE VIRULENCIA CAPSULA. Exopolisacarido evitando la fagocitosis Adherencia Inmunotipificaciòn del polisacárido capsular: 8 tipos.
27 70-80% PERTENECEN AL SEROTIPO CAPSULAR 8Resistentes a la penicilina serotipo 5
28 PROTEÌNA A unida a peptidoglicano y se puede segregar al medio interfiere en la ingestión por los leucocitos PMN. fagocitosis Base de las pruebas de aglutinación.
29 Constituyente de la paredPeptidoglicano Ácidos teicoicos: adherencia a la superficie de las mucosas. Rigidez y estabilidad.
30 Enzimas CATALASA: inactiva el peroxido de hidrogeno y radicales tòxicos formados por el sistema MIELOPEROXIDASA . COAGULASA: recubre las células bacterianas con fibrina y las hace resistentes a la fagocitosis. FIBROLISINAS: diseminación de la infección a tejidos contiguos. LEUCOCIDINA: lisa granulocitos y macrofagos, compuesta de 2 proteinas termolabiles .
31 ENZIMAS HIALURONIDASA:hidrólisis de matriz intercelular del muco polisacáridos de los tejidos permite la diseminación del microorganismo. ESTAFILOCINASA: degrada coagulos de fibrina por conversiòn del plasminogeno a la enzima fibrinolitica, plasmina
32 ENZIMAS LIPASA: degrada acidos grasos protectores de la piel diseminación en tejidos cutáneos y subcutáneos.
33 TOXINAS ENTEROTOXINAS: responsable de la características clínicas de la intoxicación alimentaría. Mecanismo de acción desconocido Tto de sostén. Flanes ensaladas de papa, carnes procesada helados postres. Diarrea y vomito 2-8 horas
34 Toxinas Hemolisina, leucocidinas, toxina del síndrome del shock tóxico, toxina epidermolítica y enterotoxinas. Citotoxinas como:` alfa toxina: destruye monocitos y plaquetas (forma anillo polimérico) beta toxina: esfingomielinasa C gamma toxina: hemolítica delta toxina: tipo Detergente
35 Sindrome de shock tóxico SSTMultisistèmica Estafilocóccico: Producción de TSST-1 Cuadro Clínico: Fiebre > 38.9 ºC Eritrodermia difusa Vòmito Diarrea Insuficiencia renal Cefalea Escalofrío Faringitis conjuntivitis Hipotensión arterial Descamación de la piel Sistémica: SNC, hepático, hematológico, muscular o mucosas ELUDIR LOS PASOS DEL PROCESAMIENTO ANTIGENICO
36 Staphilococcus aureusInfecciones cutáneas benignas hasta enfermedades sistémicas potencialmente fatales.
37 Infecciones cutáneas Foliculitis simple:Infección Superficial que Rodea Los folículos Pilosos.
38 INFECCIONES EN LA EPIDERMIS FOLICULITISAgente Causal: Staphylococcus aureus
39 INFLAMACIÓN UTER INA BOVINOSPared uterina : Metritis Serosa o peritoneo visceral : Perimetritis Mucosa : Endometritis Ligamentos extensores : Parametritis Por infección ascendente desde vulva y vagina. Por vía hematógena. Puede causar muerte embrionaria, abortos o acúmulos de pus (piometra). Corynebacterium pyogenes, Staphylococcus, Streptococcus y Escherichia coli. Leves: mucus opaco con el exudado mucopurulento. Moderado: puede necrosis, acumulación de pus y una descarga vulvar de color blanco grisáceo. Los restos de la placenta necrótica dan un medio para la proliferación bacteriana. Macro: congestión, edema y ulceraciones del endometrio, lumen lleno de epitelio descamado, fragmentos placentarios, exudado, líquidos sucios de un color café o pardo y de muy mal olor. Secuelas: absorción de toxinas, trombosis de las venas uterinas, septicemia , muerte y metástasis
40 PIOMETRA
41 Complejo endometritis quística hiperplasia y piometra de la perra y de la gata.Estimulo estrogénico excesivo y prolongado, se presenta en perros hermafroditas con Tumores de células de sertoli Macro: hiperplasia pared uterina y glándulas endometriales quísticas y visibles a simple vista. Sale un exudado sucio, café y de mal olor por la vulva, Piometra, Mucometra e hidrometra. Staphilococcus spp. ,Streptococcus y Escherichia coli Tratamiento: Histerectomía. Signos: Fiebre, poliuria, polidipsia, anorexia, neutrofilia, distensión abdominal, vómitos, toxemia, bacteriemia y glomerulonefritis. Perras viejas, en la mayoría hay cuerpo lúteo persistente.
42 Salpingitis Vía ascendente del úteroInfecciones vecinas peritoneales y hematógenas Streptococcus, Staphylococcus, E. Coli, Corynebacteium, Trichomonas, Brucella abortus, Tuberculosis. Bilaterales con descamación celular, linfocitos y células plasmáticas, proliferación de células del estroma.
43
44 IMPÈTIGO: infección superficial de la piel : NIÑOS
45 INFECCIONES EN LA EPIDERMIS IMPETIGO AMPOLLARAgente Causal: Staphylococcus aureus Lesiones: Ampollas que se rompen dejando zona eritematosa que se cubre con costras finas
46 INFECCIONES EN LA EPIDERMIS FORUNCULOSISAgente más frecuentemente encontrado: S. aureus lesión: afecta tejido subcutáneo y produce síntomas sistémicos
47
48 INFECCIONES EN LA DERMIS Celulitis Necrotizante MonomicrobianaAgentes Causales: S. aureus y S. pyogenes Lesión: Eritematosa, caliente, dolorosa y con bordes mal definidos
49 SINDROME DE LA PIEL ESCALDADAAgente Causal: Staphylococcus aureus – toxina exfoliatina Foco de Infección: Piel u otra localización Lesión: Enrojecimiento de la piel, dolor cutáneo que evoluciona en ampollas que se rompen y dejan la piel al descubierto
50 SINDROME DEL SHOCK TOXICOEstafilocóccico: Producción de SST-1 Cuadro Clínico: Fiebre > 38.9 ºC Eritrodermia difusa Hipotensión arterial Descamación de la piel Sistémica: SNC, hepático, hematológico, muscular o mucosas
51 infecciones Heridas quirúrgicas infectadas: foco para infecciones Sistèmicas bronconeumonía. adquirida en comunidad= neumonía viral Neumonía nosocomial Bacteriemia asociadas a enfermedades malignas. BACTEREMIA: Endocarditis, osteomielitis, pioartritis. Meningitis peritonitis
52 Clinical Manifestations of S Aureus
53 Clinical Manifestations of S Aureus
54 Intoxicaciones alimentariasProducción de exotoxinas
55 Enzimas Beta lactamasas: RESISTENCIA A LA PENICILINA Y AMPICILINA
56 ENZIMAS Alfa-toxinas: Acción Citolítica: Forma poros en las membranasLeucocitos PMN LISIS DE GLOBULOS ROJOS Toxinas para dañar membranas) Alfa-toxinas: Acción Citolítica: Forma poros en las membranas Acción Dermonecrótica en el conejo Letal en el ratón Es una neurotoxina Causante de los síntomas del Shock Tóxico Beta-toxina: (Doble halo de hemólisis en agar sangre) Esfingomielinasa. Sin actividad en células humanas Delta-toxina: Sin papel conocido Gamma-toxina: Actúa como surfactante y activa la adenilatociclasa lo que resulta en la producción de AMP C : diarrea Actúa como necrotizante de la piel HEMOLISINAS:
57 TOXINAS Leucocidina Exotoxina: MEMBRANA DE LEUCOCITOS PMNFORMA POROS: ALTERAN PERMEABILIDAD EXFOLIATINAS: epidermolìticas: formado por 2 proteínas: ET-A ET-B proteolítica, disuelve la epidermis síndrome de la piel escaldada
58 PIEL ESCALDADA FORMACION DE ESCARAS EN LA CAPA SUPERFICIAL DE LA PIEL.PIEL DESNUDA Y CARNE VIVA
59 Staphylococcus coagulasa negativos
60 Staphylococcus epidermidis50- 80% de aislamientos son coagulasa negativos Endocarditis catéteres intravenosos Peritonitis Bacteremia Osteomielitis Inf. Heridas Infecciones de vías urinarias
61 Staphylococcus epidermidis adherenciaMacromoléculas en la superficie celular y extracelular. Plásticos y elementos extraños. Adhesina del polisacárido capsular Interacción con componentes tisulares y sèricos
62 Interacción con proteínas del tejido conectivo y proteínas sericas.Pasos Iniciales De La Colonización Tisular Para Establecimiento De Infecciones De Heridas Quirúrgicas Interacción con proteínas del tejido conectivo y proteínas sericas.
63 COLONIZACION PRODUCCIÒN DE GLICOCALIZ: MATRIZ EXTRACELULAR MUCOSA.FORMACION DE BIOPELICULAS EN SUPERFICIES PLÀSTICAS LA MATRIZ AFECTA LA FAGOCITOSIS AL INHIBIR LA QUIMIOTAXIA DE PMN
64 Otros Staphylococcus Coagulasa NegativosStaphilococcus saprophyticus Staphilococcus mulans Staphilococcus lugdunensis
65 Staphylococcus saprophyticusPatògeno I. U en mujeres jóvenes 2 causa de cistitis Pielonefritis %de pacientes. Uretritis en hombres y mujeres I. U por sondas Prostatitis en ancianos Suplementos de nutrición parenteral bacteremia y sepsis. Recto más frecuentemente colonizado.
66 TEST DE LA NOVOBIOCINA
67 Staphylococcus saprophyticus FACTORES DE VIRULENCIAMayor Adherencia a células uroepiteliales, uretrales. Ureasa: invasión de tejido vesical Proteína fibrilar asociada a la superficie de la célula
68 Otros Staphylococcus coagulasa negativos– Staphilococcus haemolyticus – Staphilococcus hominis – Staphilococcussimulans – Staphilococcus lugdunensis – Staphilococcus scleiferi – Staphilococcus warneri - Staphilococcus saccharolyticus
69 MORFOLOGIA
70 DIFERENCIACION DE LOS MIEMBROS DE LA FAMILIA MICROCOCACEAEFrotis teñido con GRAM : Staphylococcus Cocos Gram positivos. 0.5um – a más de 1um de diámetro. Aislados, pares, cadenas cortas, en grupos tanto por dentro como por fuera de los leucocitos PMN. Difícil de identificarlos en frotis directos con los Streptococcus, Micrococcus, y Peptoestreptococcus.
71 MORFOLOGIA D ELAS COLONIASStaphylococcus: desarrollo más rápido. 1-2 mm de diámetro después de 24 h. Lisas, mantecosas, ligeramente convexas Bordes enteros Pigmentos Muestran variedad en el tamaño dando un aspecto mixto. Micrococcus: Crecen lentamente 48h de incubación 1- 2 mm. de diámetro Mate, convexas regulares Pigmentos
72 Prueba de catalasa Catalasa positiva.Raras cepas de Staphylococcus catalasa negativa Enterococcus Pseudocatalasa. Staphilococcus. mucilaginosus : negativo o débil positivo
73 METODOS PARA DIFERENCIARStaphylococcus Micrococcus fermentación de la glucosa OF + - producción de ácido a partir de el glicerol susceptibilidad a al furazolidina SUSCEPTIBLE RESISTENTE susceptibilidad A la bacitracina
74 Staphylococcus aureusPrueba de coagulasa en portaobjetos: COAGULASA UNIDA O FACTOR DE AGREGACIÒN. COAGULASA EN TUBO: EDTA Enzima extracelular - 4 h después de la incubación a 35 c deben mantenerse a temperatura ambiente y leídas a las h producción de fibrolisinas AGLUTINACION CON LATEX: plasma determinación de proteína A
75 Staphylococcus aureusRARAS CEPAS Staphilococcus. aureus coagulasa negativa. COAGULASA POSITIVAS Staphilococcus. intermedius Staphilococcus hyicus Staphilococcus delphini Staphilococcus schleiferi
76 ESQUEMA DE IDENTIFICACIONmuestra clinica Abscesos, heridas,secreciones, otros Frotis directo coloreado con gram: cocos Gram (+) Agar sangre y caldo de enrriquecimiento significativo si se observa abundantes PMN Incubacion 36°C,37°C, 18-24 H Colonias aisladas observar hemolisis Prueba de catalasa (+) Prueba coagulasa Gram: cocos Gram (+) en Racimo positiva negativa Susceptibilidad a la novobiocina S aureus resistente sensible S saprophyticus S epidermidis
77 Staphilococcus aureus
78 PRUEBA DE DNA ASA PRUEBA DE DESOXIRRIBUNUCLEASAStaphilococcus aureus produce DNA asa que hidroliza el ADN.
79 Susceptibilidad a la Novobiocina
80 Staphilococcus aureus N: Staphilococcus epidermidis CATALASA: POSTIVA Staphylococcus spp COAGULASA P: Staphilococcus aureus N: Staphilococcus epidermidis Staphilococcus saprophyticus NOVOBIOCINA P: Staphilococcus epidermidis (>16) N: Staphilococcus saprophyticus (<16)
81 COLONIAS DE Staphylococcus aureus
82 GRAM DE Micrococcus spp
83 COLONIAS DE Micrococcus spp