1 CHARLAS DE CIENCIA COMPARTIDA “Bacterias patógenas humanas en aguas naturales: estudio sobre la presencia de Salmonella spp. en diferentes zonas de interés público en el litoral canario". 13 de abril de 2016 Leopoldo O’ Shanahan Roca. Biólogo. Doctor en Ciencias del Mar, de la Sociedad Española de Microbiología-Grupo de Microbiología del Medio Acuático. Biólogo de la Sociedad Atlántica de Oceanógrafos. Coordinador de Programas y Director del Departamento de Microbiología del Instituto Canario de Ciencias Marinas. Colaborador Científico del Instituto de Ciencias del Mar del Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC), Laboratorio de Barcelona-Cataluña- España. Becario del Cabildo de Gran Canaria. Carlos Bas. Blog de la Biblioteca de Ciencias Básicas de la ULPGC

2 En el litoral se produce la influencia de numerosos factores ajenos al medio marino procedentes del entorno terrestre. Así, la presencia de patógenos humanos en el agua de mar se investiga desde hace muchas décadas, siguiendo la Directiva 76/160/CEE, de calidad de aguas de baño. La presencia de Salmonella en relación con otros microorganismos fecales es un importantísimo factor ecológico y sanitario a considerar. Durante años hemos aislado numerosas serovariedades de Salmonella en zonas marinas contaminadas por aguas residuales. RESUMEN Colonias (cepas) de Salmonella spp. creciendo sobre Agar S-S

3 -También pueden encontrarse en aguas de superficie y aguas subterráneas. Son Gram negativas de la familia Enterobacteriaceae. -Las Salmonella pueden sobrevivir durante largos períodos en aguas naturales y la persistencia de «cepas» específicas y epidémicas produce gran preocupación en la salud pública (1) (Baudart et al., 2000). ALGUNOS CONCEPTOS SOBRE LAS SALMONELLAS. Las Salmonella son bacterias patógenas humanas frecuentemente detectadas en aguas marinas costeras y presentes siempre en aguas residuales urbanas. Salmonella enterica es el agente etiológico más frecuente de enfermedad gastrointestinal bacteriana a nivel mundial. Por lo general, se adquiere por contacto directo o indirecto con heces de un animal infectado, a través de alimentos o agua contaminados. En los países con mejores servicios de saneamiento, Salmonella enterica se propaga más comúnmente a través de los alimentos contaminados. Tinción de Gram realizada en un frotis de Salmonella vista a 1000 X en un MO con aceite de inmersión. -El hábitat natural normalmente es los intestinos de cualquier tipo de animal homeotermo (incluidos seres humanos) y es de distribución universal. Se transmite por contacto directo o contaminación cruzada durante la manipulación, en el procesado de alimentos o en el hogar; también por vía sexual.

4 ¿Porqué detectar y numerar Salmonella en el agua de mar costera y en otros ambientes acuáticos?. La Directiva europea 76/160/CEE de 8 de diciembre de 1975, de calidad de las aguas de baño estableció la bacteria Salmonella como uno de los parámetros a valorar. Desde entonces muchos Laboratorios de Investigación Microbiológica, Departamentos de Microbiología universitarios, Salud Pública acometieron el estudio de Salmonella en ambientes acuáticos y otros. Células de Salmonella vistas al Microscopio Electrónico de Barrido. Representación artística idealizada de una célula de Salmonella, con su forma de bacilo Gram negativo y los flagelos. Avda. Marítima de Las Palmas. Vertidos de aguas fecales a causa de la rotura del Emisario Submarino de Las Palmas que contaminan las zonas de baño de San Cristóbal y La Laja, aportando patógenos al entorno. Maspalomas. Escorrentía de aguas pluviales del barranco de Fataga contaminan las zonas de baño, aportando patógenos al entorno. (Foto Sergio Ramos desde un helicóptero del SAR)

5 -Salmonella se aísla con frecuencia de las aguas dulces y marinas, incluidas las de recreo y recolección de mariscos. Actividades en tierra, aguas arriba, pueden aportar Salmonella a las aguas naturales a través de las aguas residuales humanas, escorrentías urbanas, agrícolas y pluviales y desechos de la vida silvestre y animales domésticos. Las Salmonella se han aislado a partir de organismos, incluyendo mamíferos marinos e invertebrados, y pueden persistir en el ambiente por largos períodos de tiempo incluyendo las aguas naturales y la vida silvestre de una misma región geográfica. Por lo tanto, las aguas naturales proporcionan un vehículo para la difusión de Salmonella en el medio ambiente y los posibles hospedadores. -Salmonella is frequently isolated from fresh and marine waters, including those used for recreation and shellfish harvesting. Upstream land activities can contribute Salmonella to environmental waters via human sewage, urban and agricultural runoff, and feces of wildlife and domestic pets. Salmonella has been isolated from marine organisms— including mammals and invertebrates, reported to persist in the environment for extended periods of time —and from natural waters and wildlife in the same geographic region. Thus, natural waters provide a vehicle for dissemination of Salmonella in the environment and a route of transmission among hosts. Salmonella en aguas naturales

6 Las aportaciones de aguas de origen terrestre al mar son las causantes de la contaminación por Salmonella: Aguas Residuales Urbanas Aguas de Escorrentías Pluviales Aguas Pluviales Contaminadas por Aguas Fecales

7 VERTIDOS DE AGUAS FECALES AL MAR: Rotura del Emisario Submarino de Las Palmas (7 de marzo de 2014) y vertido del Guiniguada. Ambas procedentes de Estación Depuradora Barranco de Guiniguada Emisario Submarino

8 VERTIDOS DE AGUAS FECALES AL MAR: Avenidas de aguas torrenciales que descargan en zonas de baños (Playa Hoya del Pozo, Gran Canaria) Aguas fecales vertiendo sobre pluviales

9 Vista del penacho de aguas residuales vertidas por el ES de Las Palmas

10 ¿Cómo se estudia Salmonella en el mar? Su presencia, relación con los vertidos y otras bacterias, tipos de Salmonella, etc.

11 Toma de muestra de agua de mar desde una embarcación utilizando botella de vidrio Pyrex esterilizada en el autoclave. Playa de Melenara, Telde, Gran Canaria.

12 MÉTODO DE LAS MEMBRANAS FILTRANTES. Esquema sencillo de un método de análisis de Salmonella en agua de mar. Se utilizan membranas porosas de ésteres de celulosa con un diámetro de poro de 0,45 micras para retener las bacterias. Las membranas filtradas se cultivan en el Caldo de Enriquecimiento de Rappaport-Vassiliadis RV43, a 43 ºC durante 48 o más horas. A partir del caldo RV43 se siembran diferentes medios sólidos de aislamiento selectivos y específicos para Salmonella de los que se aíslan cepas para su estudio bioquímico y serológico y realización de antibiogramas

13 Medición de un volumen del agua de muestra a analizar

14 Colocación de la membrana filtrante semiporosa en el embudo del aparato de filtración. Las bacterias que están en suspensión en el agua de mar quedan retenidas en la membrana cuyos poros tienen un diámetro de 0,5 micras.

15 Proceso de filtración: Vertido de un volumen conocido del agua que se va a analizar. Las bacterias en suspensón en el agua quedarán retenidas por la membrana

16 Recogida de la membrana después de la filtración

17 Colocación de las membranas conteniendo las bacterias en el Caldo de enriquecimiento Rappaport-Vassiliadis RV43. Incubación en estufa a 43º C durante 24 o más horas. Este Medio de Cultivo líquido favorece el desarrollo de las salmonellas. De aquí se siembran en medios sólidos (agares) que también favorecen y seleccionan el crecimiento de las salmonelas.

18 Inoculación o siembra de varios tipos de agares específicos y selectivos para el crecimiento de Salmonella

19 AISLAMIENTO DE CEPAS DE SALMONELLA

20 Colonias de Salmonella spp. creciendo sobre diversos agares selectivos específicos. Las flechas señalan colonias bien aisladas de las que seleccionaremos una cantidad significativa que será lo que llamamos Cepas de Salmonella. A partir de las cepas hallaremos los diferentes serotipos o serovariedades contenidos en la muestra y a los que vamos a someter a pruebas taxonómicas para confirmar que son Salmonella e identificar las serovariedades que se pueden aislar de las muestras de agua de mar. Agar Hektoen Enteric Agar Salmonella-Shigella Agar Bismuto Sulfito

21 Serovariedades de Salmonella. Se conocen más de 2500 serovariedades, aunque se sabe poco de la presencia y distribución de estas en el medio ambiente (Walters, S. P. et al., Appl Environ Microbiol. 2013 Jul; 79(14): 4199–4209).

22 Kligler Iron Agar ANTIBIOGRAMA Salmonella + No inoculado IDENTIFICACIÓN DE Salmonella enterica Subespecie I SEROAGLUTINACIÓN e identificación del serotipo en el Centro Nacional de Microbiología, Virología e Inmunología Sanitaria, Majadahonda, España y en el Laboratorio Europeo de Referencia para Salmonella en el Institut Pasteur de París API 20 E, pruebas bioquímicas y enzimáticas ALGUNAS PRUEBAS TAXONÓMICAS

23 Las bacterias intestinales del grupo de los Coliformes Fecales siempre están asociadas a las salmonelas en las aguas residuales. Por esa razón, cuando en el medio natural se detecta salmonela se valoran también los CF para hallar a partir de qué concentración de CF ya se detecta Salmonella.

24 Estudios sobre la presencia de Salmonella en aguas marinas: Litoral de Gran Canaria. En este tipo de estudios se tratan algunas características o propiedades del entorno, de las salmonelas que se aíslan e identifican y de los otros parámetros bacterianos. De esta forma, algunas de las labores que se acometen pueden ser: -Identificación de serovariedades -Sensibilidad a los antibióticos -Comparación con serotipos humanos y de otro origen -Relación con la concentración de parámetros bacterianos de contaminación fecal, i.e., los Coliformes Fecales * Qualité microbiologique des plages de Gran Canaria, Espagne. 1991. L. O’ Shanahan & C. Monzón-Moreno. Revue Internationale d’Oceanographie Medicale. Année 1991. pp. 83-89.

25 Isolation of Salmonella and determination of Faecal Coliforms in the Zone of initial dilution of a sewage outfall located in Playa de Cochinos –Bahía de el Inglés (south of Gran Canaria). Trazado de los Emisarios submarinos de la Bahía de El Inglés Penachos horizontales en la zona de afloramiento de las aguas residuales Effluents discharges at a distance of 1200 m from the coast line and at depths of 20 m. Thirty samples were taken over a seventeen-month period (L. O’ Shanahan & C. Monzón-Moreno, 1991)*

26 St. 11 St. 12 Aislamiento de Salmonella y determinación de los Coliformes Fecales en la Zona de Dilución Inicial del penacho de difusión de dos emisarios submarinos (St. 11 y St.12) localizados en Playa de Cochinos-Bahía del Inglés (sur de Gran Canaria)*. *Qualité microbiologique des plages de Gran Canaria, Espagne. 1991. L. O’ Shanahan & C. Monzón- Moreno. Revue Internationale d’Oceanographie Medicale. Année 1991. pp. 83-89. Penachos de los emisarios submarinos de la Bahía de El Inglés. Las flechas señalan el lugar de afloramiento del efluente vertido a varias decenas de metros de profundidad. Y a unos 1200 m de la línea de costa. A partir de aquí se forma la pluma que se extiende a favor de la corriente dominante y comienza la mezcla secundaria

27 St. 11 St. 12 Muestras. - Treinta y cinco muestras de agua de mar fueron tomadas en los penachos de dispersión horizontal de los emisarios submarinos St.11 y St.12 entre marzo de 1988 y abril de 1991. Análisis bacteriológicos - Mediante el método de filtración por membranas (Millipore 0, 45 micras) se obtuvieron las concentraciones de CT, CF y EF. Además se determinaron los serotipos de Salmonella enterica subespecie I en el área de influencia de los efluentes de los emisarios: St 11 y St 12.

28 RESULTADOS A partir de las 35 muestras de agua de mar tomadas durante un período de 17 meses se aislaron 184 cepas de Salmonella distribuídas en 19 serovariedades, con un predominio de lnfantis (26 cepas) y Enteritidis (26), que se reparten a lo largo del tiempo de muestreo. Se constata que la aparición de las serovariedades no siguen un patrón fijo de presencia en las aguas marinas contaminadas por residuales. El serotipo London (21 cepas) aparece sólo en marzo y abril de 1988 y sólo vuelve a aparecer en enero de 1989.

29 RESULTADOS Todas las muestras entre 10 5 a 10 6 CF/100 ml fueron positivas para la presencia de salmonella, lo que permite afirmar que existe una relación directa entre la concentración de bacterias fecales y la presencia de salmonella. Esto quiere decir que la veracidad de los Coliformes para predecir la presencia de Salmonella es evidente. Hay un acuerdo general entre los autores de que Salmonella siempre está presente a altas densidades de organismos indicadores de contaminación fecal. Los serotipos Enteritidis e Infantis, los más frecuentes aislados de los efluentes de los emisarios, son los mismos que se aíslan a partir de casos clínicos y de las aguas residuales domésticas. - Como se ha constatado, algún serotipo se aísla en sucesivas muestras de un mismo punto y no hay una repartición en el tiempo de los serotipos hallados. Esto nos indica que existe una notable endemia de Salmonella en la colectividad humana.

30 Playa de Alcaravaneras y Muelle Deportivo de Las Palmas. Estudio sobre la presencia de Salmonella spp. en la playa de Alcaravaneras- Muelle Deportivo de Las Palmas y su relación con la concentración de Coliformes Fecales.

31 Fotografía 2. 1 de enero de 1981 Muelle Deportivo Playa de baños Efluente ( O' SHANAHAN, L., OJEDA VARGAS, M.M., MONZÓN MORENO, C. 1966. "Salmonella en aguas del litoral de Gran Canaria: Serotipos y sensibilidad antibiótica (1982-1991)". I Reunión Científica de Microbiología del Medio Acuático. Grupo Especializado de Microbiología del Medio Acuático. Sociedad Española de Microbiología (SEM). Málaga, 12-14 abril, 1996). Estudio sobre la presencia de Salmonella spp. en la playa de Alcaravaneras-Muelle Deportivo de Las Palmas y la relación con la concentración de Coliformes Fecales. A lo largo del año 1985 se tomaron 23 muestras de agua de mar en los alrededores del área de influencia de un efluente de aguas residuales sin depurar procedente de una estación de bombeo de la red de sanemiento de la ciudad. Se aislaron 127 cepas de Salmonella spp. que pertenecían a 18 serovariedades, en las que predominaron: S. Infantis, S. Newport y S. Goldcoast S. Urbana. S. Paratyphi B, S. Enteritidis y S. Anatum. (O’ Shanahan et al., 1996)*

32 RESULTADOS y DISCUSIÓN (1) Distribución de los serotipos: Infantis (25 cepas; 19,6 %); Newport (17 cepas; 13,4 %); Goldcoast (16; 12,5 %); Urbana (15; 11,8 %); Paratyphi B, Enteritidis y Anatum. En el Cuadro de Resultados se observa que algunas serovariedades se aislan en repetidas ocasiones a lo largo del año: i.e. Infantis (feb, abr, julio); Newport (feb, abr, may, oct, nov); Agona (feb, jul, jul) y otras aparecen en una sola ocasión como Typhimurium o en dos como Urbana. Esto nos permite suponer que no hay un patrón común de presencia de las serovariedades, pero sí que algunas son muy frecuentes o casi constantes en la población humana.

33 FechaCF/100 ml Serotipos nº cepas/serot 1985 ene-23 4,60E+05 3.15: y: -1 feb-052,40E+06 Infantis 15 Agona3 Newport2 Saint-paul1 Autoag1 feb-134,00E+05 Paratyphi B5 Autoag 1 mar-052,50E+06 Paratyphi B2 Newport1 mar-213,80E+06 Paratyphi B6 abr-094,20E+06 Newport4 Infantis3 Enteritidis1 Goldcoast1 abr-298,57E+05 Infantis6 Bardo1 may-149,20E+06 Enteritidis4 may-273,50E+04 Newport2 Virchow1 jun-182,25E+06 Salmonela + RESULTADOS y DISCUSIÓN (2) La presencia de Salmonella en las aguas naturales está en relación directa con la concentración de los indicadores de contaminación fecal Coliformes Fecales. De hecho en algunas muestras de los meses de julio y agosto, con concentraciones de 10 3 a 10 4 CF/100 ml no se detectó Salmonella en las muestras, mientras que con concentraciones de 10 5 a 10 6 CF/100 ml todas muestras fueron positivas para Salmonella. Es evidente que las altísimas concentraciones de CF se obtienen a causa de la proximidad del vertido de aguas residuales urbanas.

34 FechaCF100 ml Serot.Salmonella nº cepas/serot jul-041,00E+04 no crecimiento jul-152,00E+04 no crecimiento jul-244,40E+05 Urbana 15 Agona 1 jul-291,45E+05 Agona 5 3.15: y: - 3 Urbana 1 Binza 1 Infantis 1 ago-121,15E+03 no crecimiento ago-264,64E+03 no crecimiento sep.117,57E+04 no crecimiento sep-303,30E+06 Salmonela + oct-163,90E+05 Anatum 9 Typhimurium 1 oct-286,60E+03 Newport 4 Anatum 1 nov-122,18E+06 Newport 3 nov-254,40E+05 Goldcoast 15 Cerro 2 Corvallis 1 dic-121,05E+06 Enteritidis 6 Por tanto, las serovariedades obtenidas en el agua de mar son un reflejo de las que circulan por la población humana. Esto confirma además que el vertido de aguas residuales al mar y otros ambientes acuáticos suponen un riesgo sanitario para las poblaciones cercanas.

35 SEROTIPOS DE SALMONELLA spp. EN LAS AGUAS DEL LITORAL DE GRAN CANARIA: COMPARACIÓN CON LOS AISLADOS EN ESPAÑA.

36 TABLA 1 SEROTIPOS DE Salmonella spp. AISLADOS DE AGUA DE MAR DE GRAN CANARIA ENTRE 1982 Y 1991 Total 82-83 85 88 89-90 91 ───────── Nº % Infantis 4 23 27 15 69 16,35 Enteritidis 6 11 26 7 50 11,85 Montevideo 31 11 1 43 10,19 Newport 16 17 33 7,82 Goldcoast 16 12 28 6,64 Anatum 10 1 15 26 6,16 London 20 1 21 4,98 Urbana 15 15 3,55 Paratyphi B 13 13 3,08 Goelzau 13 13 3,08 Kentucky 13 13 3,08 Livingstone 11 11 2,61 Agona 9 1 10 2,34 Panama 3 7 10 2,34 Virchow 1 3 6 10 2,34 Blockley 9 9 2,13 Manhattan 8 8 1,90 Poona 8 8 1,90 Rideau 6 6 1,42 Branderburg 3 3 0,71 Hadar 3 3 0,71 Cerro 2 2 0,47 Derby 1 1 2 0,47 Kottbus 2 2 0,47 Oraniemburg 2 2 0,47 Telelkebir 2 2 0,47 Bardo 1 1 0,24 Binza 1 1 0,24 Corvallis 1 1 0,24 Emek 1 1 0,24 Mbandaka 1 1 0,24 Meleagridis 1 1 0,24 Muenchen 1 1 0,24 Mikawasima 1 1 0,24 Saint-Paul 1 1 0,24 Typhimurium 1 1 0,24 Aislados 41 121 167 65 28 422 SEROTIPOS DE SALMONELLA EN EL LITORAL MARINO DE GRAN CANARIA. 1982-1991 La Tabla 1 expresa los serotipos de Salmonella aislados en agua de mar en Gran Canaria desde 1982 a 1991. Nótese que algunos de ellos se van aislando a lo largo de todos los años de estudio mientras que otros aparecen en una, dos o tres ocasiones. Estos serotipos fueron determinados a partir de cepas enviadas al Centro de Referencia para Salmonella en Majadahonda (CNMVIS) durante diez años (1982- 1991).

37 Serotipos en el litoral y en el CNMVIS. La Tabla 3 expresa los serotipos de Salmonella (en %) aislados en agua de mar en Gran Canaria, en comparación con los obtenidos para todo el territorio nacional en el Centro de Referencia de Majadahonda (CNMVIS) durante diez años (1982- 1991). En la Tabla sólo se expresan las variedades comunes. -422 Cepas estudiamos en litoral frente a 30.000 en el resto de España. De los 36 serotipos obtenidos en aguas de mar de Canarias, sólo tres, no aislaron se encontraron en el CNMVIS de Majadahonda. - El serotipo Enteritidis es el más frecuente en CNMVIS y el segundo en nuestras aguas.

38 CUADRO SEROVARIEDADES DE Salmonella spp. AISLADAS EXCLUSIVAMENTE EN EL LITORAL DE GRAN CANARIA (1) Y OTRAS AISLADAS POCO FRECUENTEMENTE EN ESPAÑA (2) ENTRE 1982 Y 1991. (Se expresa el año de aislamiento, el origen y, entre paréntesis, el número de cepas aisladas). Litoral Gran Canaria España (CNMVIS)* Bardo 1 1985 (1)0 Emek 1 1989 (1)0 Urbana 1 1985 (15)0 Binza 2 1985 (1)1985 (3) Cerro 2 1985 (2)1991 Pienso (9), humano (1), otros (1) Corvallis 2 1985 (1)1991 alimentos (3) Goelzeau 2 1988 (13)1988 Humano (1), no humano (19 1989 humano (1) Kentucky 2 1991 1988 humano, alimentos Kottbus 2 19881988 humano Rideau 2 19901990 humano (1) Telelkebir 2 19911988 humano (1) *Centro Nacional de Microbiología, Virología e Inmunología Sanitarias Las serovariedades Bardo, Urbana y Emek no se aislan en el resto de España entre 1982 y 1991: ¿ES ESTO DIVERSIDAD DE SEROTIPOS DE SALMONELLA?

39 POLO, F., FIGUERAS, MJ., INZA, I., SALA,J., FLEISHER, JM., GUARRO. 1998. «Relationship between presence of Salmonella and indicators of faecal pollution in aquatic habitats.» EMS Microbiol. Lett. Mar 15;160(2):253- 6

40 ESTUDIO SOBRE SALMONELLA Y SU RELACIÓN CON LOS PARÁMETROS DE CONTAMINACIÓN FECAL EN EL EMISARIO SUBMARINO DE ARGUINEGUÍN (29/09/1999 – 31/07/2001)

41 Características generales de un Emisario Submarino.* -Propagación del efluente de un emisario submarino-Propagation of a sea outfall effluent. *( Quentin and De Rouville, Marine Pollution Bulletin, 17 (4) 1986.)a Estación depuradora de aguas residuales Emisario submarino Red de saneamiento Zona de Dilución Inicial/ Initial dilution Zone Secondary mixing /mezcla secundaria Penacho/Plume

42 - Propagación del efluente de un Emisario Submarino. La parte de superficie marina a la que llegan las aguas liberadas en el fondo es la Zona de Dilución Inicial. El proceso de Mezcla Secundaria sigue en toda la extensión de la pluma hasta agotarse los cpmponentes por dilución-dispersión Emisario Submarino de Playa del Hombre, Telde, Gran Canaria Zona de Dilución Inicial/ Secondary mixing /mezcla secundaria Zona de mezcla secundaria

43 ESTUDIO EN EL EMISARIO SUBMARINO DE ARGUINEGUÍN* 29/09/1999 – 31/07/2001 -Se analizaron 21 muestras de agua de mar de la superficie marina, tomadas desde una embarcación fueraborda en la Zona de Dilución Inicial y en la de Mezcla Secundaria del penacho o pluma de dispersión horizontal del emisario, desde el 29/09/1999 hasta 31/07/2001 - Se analizaron CT, CF, EF/100 ml y la presencia de Salmonella. - Los cuatro puntos de muestreo eran (Figuras ES1 y ES2): 0 m (1), lugar de afloramiento de las aguas emitidas por el ES a unos 20 m de profundidad; y tres puntos más en superficie a 100 m (2); 200 m (4) y 300 m (7), respectivamente separados del punto de origen siguiendo la corriente superficial. La longitud del emisario submarino, medida mediante un GPS es de 750 metros. - La Zona de Dilución Inicial a 0 m, corresponde al punto de afloramiento de las aguas del penacho vertical formado por el efluente de una EDAR en la que las aguas se someten a tratamiento secundario. *L. O’ Shanahan 1, M. Ojeda-Vargas 2, C. Monzón-Moreno 2 2002. Parámetros Bacteriológicos en el Penacho Horizontal del Emisario Submarino de El Pajar (Arguineguín, Municipio de Mogán, Gran Canaria) y litoral próximo. IV Reunión del Grupo de Microbiología del Medio Acuático. SOCIEDAD ESPAÑOLA DE MICROBIOLOGÍA. Sevilla, 3-6 Octubre 2002.

44 750 m FIGURA ES1: EMISARIO SUBMARINO DE ARGUINEGUÍN

45 Figura ES2. Concentración de Coliformes Fecales en Penacho de dispersión horizontal del Emisario Submarino de Arguineguín 100 m 0 m 200 m 300 m 4,031 x 10 3 1,041 x 10 2 3,4 x 10 1,9 x 10 CF/100 ML Siguiendo la trayectoria del penacho superficial, la concentración de las bacterias fecales disminuye muy rápidamente, de forma que a los 300 metros del origen, las concentraciones de estos parámetros se han reducido en torno a un 99 % de la concentración inicial. Zona de Dilución inicial Zona de Mezcla Secundaria Foto: Penacho del Emisario Submarino de LPGC.

46 Vista del penacho o pluma del ES de Las Palmas. La fotografía nos da idea del tamaño que puede adquirir la pluma de un emisario correspondiente a una población de 400.000 habitantes

47 Conclusiones. El vertido de las aguas residuales en puntos lejanos de la orilla del mar favorece la dilución del efluente y que la contaminación no alcance la zona de baños.

48 Conclusiones. La presencia de Salmonella en el agua de mar disminuye a medida que lo hacen las bacterias fecales indicadoras de contaminación. Véase que el 100 % de las muestras de agua de mar con una concentración de 10 4 CF/100 ml son positivas para Salmonella spp.

49 Nº de cepas Nº serovariedadesSerov. PredominantesOrigen I- 231 cepas 24 serotipos. S. Senftenberg (19 %) Sewage-contam. natural waters II- 645 cepas 49 serotipos. S.tel el kebir 117 cepas (18. 1%) Surface waters III- 865 cepas 52 serotipos; 12,7 cepas resistentes a antibióticos : Infantis, Panama, Agona, Anatum y Tphymurium IV- 759 cepas Sewage-contaminated natural waters V- 251 cepas 18 serotipos Agua de mar costera VI- 127 cepas 16 serotipos 23 cepas (18,11%); Agua de mar costera VII- 238 cepas* 28 serotipos. *lagarto endémico Gallotia stehlini; ** 130 de litoral marino, 63 aguas residuales. * 36 origen Humano; 9 intestino animal*; 193 Ambientales** VIII- 560 cepas 63 serotipos. S.ohio 11,3 % Aguas residuales y aislamientos clínicos IX- 208 cepas 21 serovariedades. S. anatum 29 cepas (14%) Playas contaminada x vertidos. X- 238 cepas 28 serotipos *lagarto endémico Gallotia stehlini; ** 130 de litoral marino, 63 aguas residuales -Diversos autores aíslan Salmonella en series de muestras de aguas naturales y obtienen, en general, que el número de serovariedades diferentes suele ser, un orden de magnitud más bajo que el número de cepas aisladas, alrededor del 10% del total de cepas. En la Tabla siguiente se expresan algunos de los trabajos. Esto permite afirmar que hay BAJA DIVERSIDAD de serovariedades de Salmonella en el medio natural, es decir, si en un medio natural, se muestrean i.e. 100 organismos que sólo pertenecen a 10 especies diferentes, en nuestra opinión la DIVERSIDAD es baja.

50 Nº de cepas Nº serovariedades Serov. Predominantes Origen XI- 441 cepas 41 serovariedades Infantis (16,2 %); S.Enteritidis /11,9 %) Agua de Mar XII- 823 cepas 55 serovariedades Enteritidis 111 cepas (13,2 %); Virchow 71 (8,6 %) Aguas naturales XIII 551 cepas 45 serovariedades Typhimurium 28% en agua de río ; S. Newport 43 % en wastewater. XIV 127 cepas 20 serovariedades - - Senftenberg 54 cepas (42,5 %) Aguas marinas costeras y moluscos de Galicia: Rías de Vigo, Arousa, Pontevedra, Muros-Noia

51 REFERENCIAS. I- K. GRUNNET AND B. BREST NIELSEN. 1969. Salmonella Types Isolated from the Gulf of Aarhus Compared with Types from Infected Human Beings, Animals, and Feed Products in Denmark. Appl. Microbiol. 1969 Dec; 18(6): 985:990.] II- SCHWARTBROD, J; J. C.BLOCK; J. COLOMB. 1983. «SURFACE WATER SALMONELLAE: SEROTYPES AND ANTIBIOTIC RESISTANCE» ARCH. ROUM. PATH. EXP. MICROBIOL. T. 32. NOS 2-3, pp. 179-189]. III- ALCAIDE, E. & GARAY, E. (1984). «R-Plasmid Transfer in Salmonella spp. Isolated from Wastewater and Sewage- Contaminated Surface Waters”. Appl. Environ. Microbiol. 48:435-438.] IV- Alcaide, E., Martinez, J.P. & Garay, E. 1984. Comparative study on Salmonella isolation from sewage contaminated natural waters. Journal of Applied Bacteriology 56, 365–371.] V- - VENKATESWARAN, K; T TAKAI, I M NAVARRO, H NAKANO, H HASHIMOTO, AND R J SIEBELING (1989). «Ecology of Vibrio cholerae non-O1 and Salmonella spp. and role of zooplankton in their seasonal distribution in Fukuyama coastal waters, Japan.» Appl. Environ. Microbiol. Jun; 55(6): 1591–1598. VI- - O' SHANAHAN, L., MONZÓN MORENO, C., GONZÁLEZ LAMA, Z., LÓPEZ ORGE, R.H. 1990. “Salmonella y otras bacterias de aguas costeras de Gran Canaria.” Boletín del Instituto Español de Oceanografía, 61(1):59-70. VII- MONZÓN MORENO, C., GONZÁLEZ LAMA, Z., LÓPEZ ORGE, R. H., O' SHANAHAN, L. 1991. “Inventario de salmonelas aisladas en Gran Canaria.” Revista Española de Microbiología Clínica, 1991, 6(3): 140-142. VIII- LAFARGA, M.A., J. CASTILLO; M. NAVARRO, RAFAEL GÓMEZ-LUS. 1991. « Serotipos de Salmonella enterica en aguas residuales de Zaragoza. Comparación con aislamientos clínicos. 1982-1989. MICROBIOLOGÍA SEM 7 (1991), 23-24. IX.- ALONSO, JL, M.A. ALONSO, M.A. USERA 8, A. ECHEITA. 1992. «The occurrence of salmonella serotypes in marine recreational waters of Valencia, Spain.»MICROBIOLOGÍA SEM 8 (1992):44-48. X - - O' SHANAHAN, L., MONZÓN MORENO, C. 1991. “Qualité microbiologique des plages de Gran Canaria (Iles Canaries, Espagne).” Revue International D' Oceanographie Médicale, 1991, tomos 101-104: 83-89.

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55 MONZÓN C., O' SHANAHAN L., ECHEITA, M.A., USERA M.A., POPOFF, M.Y..1993. “Nuevo serotipo de Salmonella: Grancanaria.” Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica, 11(4):228-229. Resumen. En 1990 el microbiólogo del Laboratorio de Microbiología del Departamento de Ciencias Clínicas de la ULPGC, Profesor Carmelo Monzón Moreno, aisló una cepa de Salmonella del contenido intestinal de un ejemplar de lagarto gigante endémico de Gran Canaria Gallotia stehlini. La cepa hallada fue remitida al Centro Internacional de Referencia de Salmonella del Instituto Pasteur de París en donde se determinó que se trataba de una nueva serovariedad dentro de la especie S. enterica subespecie I. Es costumbre que estos nuevos hallazgos reciban el nombre del lugar geográfico donde se aíslan por primera vez, por lo que se propuso «Grancanaria» como nombre para esta nueva serovariedad, habiéndose registrado en el World Health Organization Salmonella Centre como: Sallmonella enterica subespecie I, serotipo Grancanaria, con la fórmula antigénica 16: Z29: [1,6]. El año de su publicación, 1993, era el primer nuevo serotipo aislado en Canarias y en España. Aunque ha sido aislado por primera vez en un animal de sangra fría puede causar enfermedades en el ser humano. In the picture, the Gran Canaria giant lizard Gallotia stehlini (Ehrenfried Schenkel|Schenkel, 1901), a species of lizard in the Lacertidae family that grows to lengths up to 80 cm. It is endemic to Gran Canaria in the Canary Islands, Spain. Its natural habitats are temperate shrubland*, Mediterranean- type shrubby vegetation, rocky areas, rocky shores, and pastureland**. *matorrales; **pastizales.

56 DIVERSIDAD DE SEROTIPOS DE SALMONELLA? Salmonella Kottbus outbreak in infants in Gran Canaria... www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/ 17868561 - Traducir esta páginaTraducir esta página de R Palmera-Suárez - ‎2007 - ‎Citado por 14 - ‎Artículos relacionadosCitado por 14Artículos relacionados Euro Surveill. 2007 Jul 12;12(7):E070712.2. Salmonella Kottbus outbreak in infants in Gran Canaria (Spain), caused by bottled water, August- November 2006