1 CICLO CELULAR MITOSIS - MEIOSIS

2 CICLO CELULAR

3 Modelos experimentales y técnicas de estudioOvocitos Fusión de células en cultivos Hongos unicelulares: estudios genéticos Estudios bioquímicos libres de células Técnicas: Cuantificación de células en mitosis Detección de células que duplican su ADN (radioautografía con timidina tritiada) Cuantificación de células con distinta cantidad de ADN (citometría de flujo)

4 El corazón del sistema de control del Ciclo Celular en eucariontes unicelularesOrganizacion de la maquinaria de la mitosis Factor promotor de la fase M Kinasa Start Organización de la maquinaria de la replicación del ADN

5 Actividad de los complejos cdk-ciclinas durante el ciclo celular en mamíferos

6 Regulación de las concentraciones de Ciclinas mitóticas

7 Mecanismos de regulación de la proteinquinasasdependientes de ciclinas (Cdk)

8 Puntos de control del Ciclo Celular

9 Puntos de control del Ciclo Celular que tienden a asegurar que los genomas completos y no dañados se transmitan a las células hijas.

10 Factores que regulan el pasaje por los puntos de control del ciclo celular-Disponibilidad de factores tróficos: lo estimulan (protooncogenes). -Adhesión al sustrato: es necesaria para la proliferación de las células que no son células madre. -Limitación por contacto: no limita la proliferación de células madre. -Integridad del ADN: su alteración lo detiene (proteínas supresoras de tumores: retinoblastoma, p53, p21). -Duplicación completa del ADN: la falta de la misma detiene el ciclo (proteínas supresoras de tumores). -Alineación de los cromosomas en el plano ecuatorial durante la metafase con los cinetocoros de cada cromátide unidos a los microtúbulos respectivos: fenómeno necesario para la activación del complejo promotor de la anafase.

11 Regulación del ciclo celular por las proteínas retinoblastoma (Rb) yE2F durante la etapa tardía de G1

12 Entrada en fase S por acción de Cdk2 y ciclina E

13 Detención del ciclo celular en los puntos de control de lesión del ADNy rol de la proteína p53 en la detención del ciclo en G1.

14 El ADN no se duplica dos veces en el mismo ciclo celulardebido a que durante la replicación del ADN se separan del sitio de inicio de la replicación las proteínas MCM que no pueden volver a unirse a dicho sitio hasta la interfase siguiente.

15 LA FASE M DEL CICLO CELULAR

16 Etapas de la mitosis (Fase M) en las células animales

17 Dianas del Cdk1/ciclina B

18 Cromosomas Mitóticos y en G1Los cromosomas mitóticos representan el nivel más alto de condensación de la cromatina ¿Cuáles son las bases moleculares de ésta condensación?

19 Cohesinas y condensinasUnión de cromátides hermanas por cohesina Enrollamiento del ADN por condensinas Dímero de SMC (Structural Maintenance of Chromosomes) en complejo de condensina o cohesina Son complejos proteicos que contienen dímeros de proteínas SMC y pueden unirse al ADN por sus extremos globulares Las condensinas hidrolizan ATP y pueden “enrollar” el ADN bajo condiciones experimentales. No se conoce el mecanismo preciso de condensación por condensina Las cohesinas “unen” a las cromátides hemanas a lo largo de toda su extensión

20 Acción de las condensinas y de las cohesinas

21 LA LÁMINA NUCLEAR Y SU DESPOLIMERIZACIÓN

22 Envoltura Nuclear

23 EL CINETOCORO

24 Regulación de la cohesión de cromátides hermanas durante el ciclo celular en vertebrados

25 Ciclo del centrosoma

26 Las Tres Clases de Microtúbulos del Huso Mitótico

27 El huso acromático Separación de los centríolos a ambos polos. Se produce por proteínas motoras que se desplazan hacia los extremos +, interactuando sobre microtúbulos antiparalelos Esas proteínas motoras están relacionadas a la kinesina

28 Etapas de la Mitosis: -Profase: Condensación de los cromosomas, ensamblado del huso mitótico. -Prometafase: Ruptura de la envoltura nuclear y contacto entre los microtúbulos del huso y los cromosomas (a través de los cinetocoros): movimiento activo.

29 Etapas de la Mitosis: -Metafase: los cromosomas se alinean en el ecuador.

30 Etapas de la Mitosis: -Anafase: las cromátides hermanas se separan y se dirigen a los polos opuestos por efecto del acortamiento de los microtúbulos cinetocóricos y por el alejamiento de los polos del huso. Una vez que todos los cromosomas se hallan alineados sobre el huso, la activación del complejo promotor de la anafase (APC) induce la ubiquitinización y degradación de la ciclina B y de la securina que inhibe a la separasa. Así, la separasa degrada a las cohesinas que mantienen unidas a las cromátides hermanas permitiendo su separación. La degradación de la Cdk1 por la degradación de la ciclina B permite que la célula abandone la mitosis e ingrese en la interfase.

31 Punto de control del ensamblaje del huso

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33 Los dos procesos que separan las cromátides en anafase

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35 Etapas de la Mitosis: -Telofase: los dos juegos de cromátides hijas arriban a los polos opuestos y se reensamblan las envolturas nucleares formando dos núcleos y terminando la mitosis. Citocinesis: La citocinesis comienza con el ensamblado del anillo contráctil.

36 Mitosis: Consecuencias biológicasComo resultado de la mitosis, se generan dos células hijas genéticamente idénticas a la célula madre En animales, la mitosis es responsable del crecimiento de los organismos y de la regeneración de sus tejidos.

37 MEIOSIS Se separan los cromosomas homólogos en células distintas, reduciendo a la mitad el número de cromosomas Se produce variabilidad genética

38 Profase I meiótica

39 Sinapsis de los homólogos durante la profase I

40 Complejo Sinaptonémico

41 Durante el paquitene ocurre la recombinación o crossing-overUna endonucleasa rompe la doble hebra de un cromosoma. Luego, una exonucleasa crea dos extremos 3´que encuentran las regiones homólogas de un segundo cromosoma y comienza la sinapsis. La molécula unida puede resolverse por un corte que separa los dos cromosomas Hay proteínas específicas involucradas en el proceso: las recombinasas ej: RAD51-DMC1 en eucariontes. RecA (Rad51) y RecBCD en procariontes

42 Meiosis I

43 Comparación entre metafase y anafase I yII

44 Mecanismos de variabilidad genética de la Meiosis-Recombinación genética -Segregación al azar de los homólogos en la anafase I

45 Ovogénesis

46 Espermatogénesis

47 Errores en la Meiosis: No disyunción

48 Comparación Mitosis-Meiosis

49 Autoevaluación: Explique en qué etapa del ciclo celular se encuentran las células satélites del músculo estriado esquelético y cómo responden dichas células cuando se produce una lesión parcial de este tejido (integración con Histología). 2) Explique qué cambio se produce en el ciclo celular del ovocito I de un folículo maduro cuando recibe el pico de hormona luteinizante (LH). La síntesis de qué proteína intracelular produce este cambio en el ciclo celular? (integración con Embriología e Histología). 3) La radioterapia y la quimioterapia suelen producir daños en el ADN. Trate de explicar por qué dichas terapias producen mayor muerte celular en células neoplásicas y en células de la médula ósea y del Epitelio intestinal que en fibras musculares y neuronas (integración con Histología).

50 Autoevaluación: 4) Explique por qué al fusionar en cultivo celular células en miotosis con células en interfase, se condensa la cromatina de las células en interfase. 5) Mencione cuáles son los mecanismos moleculares que producen variabilidad genética en la reproducción sexual (integración con Embriología). 6) Explique qué tipos de alteraciones cromosómicas puede producir la falla en la separación o disyunción de los cromosomas durante la división celular. Explique si existen diferencias en las consecuencias de la no disyunción si ésta se produce en la meiosis o en la mitosis (integración con Genética y Embriología).