1 Determinación de anticuerpos antinuclearesAutoinmunidad Determinación de anticuerpos antinucleares 1065. Inmunología Aplicada.Enseñanza Experimental Dra. Ana Esther Aguilar Cárdenas

2 Técnicas para la determinación de los anticuerpos antinuclearesLos anticuerpos antinucleares (ANA) son anticuerpos dirigidos contra el material nuclear y se pueden detectar mediante técnicas inmunológicas. Inmunofluorescencia Ensayos inmunoenzimáticos

3 Títulos de ANA El título de una prueba positiva de ANA es importante para el diagnóstico de los trastornos del tejido conectivo. Los individuos sanos tienen títulos negativos o bajos. Los pacientes con trastornos del tejido conectivo generalmente tienen títulos elevados. Pueden observarse títulos intermedios o altos en familiares no afectados, en personas mayores, en mujeres gestantes, en pacientes con infecciones crónicas, en pacientes con neoplasias y en algunos individuos sanos.

4 Valor predictivo de las pruebas de ANAEl valor predictivo positivo es una medida del número de individuos con una prueba positiva que tienen la enfermedad, comparado con todos los individuos que tienen un resultado positivo.

5 Tipos de ANA En inmunofluorescencia, se observan cinco patrones básicos de ANA: Moteado Homogéneo Periférico Centromérico Nucleolar

6 El modelo moteado se correlaciona con anticuerpos frente constituyentes nucleares que no son DNA (pe RNP) y se observa en TMTC, LES y esclerosis sistémica progresiva. Los patrones homogéneo y periférico se correlacionan con anticuerpos frente a histonas y al DNA nativo respectivamente y se asocian a LES. Estos dos patrones pueden coexistir.

7 El modelo centromérico es característico del síndrome de CRESTLos anticuerpos dirigidos contra nucleolos producen un patrón nucleolar y se asocia con esclerodermia

8 Células HEp-2 con patrón moteado

9 Enfermedades asociadas

10 Otros autoanticuerpos (cANCA/pANCA)Anti-proteínasa 3: cANCA Anti-MPO: pANCA

11 Enfermedades asociadas

12 Portaobjetos con células Hep-2 Suero del paciente con anticuerposInmunofluorescencia Procedimiento Portaobjetos con células Hep-2 como sustrato DNAdoble cadena DNAcadena sencilla Ribonucleoproteínas Histonas + Suero del paciente con anticuerpos Incubar y lavar

13 Anti IgG humana marcada con isotiocianato de fluoresceínaIncubar lavar Solución de montaje Observar en microscopio estimulando al fluorocromo con luz UV