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5 El CMH es un conjunto de genes codificados en el brazo corto del cromosoma 6, las moléculas de histocompatibilidad se localizan en la superficie de las células nucleadas; las cuales en el humano se denominan antígenos HLA. Este grupo de genes se heredan de acuerdo con las leyes de Mendel, como caracteres codominantes.

6 consiste en determinar cuáles de todas las variantes conocidas para un locus están presentes en un individuo. Hasta hace algunos años la tipificación HLA se realizaba con técnicas serológicas, utilizando sueros específicos contra los distintos antígenos HLA. Mediante este método se detectan los antígenos presentes en la membrana de los linfocitos estudiados. En la actualidad la tipificación se realiza utilizando técnicas de Biología Molecular, en la que se estudian los genes del individuo.

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9 Detección selectiva y diferenciación de los AC anti HLA-ABC citotóxicos dependientes del complemento. Microplacas MZP

10 Incubar los Ag HLA conocidos en presencia de complemento con el suero del paciente Hay lisis si hay presencia de del AC correspondiente Lisis se visualiza con el colorante eosina Observación en un microscopio de contraste de fase inverso

11 EOSINA LISIS OBSERVACION MUESTRA HLA TIPO I

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13 Detección de AC específicos de HLA, antes y después de un transplante de órgano. Detecta AC IgG específicos para los Ag HLA clase I y II

14 Se añade la muestra uniéndose durante la incubación los Ac con el Ag fijado se añade anti IgG humana conjugada con fosfatasa alcalina a cada pozo. una segunda incubacion permite que el conjugado se una a los Ac. Se añade un sustrato cromogénico PNPP y tras incubación la actividad enzimática presente en el pocillo es proporcional a la intensidad de color desarrollado. Se evalua fotometricamente

15 E SUSTRATO E E COLOR

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17 Para determinación del Ag HLA- B27 El HLA B27 se asocia con la espondilitis esquilosante

18 Incubar los AC anti-HLA conocidos en presencia de complemento con una suspensión de linfocitos del paciente Hay lisis si hay presencia de del AC correspondiente Lisis se visualiza con el colorante eosina Observación en un microscopio de contraste de fase inverso

19 EOSINA LISIS OBSERVACION MUESTRA

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21 Para la detección de Ac anti HLA-DR/DQ Microplaca MZP

22 Incubar los Ag HLA conocidos en presencia de complemento con el suero del paciente Hay lisis si hay presencia de del AC correspondiente Lisis se visualiza con el colorante eosina Observación en un microscopio de contraste de fase inverso

23 EOSINA LISIS OBSERVACION MUESTRA HLA TIPO II

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25 Detección de Ac anti HLA Utiliza microplacas cubiertas con Ag HLA de clase I y II, que tiene propiedades fluorescentes y que se excitan a 488 nm

26 Incubar cada grupo de bolas por separado con el suero en estudio Tenir con AC anti-IgG humana conjugada con FITC Detección por citometría de flujo

27 FI TC FITCFITCFITCFITC

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29 Para detección de AC clase I y clase II con una técnica microlinfotoxica dependiente del complemento Bandejas ABC de LCT contienen LT con Ag HLA clase I Bandejas LCT30D contienen LB con Ag HLA clase II

30 Incubar los Ag HLA conocidos en presencia de complemento con el suero del paciente Hay lisis si hay presencia de del AC correspondiente Lisis se visualiza con el colorante eosina Observación en un microscopio de contraste de fase inverso

31 EOSINA LISIS OBSERVACION MUESTRA HLA TIPO I y II

32 SUBTEMAS

33 Lupus Eritematoso SistémicoLES.doc LES.doc Síndrome Antifosfolípido Síndrome Antifosfolípido Enfermedad Neurológica Autoinmune Enfermedad Neurológica Autoinmune Síndrome de Sjögren Síndrome de Sjögren Enfermedad Tiroidea Autoinmune Enfermedad Tiroidea Autoinmune Enfermedad Gástrica Autoinmune Enfermedad Gástrica Autoinmune PRUEBAS INMUNOLÓGICAS PRUEBAS INMUNOLÓGICAS

34 ENAS ANTICARDIOLIPINAS ANAS ANCAS ANTI - DNA ANTI - DNAATAS

35 Los antígenos nucleares extraíbles (ENA) son macromoléculas acídicas (no histónicas) extraídas de la fracción soluble salina de los núcleos celulares, de ahí el nombre de ENA. TECNICAS