1 ESTUDIO DE SENSIBILIDAD ANTIBIOTIMICROBIANAProf. Laura Irene Piccoli Microbiología General FaCENA - UNNE

2 ¿Cómo predecir desde el laboratorio el éxito terapéutico?PRUEBAS CUANTITATIVAS PRUEBAS CUALITATIVAS

3 PRUEBAS CUANTITATIVASESTANDARIZADOS: CLSI CIM-mínima concentración de antibiótico capaz de inhibir el crecimiento de una población bacteriana (inoculo estandarizado 5 ´ UFC/ml). CBM- mínima concentración de antibiótico capaz de matar el 99,9% de una población bacteriana (inoculo estandarizado inicial). MACRO Y MICRODILUCION EN CALDO DILUCION EN AGAR GRADIENTE ANTIBIOTICO

4 Mismo Inóculo Punto de quiebre= 8 ug/ml Concentraciones crecientes de antibióticos

5 RESISTENCIA DE UNA POBLACIONCapacidad de una cepa de resistir a la acción de una concentración dada de un antibiótico en un medio de cultivo.

6 PRUEBAS CUALITATIVAS DISCO DIFUSIONMétodo estandarizado de acuerdo a CLSI Preparación y estandarización del inoculo Inoculación de las placas Aplicación de discos Incubación Medida de zonas de inhibición Control de calidad

7 Cepa ATCC

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9 E-TEST

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11 Eficacia Terapéutica RESISTENCIA DE UNA POBLACIONen el sitio donde se esta PRODUCIENDO UNA INFECCION Eficacia Terapéutica

12 CURVA DE MUERTE

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14 Sensibilidad vs. ResistenciaPuntos de quiebre o puntos de corte microbiológicos Se establecen de acuerdo a: COMPORTAMIENTO BACTERIANO Distribución poblacional Presencia de mecanismos de resistencia FARMACOCINÉTICA. Y FARMACODINAMIA DE LAS DROGAS Biodisponibilidad Efecto post antibiótico RESPUESTA CLÍNICA Y MICROBIOLÓGICA.

15 OTROS METODOS PARA DETECTAR RESISTENCIA: Pruebas directas Ejemplo: INVESTIGACION DE BETA LACTAMASA DETECCION DE GENES DE RESISTENCIA Ejemplo: mecA

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19 Los conocimientos de la farmacocinética y farmacodinamia de los antibióticos son necesarios para la adecuada interpretación de los estudios de sensibilidad.

20 Farmacocinética Concentraciones séricas máximas (Cmax)Tiempo requerido para alcanzar la concentración máxima (Tmax) Vida media plasmática Tasa de unión a proteínas Difusión a los diferentes tejidos e incluso difusión intracelular “Barreras a la penetración de los antibióticos (Ej: LCR, próstata )

21 Farmacodinamia Interacción del antibiótico con el microorganismo causal de la infección y con la flora normal De acuerdo a actividad bactericida o bacteriostatica y duración del efecto bactericida: Antibióticos tiempo-dependientes Antibióticos concentración dependientes

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26 Características Farmacocinéticas:Concentración K= Tasa de destrucción Tiempo Relación Dosis-Antibióticos Antibióticos dosis dependientes ABC/CIM = K0>K1>K2 Relación Pico/CIM (Ej: Aminoglucósidos y Quinolonas) Antibióticos Dósis Independiente: Tiempo por encima de la CIM (Ej: ß-lactámicos)

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36 Que se puede hacer? CONTROL DE LA RESISTENCIA Control epidemiológico Modificación de antimicrobianos Inhibición de enzimas inactivantes Eliminación de plásmidos de resistencia

37 Desde el Laboratorio CONTROL EPIDEMIOLÓGICO (I) Uso específico y conservador de antimicrobianos Dosis y duración correctas Conocer la sensibilidad del microorganismo Antimicrobianos de corto espectro Uso correcto de combinaciones

38 En general en todo el sistema de saludCONTROL EPIDEMILÓGICO (II) Uso profiláctico correcto . Evitar diseminación de cepas resistentes . Lavado de manos . Aislamiento de pacientes . Monitorización de microorganismos resistentes . Restricción de antimicrobianos de uso humano

39 2000 A.C. Come este trozo de raíz Año 1000: Comer estas raíces es una costumbre pagana. Repite esta plegaria 1850: Esta plegaria es una nueva superstición. Bebe esta poción : Esta poción esta preparada con aceite de serpiente. Toma esta pastilla : Esta pastilla es ineficaz. Toma penicilina : Oh!!! Los microorganismos se han hecho resistentes a este antibiótico. Toma tetraciclina : Otros 40 oh!!!!Toma este antibiótico más potente : Los microorganismos han vencido. Come este trozo de raíz Fuente:OMS