1 FAMILIA STREPTOCOCCACEAE

2 Bacterias similares a los StreptococcusLeuconostoc Pediococcus Alloiococccus Vagococcus Globicatella Tetragenococcus Helcococcus

3 Enterococcus feacalisCambios en la taxonomìa de los Streptococus del grupo D. creación de un nuevo género. descripción de varias especies nuevas animales y humanas.

4 Leuconostoc

5 Pediococcus

6 GENERALIDADES Cocos Gram positivos en cadena o en pares.Catalasa negativos. Oxidasa Negativos Anaerobios facultativos 5-7% CO2, algunos anaerobios estrictos. Se encuentran en piel y en la mucosa orofaringea.

7 ANAEROBIOS FACULTATIVOSStreptococcus Enterococcus Aerococcus Lactococcus Leuconostoc Pediococcus Gemella Alloiococccus Vagococcus Tetragenococcus Globicatella Helcococcus

8 Anaerobios estrictos Peptococcus Peptostreptococcus RuminococcusCoprococcus Sarcina

9 Generalidades Streptococcus Enterococcus AerococcusDe importancia médica son Homofermentadores. Oxidasa negativos, Catalasa negativos Género Streptococcus en medios líquidos : cadenas o cadenas de diplococos Composición de la pared es similar a las bacterias Gram positivas.

10 Pared de bacterias Gram positivas

11 CLASIFICACION SEROLOGICA DE StreptococusEn función de antígenos de hidratos de carbono superficiales.

12 CLASIFICACION

13 Rebeca Lancefield Estableció el sistema de agrupación de lancefield para Streptococcus beta hemolíticos. los antígenos son polisacáridos de pared celular como los Streptococcus del grupo A,B,C,F,G. lipoteicoicos de pared celular Streptococcus del grupo D y especies de Enterococcus.

14 Especies de estreptococos según la clasificación de Lancefield y la producción de hemólisisGrupo Especie (más frecuente) Hemólisis Grupo A S. pyogenes Beta Grupo B S. agalactiae Beta Grupo C,F,G S. equi Beta S. dysgalactiae Grupo viridans S. sanguis Alfa S. mitis S. salivarius S. mutans S. anginosus Grupo D S, bovis Variable Grupo Enterococcus S. faecalis Variable S. faecium Neumococo S. pneumoniae Alfa o no hemólisis Anaerobios Peptococcus No hemólisis Peptoestreptococcus

15 Streptococcus médicamente importantes

16 Grupo viridans No posen ninguno de los antìgenos de la pared celular de lancefield

17 Streeptococcus pyogenes

18 Factores de virulencia de StreptococcusS. pyogenes: PRINCIPAL ANTIGENO DE PARED CELULAR: POLISACARIDO: L-ramnosa y N-acetil D glucosamina. Fiebre Necrosis dèrmica y cardiaca. Lisis de eritrocitos y plaquetas.

19 Factores de virulencia de StreptococcusCAPSULA PROTEINA M: Proteínas fibrilares asociada a la membrana estable a ácidos y al calor y sensible a la tripsina. Resistencia a la fagocitosis. Hay 80 serotipos reconocidos de proteina M. FACTOR DE OPACIDAD: asociado a la proteína M Alfa lipoproteìnasa

20 Streptococcus pyogenes

21 Determinantes Antigénicos del Streptococcus pyogenes

22 S. pyogenes HEMOLISINAS: Streptolisina O y la S.O es làbil al oxigeno antigénica inhibida por el colesterol tóxica para leucocitos responsable de la beta hemólisis. También la produce grupo C Y G Toxicas para neutrofilos y macrofagos ASTOS: anticuerpos anti streptolisina O: Diagnóstico retrospectivo de infecciones faringeas

23 Estreptocinasa ( Fibrinolisina)Deshace los coagulos de fibrina. Existen varias formas antigénicas Produce anticuerpos neutrali

24 Características definitorias del síndrome del shock tóxico estreptocócicoI. Aislamiento de un Streptococcus pyogenes A. De una muestra habitualmente estéril (LCR, sangre, líquido pleural, biopsia de tejido, etc) B. De una muestra habitualmente no estéril (esputo, cultivo vaginal, secreción cutánea superficial, etc.) II. Signos clínicos de gravedad A. Hipotensión: presión sistólica < 90 mmHg en adultos y B. Dos o más de los siguientes signos: 1. Alteración de la función renal (creatinina>2 mg/dl). En pacientes con deterioro previo, un aumento doble a la cifra basal 2. Coagulopatía: plaquetas< ´ mm3, o bien una coagulación intravascular diseminada (CID) 3. Afectación hepática: incremento, como mínimo doble, en las cifras de la bioquímica hepática normal(GOT, GPT, FA, bilirrubina) 4. Síndrome respiratorio del adulto, definido por infiltrado pulmonar agudo con hipoxemia en ausencia de cardiopatía 5. Presencia de un exantema generalizado que puede descamar 6. Necrosis de partes blandas ( miositis o gangrena)

25 ENZIMAS Streptoquinasa Hialuronidasa NADasaHidroliza de los coágulos de fibrina y tienen un papel en la virulencia al impedir la formación de la barrera de fibrina en la periferia de las infecciones. Hialuronidasa Enzima que desdobla el àcido hialurònico constituyente importante de la sustancia intercelular del tejido conjuntivo. NADasa Produce la glomerunefritis

26 factores de virulencia S. agalactiaeantìgeno polisacárido capsular agrupante de lancefield ( ramnosa glucosamina) y antigeno proteìcos. Posee gran virulencia.

27 factores de virulencia S. pneumoniae

28 factores de virulencia S. pneumoniaeresistente a la fagocitosis presencia de cápsula. 84 tipos capsulares 23 de los cuales causan 88% de bacteriemias y meningitis

29 S. pneumoniae ADHESINAS: interactúan con receptores disacáridos en la superficie del epitelio faringeo. Alfa hemolisinas Autolisinas Moléculas de superficie celular.

30 Streptococcus pneumoniaeNEUMOLISINA: Interactúa con la membrana celular de una variedad de células del huesped. Inhibe la fagocitosis Detiene el movimiento ciliar y compromete la depuración bacteriana.

31 Streptococcus pneumoniaeAutolisina: LISIS- DISPERSIÒN

32 STREPTOCOCCUS IMPORTANTES

33 CLASIFICACION Las colonias de streptococcus en agar sangre forman diversos patrones en el agar: Streptococcus Beta-Hemolíticos producen una zona circundante clara. La hemólisis Beta se produce cuando las enzimas streptocòcicas extracelulares llamadas streptolisinas destruyen los eritrocitos.

34 Streptococcus Alfa-Hemolíticos:Zona circundante verdosa.

35 3. Streptococcus no Hemolíticos o Hemolíticos Gama: Crecen sin modificar la apariencia del agar

36 CLASIFICACION DE LOS Streptococcus

37 CLASIFICACIÒN DE LOS StreptococcusGrupo A S. pyogenes Beta Grupo B S. agalactiae Beta Grupo C,F,G S. equi Beta S. dysgalactiae Grupo viridans S. sanguis Alfa S. mitis S. salivarius S. mutans S. anginosus Grupo D S, bovis Variable Grupo Enterococcus S. faecalis Variable S. faecium Neumococo S. pneumoniae Alfa o no hemólisis Anaerobios Peptococcus No hemólisis Peptoestreptococcus

38 Streptococcus BETA HEMOLITICOS DEL GRUPO AS. pyogenes: Hombre reservorio natural. Transmitido persona persona por vía respiratoria. Faringitis estreptocócica : edad escolar 5-15 años

39 PBAS DE LABORATORIIO Camp Manitol Bilis esculina

40 glomeronefritis Enf. Inflamatoria del glomérulo renal HipotensiónHematuria Proteinuria Leucocitos en orina Rápida 10 días después de una faringitis 0 o 3 semanas después de una infección cutánea.

41 FR. Y GLOMERONEFRITIS los streptococcus inducen la formación de anticuerpos antistreptococcicos que reaccionan en forma cruzada contra tejido cardiaco, esquelético y articulaciones

42 Streptococcus beta hemolìtico del grupo BS. agalactiae: Poseen cápsula. En Agar sangre forman colonias de color blanco grisáceo de tipo opaco, rodeadas de una banda angosta de hemólisis beta; Algunos no presentan hemólisis. Son resistentes a la bacitracina. Prueba de CAMP positiva.

43 S. agalactiae MAYOR TASA INCIDENCIA EN PREMATUROSEnfermedad en periodo perinatal y neonatal. Colonizadas en la vagina y recto Asintomática 5- 35% Embarazadas Tracto gastroinstestinal principal reservorio Nosocomial Infecciones ascendentes en útero Membranas rotas COMIENZO DE LA ENFERMEDAD DURANTE LOS 5 PRIMEROS DÌAS DE NACIMIENTO Bacteremia Meningitis

44 Streptococcus BETA hemolíticos del grupo CHIDRATO DE CARBONO DEL GRUPO C. Produce enzimas similares a los del grupo A S. equisimilis S. zooepidimicus S. equi S. dysgalactiae S. equisimilis: Faringitis, amigdalitis, celulitis, neumonía, epiglotitis bacteremia, meningitis, osteomielitis, endocarditis, endoftalmitits. Enfermedades de base. S. zooepidimicus: cerdos Caballos Aves de corral. Faringitis humana: leches y quesos. S. equi: Infecciones respiratorias en caballos. S. dysgalactiae: mastitis bovina

45 Streptococcus del grupo DS. equinus: T.G caballos S. bovis: infecciones humanas y animales. Endocarditis Asociado a cáncer de colon Bacteremia. Antigeno de ácido lipoteicoico del grupo D. beta, alfa o no hemolítico.

46 Streptococcus BETA hemolíticos del grupo FS. miller S. anginosus S. constellatus S. intermedious Beta, alfa o gamma hemólisis Colonias diminutas en punta de alfiler a las 24 horas. Celulitis Abscesos de tejidos profundos Bacteremia Osteomielitis endocarditis

47 Streptococus beta hemoliticos del grupo Gmicrobiota normal humana gastrointestinal, vaginal orofaringea y cutánea. OTROS Streptococcus beta hemolíticos : S. canis S. porcinus S. iniae: delfines S. intestinalis: colon de cerdo S. phocoae

48 S. pneumoniae Neumonía bacteriana adquirida en comunidad.5-10% adultos son portadores TRS. lactantes: 3- 4 meses se colonizan.

49 S. pneumoniae Envejecimiento del sistema inmune.Disminución en la producción de anticuerpos. Compromiso del sistema mucociliar de depuraciòn Diabetes alcoholismo

50 Principal factor de virulencia capsulaPolisacáridos Eluden la ingestión y muerte por células fagocitarias 80 tipos capsulares antigenicamente diferentes. bacteremia: 3,4,10,19

51 S. pneumoniae vacunas polisacáridos capsulares de cada uno de los 23 serotipos aislados con mayor frecuencia.

52 neumonìa FACTORES PREDISPONENTES: enf. Broncopulmonaresinfecciones virales del TRS. comienzo brusco. tos abundante, producción de esputo por la reacción inflamatoria alveolar. HEMOCULTIVOS MORTALIDAD 5% Asociado a bacteremia 20-30% Meningitis.

53 S. pneumoniae Meningitis posteriores a fracturas de cràneo desde infecciones cercanas. 20-50% de las otitis media sinusitis. componente transitorio de la microbiota vaginal. VHI Resistencia a la penicilina Proteínas de unión a la penicilina alteradas

54 Grupo viridans S. sanguis S. oralis S.gordonii S. mitis S. mutansNo posen ninguno de los antigenos de la pared celular de lancefield Streptococcus viridans Alfa hemoliticos y no hemoliticos. Microbiota normal del TRS Y TUG

55 S. viridans Endocarditis

56 streptococcus mutans

57 Enterococus

58 Enterococcus faecalis

59

60 ENTEROCOCOS Habitan en el segmento intestinal inferior y con frecuencia se relaciona con infecciones del tracto urinario. E. faecalis: tracto biliar, urinario septicemia endocarditis, infección de heridas, abscesos intrabdominales, peritonitis meningitis.

61 PRUEBAS PARA LA IDENTIFICACION DE STREPTOCOCCUS ALFA Y BETA HEMOLITICOSPROPIEDADES HEMOLITICAS PRUEBAS SEROLOGICAS ANTIGENOS CAPSULARES O DE PARED FISIOLOGICAS Y BIOQUIMICAS

62

63 COLORACION DE GRAM : cocos Gram positivos o Gram variables en cadena o paresPRUEBA DE CATALASA ( - ) TIPO DE HEMOLISIS

64 Medios de cultivo AGAR SANGRE CON BASE PEPTONADA

65 S. pyogenes GRUPO A 0.5 mm de diametro Translucidas LisaHalo de beta hemólisis es de 2- 4 veces el tamaño de la colonia. Convexas-borde entero

66 GRUPOS C Y G TINTE DORADO HALOS DE HEMOLISIS MUY GRANDES

67 Clasificación por pbas lab.

68 GRUPO B colonias más grandes halo menorhemólisis es más débil y menos aparente. 11% NO HEMOLITICA

69 GRUPO D- GRUPO F ALFA HEMOLITICA O NO HEMOLITICA COLONIAS GRISES LISASBORDES ENTEROS COLONIAS MUY PEQUEÑAS COLONIAS DIMINUTAS PUNTA DE ALFILER GRAN HALO DE BETA HEMOLISIS.

70 S. pneumoniae Diferentes tipos de colonias.Depende del grado de encapsulaciòn. Gran halo de alfa hemolisis. Intensamente verde. Mucoides Grisàceo. Parecen gotas de aceite. Incubaciòn prolongada tachuela.

71 Identificación presuntiva de StreptococcusS. BETAHEMOLITICOS S. Pneumoniae S. grupo D Enterococcus identificación definitiva usando procedimientos serològicos que detectan antìgenos del grupo de lancefield( A,B,C,D,F,G) o los antigenos capsulares en S pneumoniae.

72 D y ENTEROCOCCUS D Y ENTEROCOCCUS A, B, C, F, G ALFA GAMA BETAS, pneumoniae Optoquina sensible HALOS DE 14 mm Grupo D NO TOLERA LA SAL Enterococo crece en NaCl Grupo A sensible a bacitracina (TAXO A) 004 unidades -TMX RESISTENTE Enterococo crece en NaCl Grupo Viridans identificación por reacciones bioquímicas Grupo B prueba CAMP positiva – HIDRÓLISIS DEL HIPURATO + Grupo Viridans, optoquina resistentes identificación por reacciones bioquímicas

73 Sensibilidad a la bacitracina TAXO A OO4 unidadesGrupo A Halo de inhibición No tan específica 10% cepas C Y G TMX SENSIBLES 5% grupo B, A Y B TMX RESISTENTES TMX( trimetroprima sulfametoxazol)1,25 ug.23,7 ug

74 BACITRACINA Y TRIMETOPRIMA SULFAMETOXAZOL ( SXT )  

75 REACTIVOS Agar sangre de carnero Bacitracina Taxo “A” 0.04 U SXT ( 1.25 ug Trimetropima y ug sulfametoxazol PROCEDIMIENTO Sembrar masivamente 3 o 4 colonias Colocar discos a distancias iguales RESULTADOS Sensible: cualquier halo de inhibición Resistente : crecimiento hasta el borde del disco

76 CONTROL DE CALIDAD BACT SXT IDENTIFICACION S R S/R R S Grupo A Grupo BNi A , Ni B ( C,F,G )

77 PRUEBA DE CAMP CHRISTIE AT- KINS Y MUNCH PETERSEN

78 HIPURATO DE SODIO HIDROLIIS DEL HIPURATO A GLICINA Y ACIDO BENZOICOGrupo B hidrolizan el hipurato

79 P. BILIS ESCULINA HIDROLIIS DE BILIS ESCULINAidentificación presuntiva de S. grupo D y Enterococcus.( +)

80

81 TOLERANCIA AL CLORURO DE SODIO 6.5% NaCl

82

83 MICROBIOTA COMENSAL DE LAS VIAS RESPIRATORIAS SUPERIORESAEROBIOS MICROORGANISMO FARINGE BOCA Staphylococcus epidermis ++ +++ Staphylococcus aureus + Micrococcus sp Streptococcus sp Streptococcus pneumoniae Corynebacterium sp Enterobacterias Pseudomonas Neisseria sp Haemophilus Mycoplasma ANAEROBIOS Propionibacterium Lactobacillus Fusobacterium Veionella Bacteroides Peptostreptococcus

84 COCOS GRAM-POSITIVOS CATALASA POSITIVA NEGATIVA Staphylococcus sppStreptococcus spp Enterococcus spp LOS Micrococcus spp SE CONSIDERAN CONTAMINANTES

85 CATALASA: POSTIVA Staphylococcus spp COAGULASA P: S. aureus N: S. epidermidis S. saprophyticus NOVOBIOCINA P: S. epidermidis (>16) N: S. saprophyticus (<16)

86 GRUPO C-F-G: ß-HEMOLITICOS NI GRUPO A - NI GRUPO B TAXO A: R / SXT: SCATALASA: NEGATIVA Streptococcus spp GRUPO A GRUPO B S. pneumoniae GRUPO VIRIDANS GRUPO D HEMOLISIS ß HEMOLISIS ß HEMOLISIS α HEMOLISIS α - γ HEMOLISIS α - γ BACITRACINA TAXO A: S BACITRACINA TAXO A: R OPTOQUINA TAXO P: S No Enterococo OPTOQUINA TAXO P: R S. pyogenes CAMP: POSITIVO S. agalactiae GRUPO C-F-G: ß-HEMOLITICOS NI GRUPO A - NI GRUPO B TAXO A: R / SXT: S

87 CATALASA: NEGATIVA OTROS Streptococcus S. GRUPO D NO Enterococo Enterococos BILIS ESCULINA NEGATIVA POSITIVA Streptococcus GRUPO D NO Enterococo NaCl 6.5% Enterococos NEGATIVA POSITIVA GRUPO D NO Enterococo Enterococos

88 COLONIAS DE Streptococcus spp Streptococcus α - hemolisis

89 Kit de Identificacion rapida para el Genero Streptococcus sppSTREPTO-CARD Kit de Identificacion rapida para el Genero Streptococcus spp

90 Enterococcus spp Los enterococos son cocos gram positivos, que se encuentran aislados, de a pares, o formando cadenas cortas. Ellos pertenecieron, clásicamente, a los Streptococcus grupo D de Lancefield; sin embargo, a mediados de la década de 1980 fueron oficialmente clasificados en su propio género. Son catalasa negativa, anaerobios facultativos, capaces de crecer en condiciones un tanto extremas. Las características bioquímicas sobresalientes incluyen: la habilidad de crecer en presencia de NaCl al 6,5%, a temperaturas entre 10°C y 45°C, y hasta en un pH de 9,6. Tienen la capacidad de hidrolizar la esculina, crecer en presencia de bilis al 40%, sobrevivir 30 min a 60°C e hidrolizar la L-pirrolidonil ß-naftil-amida (PYR). Las principales especies de enterococos son: E faecalis, E faecium, E durans, E avium, E gallinarum entre otras.

91 PRUEBA DE CATALASA POSITIVA NEGATIVA

92 PRUEBA DE HEMOLISIS α-HEMOLISIS ß-HEMOLISIS γ-HEMOLISISDetecta la presencia de hemolisina, enzima que permite la clasificación de los Streptococcus en alfa (hemólisis parcial, incompleta que torna color verdoso), beta (hemólisis total) y gamma hemolíticos (no existe hemólisis) .

93 OTRAS PRUEBAS ANTIBIOGRAMA CON OPTOQUINA PARA STREPTOCOCCUS ALFA-HEMOLÍTICOS Permite diferenciar Streptococcus pneumoniae que es sensible a optoquina (etilhidroxicupreína, Taxo P) de otras especies de Streptococcus alfa-hemolíticos, en especial del grupo viridans que son resistentes. ANTIBIOGRAMA CON BACITRACINA PARA STREPTOCOCCUS BETA-HEMOLÍTICOS Permite diferenciar estreptococos beta-hemolíticos del grupo A (S. pyogenes), que son sensibles a bacitracina, del resto de estreptococos beta-hemolíticos que son resistentes. Solo un porcentaje muy pequeño de Streptococcus de los grupos B, C y G son sensibles a la bacitracina (Taxo A).

94 PRUEBA DE CAMP PARA STREPTOCOCCUS BETA-HEMOLÍTICOSOTRAS PRUEBAS PRUEBA DE BILIS ESCULINA PARA Streptococcus GAMMA-HEMOLÍTICOS Los enterococos crecen en presencia de NaCl 6,5%, toleran las sales biliares y pueden hidrolizar la esculina. Estas propiedades se pueden usar para distinguir los enterococos de otros cocos Gram (+) catalasa-negativos. En la prueba positiva, el tubo torna de color chocolate oscuro, característico al desdoblar la bilis esculina. Enterococcus faecalis es la antigua categoría taxonómica para Streptococcus faecalis. PRUEBA DE CAMP PARA STREPTOCOCCUS BETA-HEMOLÍTICOS Los estreptococos del grupo B (S. agalactiae) producen una proteína difusible y termoestable (factor CAMP) que aumenta la beta-hemólisis de Staphylococcus aureus. S. aureus (sembrado desde la parte superior hasta la parte inferior de la placa) produce esfingomielinasa C que se puede unir a las membranas de los eritrocitos. Cuando son expuestas al factor CAMP del grupo B, las células sufren hemólisis.

95 ESQUEMA DE INOCULACION SOBRE AGAR-SANGREPRUEBA DE CAMP S. aureus Productor B-Lisina Factor CAMP Streptococcus Desconocido CAMP POSITIVO ESQUEMA DE INOCULACION SOBRE AGAR-SANGRE CAMP NEGATIVO