1 FOTOBIOLOGÍA Nadine SchubertInstituto de Ciencias del Mar y Limnología de la UNAM Unidad de Sistemas Arrecifales, Puerto Morelos, México
2 ¿QUÉ SIGNIFICA FOTOBIOLOGÍA ?Photosynthesis Photomorphogenesis Cirvadian Rhythm Ultraviolet Radiation
3 FOTOBIOLOGÍA Parte 1: Fotosíntesis y FluorescenciaParte 2: Fotoaclimatación/-adatación Parte 3: Fotoprotección
4 Parte 1: Fotosíntesis y Fluorescencia
5 FOTOSÍNTESIS
6 ABSORCIÓN DE LUZ
7 EL APARATO FOTOSINTÉTICO
8 EL APARATO FOTOSINTÉTICOATPase LHCII PSII Cyt bf PSI LHCI
9 ABSORCIÓN DE LUZ Fotoquímica Pigmentos antena FS II Photochemistry Antenna pigments PS II La energía absorbida de la luz es dirigida por transferencia de excitación a los centros de reacción donde la conversión de energía por separación de cargas tiene lugar.
10 molécula absorbe fotonABSORCIÓN DE LUZ foton estado excitado molécula absorbe foton Incremento de energía estado basal
11 TRANSFERENCIA DE ENERGÍA DE EXCITACIÓNLuz Centro de reacción Antena Transferencia de excitación Transporte de electrones Donador Acceptor e-
12 TRANSPORTE DE ELECTRONESADP + Pi ATP NADP + H+ NADPH 2H+ Fd PQH2 ATPase LHCII PSII Cyt bf PSI LHCI PQ PC 2H2O O2+ 4H+ H+ 2H+
13 ABSORCIÓN DE LUZ Y TRANSFERENCIA DE ENERGÍA
14 FOTOSÍNTESIS Y FLUORESCENCIA
15 FOTOSÍNTESIS Y FLUORESCENCIAfoton estado excitado estado excitado molécula absorbe foton Fotoquímica Fluorescencia Calor estado basal estado basal
16 FOTOSÍNTESIS Y FLUORESCENCIAFotoquímica Pigmentos antena FS II Calor Fluorescencia
17 FOTOSÍNTESIS Y FLUORESCENCIAPigmentos antena FS II Condiciones de luz no-estresante Calor Fluorescencia Fotoquímica
18 FOTOSÍNTESIS Y FLUORESCENCIAFotoquímica = 1 Fluorescencia = 0 Fotoquímica = 0 Fluorescencia = 1 Whitmarsh & Govindjee (2002)
19 MEDICIONES DE FLUORESCENCIA DE LA CLOROFILAFS = 0 NPQ = 0 FS = 1 Fv/Fm = (Fm-Fo)/Fm Fm = Fluorescencia máxima (CR’s cerrados) Fo = Fluorescencia mímina (CR’s abiertos) (plantas superiores – 0.85, macroalgas usualmente más bajo)
20 Fv/Fm – EFICIENCIA MÁXIMA CUÁNTICACosecha cuántica: Probabilidad que la energía absorbida de un foton sera usada para la fotosíntesis (entre en la cadena de transporte de e-) Indicador de la eficiencia fotosintética Cosecha cuántica máxima: requiere la relajación completa de los mecanismos que compiten con la via fotoquímica
21 Fv/Fm – Variacion diurna y espacialChondrus crispus Depth (m) Macrocystis pyrifera Colombo-Pallotta (2007) Hanelt et al. (1992)
22 Fv/Fm – Comparación de la respuesta a estrés entre especiesLittoral Sublittoral Sublittoral Littoral Sublittoral Sublittoral van de Poll et al. (2001)
23 MEDICIONES DE FLUORESCENCIA DE LA CLOROFILAFv/Fm F/Fm’ FS = 0 1 NPQ 0 1 FS 0 1 NPQ 0
24 F/Fm’ – EFICIENCIA CUÁNTICA EFECTIVAUsed to describe the variation in the photochemical efficiency of PSII under illuminated conditions. Measurement of this parameter at certain irradiance value. Indicator of the ability of an organism to move electrons beyond PSII (ETR) F/Fm’ = (Fm’-F)/Fm’
25 ELECTRON-TRANSPORT RATE (ETR)– CURVESETR = Irradiance F/Fm’ 0,5 Absorptance (Genty et al. 1989) F/Fm’ = effective quantum yield (under light) 0,5 = Assumption that 50% of these quanta are absorbed by PSII Absorptance = fraction of incident light that is absorbed by the photosynthetic tissue. Not the same as absorbance (quantifies how much of the incident light is absorbed by an object).
26 CURVAS DE TASAS DE TRANSPORTES DE ELECTRONES (ETR)ETR = Irradiancia F/Fm’ 0,5 Absorptancia ETR relativo = Irradiancia F/Fm’ 0,5 (Ralph et al. 2002) ETR: cuando las características de absorción cambian entre especies, aclimataciones, estaciones del año… - ETR rel.: uso solo cuando se assume que no hay diferencias en las características de absorción
27 ETR– CURVES AS AN ANALOGUE TO P-E- CURVESMacrocystis pyrifera Colombo-Pallotta et al. (2006)
28 FLUORESCENCIA DE LA CLOROFILAUSO EXTENSO DEBIDO A: NO DESTRUCTIVO NO INVASIVO RAPIDO SENSIBLE EN TIEMPO REAL Desde 1995, el numero de artículos publicados con aplicación del análisis de la fluorescencia de la clorofila en el análisis del rendimiento fotosintético en macroalgas y pasto marino ha aumentado mas que cinco veces.
29 PAM fluorometers: Pulse-Amplitude-Modulated fluorometrosEl fluorometro tiene que ser capaz de medir la cosecha de la fluorescencia de manera no-intrusiva: luz de medición con muy baja intensidad (luz de excitación) para la evaluacion de la cosecha de la fluorescencia de una muestra aclimatada a oscuridad el sistema de detección tiene que ser muy selectivo para distinguir entre la fluorescencia excitada por la luz de medición y las señales mas fuertes de la luz ambiental y actínica (luz solar, pulsos de luz saturante para la evaluación de la fluorescencia máxima) respuesta de corto tiempo para resolver los cambios rápidos en la cosecha de la fluorescencia a transiciones de oscuridad-luz y luz-oscuridad PAM fluorometers: Pulse-Amplitude-Modulated fluorometros
30 Pulse-Amplitude-Modulated FluorometrosDistinguen entre la fluorescencia y la luz ambiental Permite la medición de la fluorescencia en la presencia de luz actínica (luz absorbida por el aparato fotosintético para la fotosíntesis) ¿Cómo? – La luz de medición es modulada y el amplificador de la fluorescencia es altamente selectivo para la señal modulada (cosecha de la fluorescencia de la clorofila) - Luz de medición de pulso modulado puede ser generada por un diodo (LED; mayoría de los PAM fluorometros) o una lámpara de descarga de flash (p.ej. XE-PAM)
31 Pulse-Amplitude-Modulated FluorometrosDUAL-PAM IMAGE-PAM MINI-PAM DIVING-PAM XE-PAM