GÉNERO Clostridium.

1 GÉNERO Clostridium ...
Author: Rufino Mosso
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1 GÉNERO Clostridium

2 INTRODUCCIÓN ORGANISMOS ANAEROBIOS, G + FERMENTADORES, ESPORULADOSMÁS DE 100 ESPECIES, 20 PATÓ-GENAS (ANIMALES Y HOMBRE) CLASIFICACIÓN TRADICIONAL: BIOQUÍMICA, TOXIGENICIDAD, ENFERMEDAD, SEROLOGÍA, etc.

3 INTRODUCCIÓN CLASIFICACIÓN: SECUENCIA ADN, TIPIFICACIÓN ARN RIBOSÓMICO 16 S DIVERSIDAD EN % DE MOLES DE G+C (¿2 GÉNEROS DISTINTOS?) TAMBIÉN IMPORTANCIA A NIVEL INDUSTRIAL

4 INTRODUCCIÓN HÁBITAT: SUELO Y TRACTO G.I. DE ANIMALES Y HOMBREINVASORES Y NO INVASORES DE TEJIDOS ANIMALES TOLERANCIA AL OXÍGENO VARIABLE (DESDE 0,5 AL 8%) TEMPERATURA DE CRECIMIENTO DESDE 4ºC HASTA 69ºC

5 CULTIVO JARRA DE ANAEROBIOSREDUCCIÓN CATALÍTICA DEL O2 POR H2 GENERADO JUNTO CON CO2 MEDIOS COMPLEJOS, pH NEUTRO POSIBLE “SWARMING” MEDIOS REDUCTORES: AGAR TIOGLICOLATO, CALDO TAROZZI

6 CULTIVO

7 PODER PATÓGENO TOXINAS: HISTOLÍTICAS, ENTEROTOXINAS, NEUROTOXINASTOXINAS: ENTRE 22 y 600 KDa DENOMINACIÓN: LETRAS GRIE-GAS (ESPECÍFICAS PARA CADA ESPECIE DE Clostridium)

8 Clostridium NO INVASIVOSCl. tetani, Cl. botulinum

9 Clostridium tetani ESPOROS, UBICUOS PRESENTES EN SUELO, MATERIA FECAL, etc. BACILO DE 0,5-1,7 X 2,1-18 µm ESPORO TERMINAL DEFORMANTE ANAEROBIO ESTRICTO, COLONIAS DE 4-6 mm, ESTRECHA HEMÓLISIS

10 Clostridium tetani

11 PODER PATÓGENO TETANOSPASMINA: RESPONSABLE DE CUADRO DE TÉTANOS (TIPO ANTIGÉNICO ÚNICO) TOXINA TIPO A+B CODIFICADA POR PLÁSMIDO TETANOLISINA: HEMOLISINA

12 TOXINA TETÁNICA PROTOXINA (150 KDa), TOXINA FORMADA POR DOS CADENASCADENA PESADA SE UNE A GT1 DE MEMBRANA NEURONAL LOCALIZACIÓN EN VESÍCULAS DE TERMINALES NERVIOSOS PRESI-NÁPTICOS

13 TOXINA TETÁNICA HIDROLIZA PROTEÍNAS DE ANCLAJE (SINAPTOBREVINAS) DE NEUROTRANSMISORES INHIBI-TORIOS (GLICINA, GABA) FALTA DE RELAJACIÓN MUSCULAR CAUSA ESPASMOS MUSCULARES

14 ENFERMEDAD TÉTANOS EN HOMBRES (PREVALENTE EL NEONATAL) Y ANIMALES (EQUINOS, RUMIANTES, CERDOS) DIAGNÓSTICO POR SIGNOS CLÍNICOS VACUNACIÓN EN BASE A TOXOIDE TETÁNICO

15 Clostridium botulinumCAUSA INTOXICACIÓN ALIMENTA-RIA EN HOMBRE Y ANIMALES ANAEROBIO ESTRICTO, MÓVIL, ESPORAS SUBTERMINALES ESPORAS ALTAMENTE RESISTEN-TES (CALOR HÚMEDO 30´) CLASIFICACIÓN EN BASE A PRODUCCIÓN DE TOXINAS: A, B, C, D, E, F y G

16 Clostridium botulinumTIPO G (Cl. argentinense) BACILOS 0,5 A 2 X 1,6 A 22 µm DIVISIÓN EN GRUPOS POR CA-RACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS TEMPERATURA ÓPTIMA ENTRE 30 A 37ºC (TIPO E 3,3ºC)

17 Clostridium botulinumORGANISMO PRESENTE EN SUELOS INGESTIÓN DE ALIMENTOS CONTAMINADOS CON TOXINA TOXINA PRESENTE EN CADÁVERES EN DESCOMPOSICIÓN (ingestión o contaminación de alimento)

18 TOXINA BOTULÍNICA TIPOS: ACCIÓN SIMILAR, DISTINTA POTENCIA Y PROPIEDADES ANTIGÉNICAS ALGUNOS TIPOS CODIFICADOS POR PLÁSMIDOS O FAGOS PRODUCIDA COMO PROTOXINA SEMEJANTE A TOXINA TETÁNICA (ZINC ENDOPEPTIDASAS)

19 TOXINA BOTULÍNICA ACCIÓN: UNIÓN NEUROMUSCULARSEMEJANTE A TOXINA TETÁNICA (DISTINTOS RECEPTORES) INHIBE LIBERACIÓN DE ACETILCOLINA CAUSA PARÁLISIS FLÁCCIDA

20 ENFERMEDAD Y DIAGNÓSTICOA, B, E, F: EN SERES HUMANOS BOVINOS: TIPO D DEMOSTRACIÓN DE TOXINA EN SUERO, CONTENIDO INTESTINAL Y ALIMENTO SOSPECHOSO INOCULACIÓN DE MACERADOS A RATONES (PRUEBA DE PROTECCIÓN)

21 Clostridium INVASIVOS

22 INVADEN Y MULTIPLICAN EN TEJIDOS, PRODUCEN TOXINAS MENOS POTENTESCONTAMINACIÓN DE HERIDAS, INGESTIÓN DE ESPORAS Clostridium chauvoei, C. septicum, C. perfringens, C. novyi, etc.

23 SITIOS DE INFECCIÓN M.O. MÚSCULO HÍGADO INTESTINO C. chauvoei +C. septicum + C. sordelli C. novyi B C. novyi D C. perfringens B C. perfringens C C. perfringens D

24 Clostridium chauvoei BACILO GRAM +, LEVEMENTE HEMOLÍTICO, MÓVILPRODUCTOS DE FERMENTACIÓN: ác. acético, propiónico y butanol, OLOR CARACTERÍSTICO, ESPORA SUBTERMINAL, MUY RESISTENTE ANAEROBIO ESTRICTO

25 Clostridium Chauvoei REQUIERE CISTEÍNA Y VITAMINAS HIDROSOLUBLESCARBÓN SINTOMÁTICO, MANCHA AGUDA, AFECTA A TERNEROS Y OVINOS DE TODA EDAD DAÑO TISULAR Y MENOR PRODUCCIÓN TOXINA

26 Cl. chauvoei

27 Cl. chauvoei ANTÍGENOS: SOMÁTICOS, FLAGELARES Y ESPORAS (3:f:A)TOXINA : HEMOLÍTICA Y NECROSANTE, DNAsa, FACTOR EDEMATIZANTE, HIALURONIDASA ANTICUERPOS CONTRA TOXINAS Y COMPONENTES CELULARES

28 Cl. chauvoei ORGANISMO EN: CORAZÓN, SANGRE, HÍGADO Y FLUÍDO PERITONEALCULTIVO É INDENTIFICACIÓN, TINCIÓN CON AC FLUORESCENTES, INMUNOHISTOQUÍMICA (IHQ)

29 Clostridium novyi BACILO GRAM +, ESPORAS OVALES SUBTERMINALES, MÓVIL, NO CAPSULADO ANAEROBIO ESTRICTO, LICÚA GELATINA, PRODUCE ÁCIDO Y GAS DE VARIOS CARBOHIDRATOS (da ác. propiónico, acético y butírico)

30 Cl. novyi tipo B

31 Clostridium novyi TIPOS TOXIGÉNICOS: A (, , ); B (, ), C (?), D (ß) TIPOS: DIFERENCIAS BIOQUÍMICAS, PATOGÉNICAS, EPIDEMIOLÓGICAS TOXINA  LETAL Y NECROTIZANTE HEMOLISINAS, LIPASA, MIOSINASA (ROL INCIERTO)

32 Clostridium novyi TIPO A: GANGRENA GASEOSA, “CABEZA HINCHADA” (CARNEROS) TIPO B: HEPATITIS NECRÓTICA EN OVINOS Y BOVINOS (ENF. NEGRA) TIPO D (Cl. haemolyticum): HEMOGLOBINURIA BACILAR

33 Clostridium novyi CULTIVO Y AISLAMIENTO, TINCIÓN FLUORESCENTE, IHQ, HISTOPATOLOGÍA, etc. PRESENTE EN HÍGADO DE ANIMALES SANOS

34 Clostridium perfringensBACILOS GRUESOS, RECTOS, INMÓVILES, ESPORAS OVALES LEVEMENTE DEFORMANTES RELATIVAMENTE AEROTOLERANTE FORMA CÁPSULA EN TEJIDOS Y ALGUNOS MEDIOS, HEMOLÍTICOS, GASÓGENOS, LICÚAN GELATINA

35 Cl. perfringes

36 Cl. perfringes ÁCIDO Y GAS DE CARBOHIDRATOS HEMÓLISIS CALOR-FRÍOFERMENTACIÓN “TORMENTOSA DE LA LECHE” (COAGULACIÓN Y DISRUPCIÓN)

37 Cl. perfringes CUATRO TOXINAS MAYORES: , ,  Y : PROTEÍNAS, TERMOLÁBILES, ACCIÓN ENZIMÁTICA, ANTIGÉNICAS, DAN TOXOIDES HIALURONIDASA, DNAsa, etc.

38 TIPOS TOXIGÉNICOS TIPO ENFERMEDADA ENTEROTOXEMIA (corderos, terneros () B DISENTERÍA (corderos) ENTERITIS HEMORRÁGICA (ovejas y cabras) (, , ) C ENTERITIS NECRÓTICA (corderos, lechones, terneros, pollos) STRUCK (ovejas) (, )

39 TIPOS TOXIGÉNICOS TIPO ENFERMEDADD ENTEROTOXEMIA (ovinos) “riñón pulposo” (, ) E ENTEROTOXEMIA (corderos y terneros) (, )

40 TOXINAS MAYORES α: lecitinasa β: letal, necrotizanteε: aumenta permeabilidad intestinal y capilar, letal : letal Enterotoxina: citotóxica (en tipos A y C)

41 DIAGNÓSTICO CULTIVO É IDENTIFICACIÓN (?), RECUENTO DE M.O. (?)DETECCIÓN DE TOXINAS: (1) PRUEBA BIOLÓGICA (2) INMUNOENSAYO (ELISA) (3) SONDAS MOLECULARES