1 Genética General LaboratorioUniversidad Nacional de San Martín Instituto de Investigaciones Biotecnológicas Genética General Laboratorio

2 Régimen de aprobación Asistencia obligatorio Informe finalExamen práctico

3 Objetivo Aplicar los conceptos teóricos de Genética clásica adquiridos en la materia usando un modelo de experimentación sencillo Drosophila melanogaster

4 Trabajos prácticos TP1: Biología y Genética de DrosophilaIdentificación de machos y hembras; marcadores fenotípicos TP2: Mapeo cromosómico Mapeo genético Cruzamientos genéticos controlados TP3: Bioinformática – Búsqueda en la base de datos Flybase TP4: Conteo proporción de genotipos de la progenie Análisis de datos Discusión de resultados

5 TP 1 Introducción a la biología y genética de DrosophilaMantenimiento: Ciclo de vida

6 Manipulación de las moscas adultasAnestesia: CO2, hielo, trietilamina Observación bajo lupa Uso de pincel, tratar con cuidado

7 morfológicas sexualesCaracterísticas morfológicas sexuales Hembra Macho Hembra Macho

8 Mutaciones morfológicasEn el estadio adulto: Color del cuerpo Color del ojo Forma del ojo Forma de las quetas dorsales Forma de las alas white Wild type En el estadio pupa: -Forma de la pupa Mutaciones termosensibles En el adulto: -proteína de vesícula de sinapsis

9 ? ? Genotipo Fenotipo -Nomenclatura-Cómo comprobar si es dominante o recesivo?

10 Alelo black es dominante o recesivo?Cruzar las moscas con fenotipo black con moscas wild type Caso 1: Progenie: 100% fenotipo wild type Caso 2: Progenie: 100% fenotipo black Caso 3: Progenie: 50% fenotipo black 50% fenotipo wild type En cada caso determine el genotipo de las moscas black

11 Mutaciones ligadas al cromosoma sexualHembras : XX white (w): - recesivo - localizado en el cromosoma X Machos: XY Fenotipo de la progenie: Hembras: 100% wild type Machos: 50% wild type 50% white Caso 1 Hembras: 100% wild type Machos: 100% white Caso 2 Hembras : 100% wild type Machos: 100% wild type Caso 3 En cada caso determine el genotipo y fenotipo de los parentales

12 Cromosomas de Drosophila

13 Vírgenes Controlar el cruzamiento: garantizar el genotipo de los progenitores Predecir el genotipo de la progenie Colectar hembras vírgenes Jóvenes Características morfológicas: -pigmentación mas clara -mancha en el abdomen (meconio) -alas plegadas -abdomen hinchado Cuidado: no juntar machos vírgenes

14 Sistema P {hs-hid} Y : para obtener hembras vírgenesAdultos en viales Puesta de huevos durante 2-3 días Sacar los adultos Desarrollo al estadio larval Se activa la expresión de hid con el golpe de calor (heat shock –hs) Letalidad diferencial para los machos 2h a 37ºC Desarrollo al estadio adulto Solo eclosionan las hembras

15 - Heat shock - Ciclo de vida - Machos/hembras - Mutantes morfológicos (adulto y pupa), termosensibles - Teórica- elemento P