1 Ht. Patricia A. Aragón Departamento de Patología Hospital de Clínicas XXII CONGRESO 18 y 19 de Septiembre 2015

2 E ORDEN E s esencial mantener un ORDEN en todas las etapas por las que atraviesa el material desde su ingreso al laboratorio, hasta concluidos los procedimientos L L a calidad de los cortes de tejido depende de cada paso del procesamiento, y la calidad de cada paso depende del paso anterior

3  F  F ijación  D  D eshidratación  A  A claramiento  I  I nfiltración  A  A rmado del taco PROCESAMIENTO Consiste en:

4 FIJACIÓN FORMOL ALCOHOL ACETONA BOUIN La proporción del líquido fijador con respecto al material debe ser 3 veces o mas su volumen

5 PROCESAMIENTO N N o hay posibilidad de éxito en el procesamiento de los tejidos si no se han fijado correctamente L L a deshidratación consiste en la sustitución paulatina del agua por alcohol L L os baños múltiples de graduación ascendente disminuyen el riesgo de endurecimiento del tejido L L a deshidratación consiste en la sustitución paulatina del agua por alcohol L L os baños múltiples de graduación ascendente disminuyen el riesgo de endurecimiento del tejido

6 PROCESAMIENTO

7 PROCESAMIENTO MANUAL

8 PROCESADORESPROCESADORESPROCESADORESPROCESADORES AUTOMATICOSAUTOMATICOSAUTOMATICOSAUTOMATICOS

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10 DESHIDRATACIÓNACLARADO

11 INFILTRACIÓN O IMPREGNACIÓN La parafina de uso habitual es una mezcla con polímeros plásticos y otros aditivos que mejoran sus características como agente de inclusión, con una temperatura de fusión entre 56º-58ºC Cortes más uniformes Aumento de la dureza y homogeneidad del bloque Tiras de cortes continuas, con mayor facilidad Menor fragilidad de los bloques

12 MANUAL Tiempo de procesado: 7 hs 2 lt. Alcohol 96ª 1 lt. Alcohol 100ª 1 lt. Isopropílico 1 lt. Xileno 2 kg. Parafina Duración aprox. de líquidos: 5 a 15 días dependiendo de la cantidad y tipo de material Inversión: BAJA Manualidad: ALTA Atención: MODERADA / BAJA PROCESADOR Tiempo de procesado: 14 hs 3 lt. Alcohol 96ª 3 lt. Alcohol 100ª 3 lt. Isopropílico 1 lt. Xileno 4 kg. Parafina Duración aprox. de líquidos: 5 a 15 días dependiendo de la cantidad y tipo de material Inversión: ALTA Manualidad: NULA Atención NULA MICROONDAS Tiempo de procesado: 2hs ½ lt. Alcohol 96ª ½ lt. Alcohol 100ª ½ lt. Isopropílico ½ kg. Parafina Duración aprox. de líquidos: 5 a 15 días dependiendo de la cantidad y tipo de material Inversión: BAJA Manualidad: ALTA Atención: MODERADA / ALTA COMPARACIÓN DE PROCESAMIENTOS

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14 H Hasta con adecuada fijación, procesamiento perfecto y un técnico experto, un corte de tejido puede ser destruido por falta de control en el embebido en parafina

15 ELEMENTOS DE ORIENTACIÓN B Barras de Leuckhart Moldes tipo “Raviolera ” C C ajas de papel M M oldes para tarteletas C C ubeteras M echero, T rípode, B isturí E spátula, P inzas, J arro C C ajas de papel M M oldes para tarteletas C C ubeteras M echero, T rípode, B isturí E spátula, P inzas, J arro

16 Dispensador de parafina Parafina en estufa Centros de inclusión

17 Para confeccionar tacos individuales se utilizan moldes de base metálica o plástica, con fondo de tamaño variable, que se encastran perfectamente al cassette PARA ORIENTAR

18 CONSIDERACIONES GENERALES P Pueden marcarse con tinta china las caras o márgenes de un fragmento de tejido o realizar una incisión que indique la orientación apropiada C Cuando un tejido requiera ser orientado de una manera especial, deberemos utilizar un sistema de “marcado” para facilitar su identificación

19 IDENTIFICACIÓN DE MUESTRAS D pieles de dermatología E biopsias de estómago T biopsias de traumatología MO para médula ósea H muestras de hígado O biopsias de oftalmología AU para las autopsias M biopsias de músculo R para muestras renales I tejidos de investigación N muestras de nervio

20 ESTRUCTURAS TUBULARES Las estructuras tubulares (venas, apéndice, trompas) pueden orientarse de modo tal que la navaja corte a través de la luz y/o perpendicular al eje largo del tubo

21 SUPERFICIES EPITELIALES Tejidos de piel, intestino, vejiga, etc. deben posicionarse de modo que el corte se realice a través de todas las capas del tejido Si tenemos 2 fragmentos, debemos orientarlos con la cara epitelial en la misma dirección

22 MUESTRAS GRANDES Y COMPACTAS L os tacos de útero, próstata, tiroides, hueso, etc. serán orientados con un leve ángulo y en forma perpendicular a la navaja, para evitar el desgarramiento del tejido al ser seccionado del taco

23 MUESTRAS GRANDES Y COMPACTAS

24 MUESTRAS PEQUEÑAS Para una mejor visualización de muestras endoscópicas y biopsias pequeñas, es conveniente teñirlas con 1 ó 2 gotas de eosina acuosa al 1%, antes de procesarlas para hacerlas visibles durante la orientación

25 MUESTRAS MULTIPLES Deben ser orientadas una al lado de la otra con espacio entre ellas Las obtenidas por punción biopsia pueden orientarse con su eje largo paralelo o perpendicular al filo de la navaja, pero todas en el mismo sentido

26 ESTRUCTURAS QUÍSTICAS Los quistes hemiseccionados tienen aspecto de cúpula y deben ser orientados con la cara de corte hacia abajo para obtener una sección de todas las capas de la pared

27 SUPERFICIES Y MÁRGENES TEÑIDOS

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31 Todo crecimiento tecnológico implica, también, la evolución del técnico … Evolución que no depende únicamente de la decisión personal Es muy importante el intercambio con sus pares, la asistencia a eventos y el soporte de un equipo de trabajo [email protected]

32 MUCHAS GRACIAS!!!