1 INMUNOHISTOQUIMICA DE TUMORES GINECOLOGICOSDRA. ALEJANDRA ZARATE OSORNO DEPARTAMENTO DE PATOLOGIA HOSPITAL ESPAÑOL DE MEXICO

2 INMUNOHISTOQUIMICA PERFILESDIAGNOSTICOS PRONOSTICOS PREDICTIVOS

3 INMUNOHISTOQUIMICA EN GINECOLOGIAInsustituibles: Muestreo amplio del tumor Examen morfologico Diagnóstico definitivo: controvertido Inmunohistoquímica Fuentes potenciales de error Anticuerpo específico o panel de anticuerpos

4 INMUNOHISTOQUIMICA EN GINECOLOGIALa mayoría no requiere No hay anticuerpos específico para una neoplasia en particular Interpretación de la IHQ en el contexto de la morfología Expresión aberrante de Ag Utilizar siempre paneles y no un solo Ab McCluggage WG. Adv Anat Pathol 11: , 2004 Mittal K. Arch Pathol Lab Med 2008;132:

5

6 GINECOLOGIA ANTICUERPOSPancitoqueratinas (AE1/AE3) Antígeno Carcinoembrionario (CEA) Citoqueratina 20 Citoqueratina 7 h-caldesmon Desmina Actina de músculo liso CD10 CD117 CA 125

7 GINECOLOGIA ANTICUERPOSReceptores de estrógenos Receptores de progesterona WT-1 Ki-67 Proteína p53 PLAP CD30 Gonadotropina coriónica, fracción beta Alfa-fetoproteína

8 GINECOLOGIA ANTICUERPOSSinaptofisina Cromogranina Vimentina Calretinina MELAN-A Alfa-1-inhibina CD56 CD45 CD99

9 INMUNOHISTOQUIMICA NEOPLASIA MALIGNA INDIFERENCIADACarcinoma indiferenciado Linfoma de alto grado (anaplásico o de células grandes) Melanoma maligno Sarcomas de celulas redondas Disgerminoma

10 INMUNOHISTOQUIMICA VULVA, VAGINA Y CERVIXMarcadores epiteliales: CK (AE1/AE3, 7 y 20) Marcadores de proliferacion (Ki-67) Marcadores mesenquimatosos: vimentina, desmina y actina, proteina s-100, miogenina, CD34, CD10 Marcadores neuroendocrinos (cromogranina, sinaptofisina) Enfermedad de Paget (GCDFP-15) Marcadores de VPH: proteína p16 Marcadores de melanoma: proteína S-100, MELAN-A, HMB-45, tirosinasa

11 IHQ CERVIX UTERINO Metaplasia escamosa vs. LEIBG: Ki-67Atrofia escamosa vs. LEIAG: ki-67 Lesiones glandulares benignas vs. Lesiones preneoplásicas: p53, Ki-67, CEA Adenocarcinoma de endocérvix vs. endometrial: vimentina, CEA, Proteína p16, receptores hormonales Ca. neuroendocrino, vs. carcinoma escamoso poco diferenciado vs. linfoma: CK, marcadores neuroendocrinos, CD45

12 INMUNOHISTOQUIMICA LESIONES CERVICALES INTRAEPITELIALESPAPILOMA ESCAMOSO POLIPO FIBROEPITELIAL METAPLASIA ESCAMOSA INMADURA CAMBIOS ATROFICOS LESIONES GLANDULARES BENIGNAS CONDILOMA ACUMINADO LESION INTRAEPITELIAL DE ALTO GRADO ADENOCARCINOMA ENDOCERVICAL

13 INMUNOHISTOQUIMICA LESIONES CERVICALES INTRAEPITELIALESMarcadores de proliferación (Ki-67) Proteína p16

14 Ki-67 Ki-67

15 PROTEINA p16 Fuertemente expresada en los carcinomas cervicalesQuinasa inhibidora dependiente de la ciclina Fuertemente expresada en los carcinomas cervicales Areas de metaplasia escamosa Tinción uniforme y difusa (núcleo y citoplasma) Otros marcadores VPH genérico Marcadores de proliferación: Ki-67 (MIB-1) Proteína p53 Adv Anat Pathol 8:83-92, 2001

16

17 p16

18 VPH Ki-67

19 EXPRESION DE PROTEINA p16 TEJIDO NORMALNiños: Timo Adultos: Endometrio proliferativo Ductos mamarios Células gástricas Esófago Glándulas salivales Células neuroendócrinas

20 EXPRESION DE PROTEINA p16 NEOPLASIASDermatofibrosarcoma protuberans Adenocarcinoma gástrico Linfomas (Hodgkin y no Hodgkin) Tumores neuroendócrinos (carcinoide-células pequeñas) Adenocarcinoma pulmonar Carcinoma escamoso pulmonar

21 EXPRESION DE PROTEINA p16 NEOPLASIAS TRACTO GENITAL FEMENINOCérvix: marcador de presencia de VPH de alto riesgo Carcinomas cérvix escamoso, glandular y de células pequeñas Leiomiosarcomas uterinos Carcinomas serosos ováricos Adv Anat Pathol 13:8-15, 2006

22 EXPRESION DE PROTEINA p16 LESIONES ESCAMOSAS CERVICALESEpitelio normal: ausente o focalmente positiva Lesión de bajo grado: tercio inferior del epitelio Lesión de alto grado: dos tercios superiores del epitelio Diagnóstico diferencial: Atrofia Metaplasia escamosa inmadura Metaplasia transicional Adv Anat Pathol 13:8-15, 2006

23 EXPRESION DE PROTEINA p16 LESIONES GLANDULARES CERVICALESAdenocarcinoma endocervical (excepto adenoma maligno) Adenocarcinoma in situ, diagnóstico diferencial: Hiperplasia microglandular Metaplasia tuboendometrial Endometriosis Diagnóstico diferencial con adenocarcinoma endometrial Adv Anat Pathol 13:8-15, 2006

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25 p16 Ki-67

26 CONDILOMA ACUMINADO

27 EXPRESION DE PROTEINA p16 ALTERACIONES DISPLASICAS Y NEOPLASICAS DEL CERVIXSobre-expresión es típica en displasia y neoplasia Expresión heterogénea Algunas lesiones son negativas Una prueba negativa no descarta la presencia de VPH de alto riesgo Inmunohistoquímica para proteína p16 y Ki-67 como prueba complementaria IHQ negativa: hacer pruebas moleculares BMC Cancer 4:58-68, 2004

28 PAS GCDFP-15 CK-7

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30 CD34 CD10 R.E.

31 CK 8/18 CK7

32 CD56 CD56 CD117 TTF-1

33

34 CK-7 CK-5/6

35 ADENOCARCINOMA ENDOMETRIAL TIPOS 1 Y 2ADENOCARCINOMA ENDOMETRIOIDE BAJO GRADO (I Y II) DEPENDIENTE DE ESTROGENOS TIPO 2 CARCINOMA SEROSO PAPILAR ALTO GRADO NO DEPENDIENTE DE ESTROGENOS PRONOSTICO Y TRATAMIENTO DIFERENTES

36 ADENOCARCINOMA ENDOMETRIAL TIPOS 1 Y 2RECEPTORES ESTROGENOS POSITIVOS Ki-67 (BAJO INDICE) PROTEINA p53 NEGATIVO TIPO 2 RECEPTORES ESTROGENOS NEGATIVOS Ki-67 (ALTO INDICE) PROTEINA p53 POSITIVO

37

38 p53 R.E. Ki-67

39

40 R.E. p53 Ki-67

41 INMUNOHISTOQUIMICA ENDOMETRIAL VS. ENDOCERVICALBiopsias pequeñas Invasión de endocérvix y endometrio Establecer el sitio de origen Tratamiento quirúrgico inicial diferente Pistas morfológicas

42 INMUNOHISTOQUIMICA CARCINOMA ENDOMETRIALInmunofenotipo característico Citoqueratina 7 Coexpresion de vimentina Focos de diferenciacion escamosa (CK 5/6) Expresión focal de CEA Expresión focal de proteína p16 Receptores hormonales (E y P)

43 INMUNOHISTOQUIMICA ENDOMETRIAL VS. ENDOCERVICALVIMENTINA: + RECEPTORES E Y P: +/- QUERATINA 7: + CEA: -/+ Proteína p16: - ENDOCERVICAL VIMENTINA: - RECEPTORES E Y P: -/+ QUERATINA 7: + CEA: + Proteína p16:+

44 INMUNOHISTOQUIMICA ENDOMETRIAL VS. ENDOCERVICALAnticuerpo Endometrial Endocervical Vimentina +/- -/+ RE y RP CEA Proteina p16 +

45

46 R.E. VIMENTINA

47

48 vimentina CEA

49

50 CEA p16 Vimentina R.E.

51 INMUNOHISTOQUIMICA CARCINOMA ENDOMETRIAL MARCADORES PRONOSTICOSReceptores hormonales (E y P) Indice de proliferación (ki-67) Sobreamplificación del c-erbB-2

52 H-caldesmon Actina ML

53 H-caldesmon

54 INMUNOHISTOQUIMICA TUMOR MIXTO MULLERIANO MALIGNOMarcadores epiteliales Marcadores mesenquimatosos (componentes heterólogos)

55

56 CK Desmina

57 INMUNOHISTOQUIMICA ESTROMA ENDOMETRIAL VS. MUSCULO LISONódulo del estroma endometrial Sarcoma del estroma endometrial Leiomioma celular CD10 (sarcoma del estroma endometrial, leiomiosarcoma, leiomioma celular) h-caldesmon (leiomioma y leiomiosarcomas) Desmina Actina especifica de músculo liso Oliva E y cols. Am J Surg Pathol 26: , 2002

58 CD10 DESMINA

59 INMUNOHISTOQUIMICA CD10 EN NEOPLASIAS ENDOMETRIALESNeoplasias del estroma endometrial Adenocarcinoma mesonéfrico Adenocarcinoma endometrial (la mayoría) Adenocarcinoma endocervical (30%) Angiofibromas de la vulva Am J Surg Pathol 27: , 2003

60 INMUNOHISTOQUIMICA TUMORES DEL ESTROMA ENDOMETRIALReceptores hormonales (E y P) CD10 (CALLA) h-caldesmon (musculo liso) Actina específica de músculo liso CK (focal) Otros marcadores (cromogranina, sinaptofisina, WT-1)

61

62 CD10 WT-1

63

64 CD10 R.E.

65

66 CK 8/18 CD10

67 INMUNOHISTOQUIMICA DIAGNOSTICO DIFERENCIAL EN TUMORES OVARICOSEpiteliales (epitelio de superficie) Estroma y cordones sexuales Células germinales

68 INMUNOHISTOQUIMICA OVARIO TUMORES EPITELIO DE SUPERFICIECK 7, 8, 18, 19 y 20 WT-1 Receptores de estrógenos y progesterona Serosos: WT-1, CK7, RE y RP, CA 125 Mucinosos: CA-125, e-caderina, CK7+/CK20+, CEA, CDX-2 Endometrioides: similares al endometrial Células claras: CK 7, p53, WT-1 -

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70 CK 7 CA 125 WT-1

71

72 WT-1 CA 125 CK 7

73

74 p53 CK7

75

76 CK 7 CK 20 CA 125 CDX-2

77 INMUNOHISTOQUIMICA SEROSO OVARICO Vs. MESOTELIOMAWT-1 + CK 7 + VIMENTINA + CALRETININA + CD15- CK 5 Y 6 + RECEPTORES - CEA - BerEP4 - SEROSO OVARICO WT-1 + CK 7 + VIMENTINA + CALRETININA- CD15 + CK 5/6 -/+ RECEPTORES + CEA - BerEP4 +

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79 WT-1 CK Calretinina

80 DIAGNOSTICO DIFERENCIAL EN TUMORES OVARICOS EPITELIALESCK 7 WT-1 CK 20 Receptores hormonales c-erbB-2 (HER-2/neu) Proteína p53

81 DIAGNOSTICO DIFERENCIAL EN TUMORES DEL ESTROMA OVARICOAlfa-1-inhibina MELAN-A (MART-1) Calretinina CD56 Actina específica de musculo liso CK

82 INMUNOHISTOQUIMICA TUMOR UTERINO QUE SEMEJA TUMOR OVARICO DE LOS CORDONES SEXUALESTipos 1 y 2 Tipo 1: sarcoma endometrial Tipo 2: semejan al de la granulosa o celulas de Sertoli Localización: miometrio Evolución favorable, potencial maligno incierto IHQ: CK 7 y marcadores de músculo liso, inhibina, calretinina, MELAN-A, CD99, receptores hormonales

83 TUMOR UTERINO SIMILAR AL TUMOR OVARICO DE LOS CORDONES SEXUALES DIAGNOSTICO DIFERENCIALCarcinoma indiferenciado Carcinoma neuroendocrino Adenocarcinoma endometrioide Neoplasia del estroma endometrial Neoplasia epitelioide de musculo liso Tumor trofoblastico del sitio placentario

84 INMUNOHISTOQUIMICA OVARICOS PRIMARIOS vs. METASTASISSitio frecuente de metástasis Mama: GCDFP-15, Mamoglobina Colorecto: CK-7-, CK-20+, CDX-2 Endometrio: WT-1 -, Vimentina+ Estómago (tubo digestivo): CK-20+ CK7- CDX-2, CA 19.9 Pulmón: TTF-1

85

86 GCDFP-15 Mamoglobina

87

88 CK 20 CDX-2

89

90 CK 7 GCDFP-15

91

92 CK 20 CK 7 CA 19.9

93 CA CELULAS EN ANILLO DE SELLO OVARIOANTICUERPO OVARIO ESTOMAGO Citoqueratina 7 + +/- Citoqueratina 20 -/+ Receptores estrogenos - Receptores progesterona

94 OVARIO vs METASTASIS CK 7 + -/+ CK 20 - +/- WT-1 CA 125 CA 19.9 RE RPAb Endometrio Ovario Seroso Ovario Mucinoso Cel Claras Mama GI PB Urotelial CK 7 + -/+ CK 20 - +/- WT-1 CA 125 CA 19.9 RE RP CDX-2 CD10 GCDFP Mamoglob

95 INMUNOHISTOQUIMICA TUMORES DE CELULAS GERMINALESDisgerminoma: PLAP, CD117 Tumor de senos endodérmicos: A-FP, CK, alfa-1-antitripsina Carcinoma embrionario: CK, A-FP, CD30 Coriocarcinoma: GCH, CK

96 PLAP CD117

97 AFP CK

98 CD30

99 TUMORES OVARICOS DE CELULAS PEQUENAS Y AZULESAB GRANULOSA CEL PEQ DISGERMINOMA PNET LINFOMA CK 8/18 -/+ + - WT-1 PLAP TTF-1 CD99 Calretinina +/- Inhibina CD56 CD45 Cromogranina Sinaptofisina

100 INMUNOHISTOQUIMICA ESTROMA OVARICO-CORDONES SEXUALESAfa-inhibina Calretinina MELAN A (MART-1) Actina CD56 McCluggage G y cols. Int J Ginecol Pathol 2007;

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104 Calretinina Inhibina Actina ML CD56

105 Calretinina Inhibina

106

107 Calretinina CK WT-1

108 INMUNOHISTOQUIMICA PECOMAS UTERINOSCélulas epitelioides con abundante citoplasma claro o eosinofílico Células perivasculares epitelioides Marcadores melanociticos (HMB-45) Marcadores de músculo (desmina)

109 CK7 WT-1 R.E.

110

111 Cromogranina Sinaptofisina

112 CK VIMENTINA CD10

113 MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCION