1 Instrumentación para cromatografía líquida de alta performance (HPLC)Dr. Miguel Gilabert

2 Instrumentación para cromatografía líquida de alta performance (HPLC)Dr. Miguel Gilabert

3 Reservorios (HPLC) Dr. Miguel Gilabert

4 Filtro de entrada (HPLC)Dr. Miguel Gilabert

5 Filtrado de la fase móvilDr. Miguel Gilabert

6 Desgasado de la fase móvilDr. Miguel Gilabert

7 Caños y acoples Zonas de baja presión Zonas de alta presiónCaños de PTFE (Politetrafluoretileno) Caños de acero inoxidable al cromo-molibdeno Caños de peek (polietiletilcetona) Dr. Miguel Gilabert

8 Caños y acoples Dr. Miguel Gilabert

9 Bombas Dr. Miguel Gilabert

10 Bombas Dr. Miguel Gilabert

11 Sistemas formadores de gradientesMezclado en alta presión Mezclado en baja presión Solvente A Solvente B Solvente A Solvente B Bomba A Bomba B Válvula porcentual Válvula porcentual Camara de mezcla a alta presión Bomba Columna Columna Dr. Miguel Gilabert

12 Filtro de linea Dr. Miguel Gilabert

13 Inyector Dr. Miguel Gilabert

14 Inyector - Solventes de inyección (tratamiento de la muestra)Dr. Miguel Gilabert

15 Guarda columnas o pre-columnasDr. Miguel Gilabert

16 Columnas Preparativas: di = 21 mm; L = 5, 10, 15 y 25 cmPartículas de 5 y 10 um Semi preparativas: di = 10 mm; L = 5, 10, 15 y 25 cm Partículas de 5 y 10 um Analíticas: di = 5, 3, 1 mm; L = 5, 10, 15 y 25 cm Partículas de 2.6, 5 y 10 um Dr. Miguel Gilabert

17 Columnas - Hornos para columnas - Partículas de núcleo solido (video)Dr. Miguel Gilabert

18 UPLC Y UHPLC Rs: Resolución N: Eficiencia Dp: tamaño de partículaDr. Miguel Gilabert

19 UPLC Y UHPLC Curvas de Van deemter – velocidad de flujoDr. Miguel Gilabert

20 UPLC Y UHPLC 528 bar 24 bar Dr. Miguel Gilabert

21 UPLC Y UHPLC L / dp = constante Dr. Miguel Gilabert

22 UPLC Y UHPLC Dr. Miguel Gilabert

23 UPLC Y UHPLC HPLC - Diametro interno 3 a 10 um- Presión inferior a 400 bar - Alta capacidad de carga - Detectores para grandes volúmenes - Largos tiempos de análisis UPLC - Diametro interno de 0,75 a 1,8 um - Presión hasta 1000 bar - Baja capacidad de carga - Ideal para detectores de masas - Cortos tiempos de análisis (similares a los de cromatografía gaseosa) Dr. Miguel Gilabert

24 Detectores - Aquellos que comparan una propiedad de la fase móvil con la misma propiedad del soluto (refractómetro diferencial, detector de conductividad, etc.) - Aquellos que miden una propiedad del soluto (Absorción en UV o Visible, detector polarográfico, etc.) En todos los casos los volumen de celda deben ser pequeños para evitar la difusión Dr. Miguel Gilabert

25 Detector de índice de refracción (RI)i = c/vi i = Índice de refracción para la frecuencia c = velocidad del haz en el vacío vi = velocidad de la radiación en el medio Ley de Snel 1(sen 1) =  2(sen 2) Densidad:  = (-1)d/d n = ir; d = densidad Temperatura:  = (-1)c(t) t = temperatura Compresibilidad:  = k(-1)P k = cte; P = presion Dr. Miguel Gilabert

26 Detector de índice de refracción (RI)Dr. Miguel Gilabert

27 Detector de índice de refracción (RI)Dr. Miguel Gilabert

28 Detector de índice de refracción (RI)- Responde a casi cualquier soluto (universal). Proporciona sensibilidad, estabilidad y reproducibilidad para el análisis de componentes con poca o ninguna absorción de UV. - Muy sensible a la temperatura. - No es posible trabajar con gradientes. - Entre 100 y 1000 veces menos sensible que un detector UV. Dr. Miguel Gilabert

29 A = e.b.c Detector UV-vis - Elevada sensibilidad.- Amplio rango lineal. - Estable frente a cambios de Temperatura, cambios de caudal y cambios en la composición de la fase movil. - Solo es capaz de detectar sustancias que absorben en UV y visible. A = e.b.c A: Absorbancia e: Absortividad molar b: Camino óptico c: concentración Dr. Miguel Gilabert

30 Detector UV-Visible Dr. Miguel Gilabert

31 Detector de arreglo de diodos (DAD, PDA)Dr. Miguel Gilabert

32 ¡Gracias por su atención!Dr. Miguel Gilabert