1 INTRODUCCIÓN A LAS TÉCNICAS SEPARATIVASLicda. Carol Villatoro de Santisteban Análisis Instrumental II Departamento de Fisicoquímica Escuela de Química USAC

2 EL MÉTODO CIENTÍFICO

3 EXPERIMENTACIÓN “Una condición esencial para cualquier investigación fructífera es la posesión de métodos adecuados. Cualquier progreso científico es un progreso en el método.” M.S. Tswett V. G. Berezkin (Compiler), M. S. Tswett, Chromatographic Adsorption Analysis, selected works, Transl. Ed. Mary R. Masson, Ellis Horwood, New York, 1990.

4 QUÍMICA ANALÍTICA Química analítica: determinación de la composición química Palabras clave: Muestra Analito Matriz Análisis cualitativo ¿Qué? Análisis cuantitativo ¿Cuánto? Mezclas

5 SEPARACION ANALITICA MEZCLAS HETEROGENEAS SEPARACIONES MECANICASMEZCLAS HOMOGENEAS SEPARACIONES FISICAS SEPARACIONES QUIMICAS

6 SEPARACIÓN DE ANALITOSAlternativas: Métodos específicos Aplicabilidad limitada (selectividad, límites de detección, no simultaneidad) Métodos “tradicionales” o clásicos de separación Destilación Extracción Precipitación Técnicas instrumentales

7 TÉCNICAS INSTRUMENTALESCromatografía Electroforesis Otras

8 CROMATOGRAFÍA Invención de principios del siglo XXHerramienta poderosa por su versatilidad Ventajas Mezclas complejas Variedad de matrices y analitos Alto porcentaje de recuperación Fácil cuantificación Acoplamiento de la separación con la caracterización

9 DEFINICIÓN DE LA CROMATOGRAFÍA

10 Definiciones Ciencia de las interacciones intermoleculares y el transporte de moléculas o partículas en un sistema de fases mutuamente inmiscibles que se mueven una respecto a otra. Proceso de distribuciones repetidas múltiples diferenciadas de compuestos químicos (o partículas) como resultado de interacciones moleculares entre fases mutuamente inmiscibles que se mueven una respecto a la otra, conduciendo a la formación de zonas de concentración de componentes individuales de la mezcla original de dichas sustancias o partículas. Método de separación de mezclas de sustancias o partículas basado en las diferencias de velocidad de su movimiento en un sistema de fases mutuamente inmiscibles que se mueven una respecto a otra. V. A. Davankov (Chair), Chromatography—Basic Terms—Terminology, Commission of the Scientific Council on Chromatography, Russian Academy of Sciences National Commission, Issue 14, Moscow, 1997

11 DEFINICIÓN IUPAC Método físico de separación en el cual los componentes a separar se distribuyen entre dos fases, una de la cual es estacionaria (fase estacionaria) mientras que la otra (fase móvil) se mueve en una dirección definida. International Union of Pure and Applied Chemistry (IUPAC), Nomenclature for chromatography (recommendation), Pure Appl. Chem. 65(4), 819 (1993).

12 Conceptos clave Dos fases (estacionaria y móvil) FlujoInteracciones moleculares Transporte (Transferencia de masa) Velocidad de movimiento (migración) Zonas de concentración

13 Palabras Clave Fase estacionaria Fase móvil Muestra Analitos EluyenteElución Eluato Bandas

14 COMPONENTES DE UN SISTEMA CROMATOGRÁFICO

15 Sistema cromatográficoComponentes Cromatografía Sistema cromatográfico Fase estacionaria Fase móvil Muestra Analitos separados Datos Soporte para FS Almacenamiento FM Impulso para FM Recepción de muestra Descarga de analitos Detección Procesamiento Presentación

16 COMPONENTES

17 COMPONENTES

18 Componentes

19 FUNDAMENTOS DE LA SEPARACIÓN CROMATOGRÁFICA

20 MECANISMO DE SEPARACIÓN

21 PROCESO DE SEPARACIÓN

22 GRACIAS POR SU ATENCIÓN