1 Introducción: origen histórico de la investigación en giberelinasGibberella fujikuroi “bakanae” o “foolish seedling” GA1 abordaje “grind –and-find”

2 Giberelinas y desarrolloinducción floración expansión foliar crecimiento de raíz e hipocotilo desetiolación desarrollo floral y de fruto dominancia apical elongación de internodos germinación

3 Abordaje de “spray-and-pray”GA3 WT ga1 Abordaje genético

4 Metabolismo de giberelinas: visión generalGGPP kaureno terpeno sintasas PLASTOS SISTEMA ENDOMEMBRANA kaureno GA12/GA53 citocromo P450 GA12/GA53 GA1/GA4 CITOPLASMA dioxigenasas OD

5 Metabolismo de giberelinas: biosíntesis IHedden and Phillips (2000) TIPS

6 Metabolismo de giberelinas: biosíntesis IIGA 20-oxidasa GA 3-oxidasa Hedden and Phillips (2000) TIPS

7 Metabolismo de giberelinas: desactivación IHedden and Phillips (2000) TIPS

8 Metabolismo de giberelinas: desactivación IIYamaguchi (2008) Annu Rev Plant Biol

9 Metabolismo de giberelinas: genesYamaguchi (2008) Annu Rev Plant Biol

10 Metabolismo de giberelinas: genesYamaguchi (2008) Annu Rev Plant Biol

11 Metabolismo de giberelinas: homeostasisGA12/53 ent-kaureno CPP GGPP CPS/GA1 GA 20ox vía de señalización GA9/20 GA34/8 GA4/1 GA 3ox GA 2ox

12 darkness light 1 0.5 0.75 0.25 2 3 4 Relative expression level2 3 4 Relative expression level Time in light (h) 3ox1 20ox1 20ox2 2ox1 2ox2 2ox7 20ox3 light 12

13 Metabolismo de giberelinas: regulación por luzGGPP CPS/GA1 CPP ent-kaureno GA 20ox GA 3ox vía de señalización GA12/53 GA9/20 GA4/1 GA 2ox GA34/8

14 Metabolismo de giberelinas: regulación por temperatura1 2 3 4 20ox1 3ox1 2ox1 cotyledons hypocotyl Relative expression (29 / 20) Time after temperature rise (h) Temperature GA3ox1 20ºC 29ºC

15 Metabolismo de giberelinas: regulación por temperaturaGGPP CPS/GA1 CPP ent-kaureno GA 20ox GA 3ox vía de señalización GA12/53 GA9/20 GA4/1 GA 2ox GA34/8

16 Metabolismo de giberelinas: regulación durante el desarrollopGA1:GUS GGPP CPS/GA1 CPP SEÑALES DEL DESARROLLO ent-kaureno GA 20ox GA 3ox vía de señalización GA12/53 GA9/20 GA4/1 GA 2ox GA34/8

17 Vía de señalización por GAlas GA desestabilizan las proteínas DELLA DELLA respuestas

18 Vía de señalización por GA: proteínas DELLASH2-like LHR1 LHR2 NLS dominio GRAS dominio DELLA DELLA VHYNP poli S/T GFP-RGA es nuclear GFP-RGA se desestabiliza por GA

19 Vía de señalización por GA: la mutación DdellaSH2-like LHR1 LHR2 NLS dominio GRAS dominio DELLA DELLA VHYNP poli S/T gai-1 es resistente a GA la mutación Ddella estabiliza la proteína

20 Las mutaciones gai y rga suprimen fenotipos de elongación de ga1

21 1. las proteínas DELLA son reguladores negativos de la vía deseñalización por GA (mutantes nulos y dominantes) 2. las GA promueven respuestas fisiológicas induciendo la desestabilización de las DELLA (región della) RESUMEN 1. ¿cómo se desestabilizan las DELLA? 2. ¿cómo se perciben las GA y qué relación tiene con la desestabilización? CUESTIONES

22 Vía de señalización por GA: SLY1/GID2los mutantes sly1 y gid2 son enanos SLY1 y GID2 codifican proteínas F-box que forman parte de las ubiquitina ligasas del tipo SCF las proteínas DELLA se acumulan en mutantes sly1/gid2 wt gid2 gid2 slr slr las mutaciones nulas della son epistáticas respecto sly1/gid2

23 Vía de señalización por GA: GID1los mutantes gid1 son enanos GID1 codifica una lipasa sensible a hormonas inactiva, que une GA activas con las características de un receptor las mutaciones nulas della son epistáticas respecto gid1 GID1 es una proteína soluble

24 Vía de señalización por GA: modeloHirano et al (2008) TIPS

25 Vía de señalización por GA: regulación de la transcripciónlas DELLA son reguladores transcripcionales: ¿cómo regulan la transcripción? Abordajes: 1) Encontrar proteínas con las que interaccionan 2) Identificar genes diana y estudiar sus promotores