1 Jorge Enrique Bazán Mayra BIOLOGO - MICROBIOLOGODIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD CAJAMARCA DIRECCIÓN DE LABORATORIOS DE SALUD PUBLICA Bio-seguridad para los Laboratorios Jorge Enrique Bazán Mayra BIOLOGO - MICROBIOLOGO

2 Contenido Los Laboratorios como fuente potencial de contagio.Agentes Infecciosos. Riesgos Ocupacionales. Causa de Infección. Evaluación de los Riesgos Responsabilidad de la Bioseguridad en el Laboratorio. Seguridad en el Laboratorio. Niveles de Contención. Envío y manejo de sustancias infecciosas. Desinfección y esterilización. Manejo y eliminación de Desechos de Laboratorio.

3 Los Laboratorios como fuente potencial de contagioLos laboratorios clínico constituyen un medio ambiente de trabajo especial que pueden presentar riesgos de enfermedades infecciosas para las personas que trabajan en el laboratorio o cerca de él.

4 Personal de laboratorio Personal colindante con el laboratorioComunidad

5 Los Agentes InfecciososVIRUS HONGOS BACTERIAS PARASITOS Virus del Sida Gusano Helminto Moho Penicillium notatum Bacteria del cólera PRIONES

6 Accidentes laborales en LaboratorioPike y Sulkin (1951) E.U.:Brucelosis, tuberculosis, tularemia, tifoidea, Estreptococosis (72%), Tasa de fatalidad 3%. Hanson (1967) E.U.: 7,428 infecciones con Arbovirus. Como infección accidental del personal del laboratorio. Wedum(1975) E.U: Casos Tifoidea, cólera, brucelosis y tétanos.

7 Riesgos OcupacionalesEn Dinamarca (1974) se determinó que el personal de laboratorio tiene 7 veces mayor incidencia de infección con Hepatitis B que la población en general. En Inglaterra (1979) se determinó que el personal de laboratorio tiene 5 veces mayor incidencia de infección con TBC que la población en general.

8 Riesgos OcupacionalesHepatitis B y la Shigelosis siguen imponiendo riesgos ocupacionales. Dos brotes de viruela, asociados al laboratorio en Inglaterra en 1973 y 1978. Fiebre Q Virus B de Macacos

9 Riesgo de infección después de la exposición

10 Riesgos OcupacionalesEl Perú no cuenta con antecedentes en este campo, por lo que sería importante notificar los accidentes de laboratorio para tomar medidas de prevención.

11 Causas de infecciones Accidentes de trabajo,Negligencia e inobservancia de reglamentos al manipular agentes infecciosos, No disponer de los medios adecuados de protección Personal inadecuadamente entrenado.

12 FACTORES QUE INFLUYEN EN LA VIOLACION DE LA BIOSEGURIDADFISICOS QUIMICOS BIOLOGICOS HUMANOS Mecánicos Térmicos Radiaciones Almacenamiento y manipulación de sustancias químicas Presencia de organismos vivos y/o sus productos y su manipulación Estructuras Humedad Temperatura Iluminación Ventilación Cognoscitivas Actitudes Psicológica Ergonómicos AMBIENTALES

13 Agentes Biológicos I Leve II Moderado III Elevado IV AltoNiveles de Riesgo I Leve II Moderado III Elevado IV Alto Alto riesgo para el individuo y para la comunidad Escaso riesgo para el individuo y para la comunidad Riesgo individual moderado, pero limitado para la comunidad Riesgo individual elevado, pero limitado para la comunidad

14 I Leve II Moderado Bacillus subtilis. Plasmodium. Naegleria gruberiEscherichia coli (no enteropatogénica) Protozoarios y helmintos intestinales y otros II Moderado Escherichia coli (enteropatógenas). Pseudomonas aeruginosa. Listeria monocytogenes. Vibrio cholerae. Neisseria gonorroheae. Haemophylus influenzae. Virus de la Hepatitis B.

15 III Elevado IV Alto Mycobacterium tuberculosis. Trypanosoma cruzi.Dengue. VIH. Otros microorganismos que provocan enfermedades graves en el hombre, pero que de ordinario no se propagan de una persona a otra. IV Alto Virus de las fiebres hemorrágicas de Marburg. Ebola SRAS (Sindrome respiratorio agudo severo), otros.

16 Evaluación de los Riesgos:“Riesgo” : la probabilidad de que ocurra un daño, lesión o enfermedad. Evaluación del riesgo se concentra principalmente en la prevención de infecciones de laboratorio.

17 Identificación de Riesgos de Accidentes1° Identificar riesgos potenciales 2° Buscar información específica 5° Capacitar en prevención 6° Medidas de 3° Elaborar Programa preventivo 4° Señalizar las áreas de riesgo

18 Riesgos no Biológicos Heridas punzantes, cortantes y abrasivasIngestión accidental Inhalación Envenenamientos (Se debe llamar al Centro de Información, Control Toxicológico y Apoyo a la Gestión Ambiental - CICOTOX de la UNMSM (Teléfono: ) Accidentes físicos

19 Riesgos no Biológicos Lesiones ergonómicas y por movimientos repetitivos (malas posturas) Estrés Psicosocial (Los síntomas asociados al estrés psicosocial son depresión, ansiedad, insatisfacción laboral, así como manifestaciones somáticas tales como acidez de estómago, presión arterial alta, dolor de cabeza, etc). (*) Se debe llenar la ficha única de accidentes de trabajo

20 Riesgos Biológicos Derrames en la recepción de muestrasRuptura en la centrífuga de tubos con material infeccioso Ingesta accidental. Producción de aerosoles

21 Riesgo Biológico Principio base: “Todos los pacientes y sus fluidos corporales, independientemente del diagnóstico, deben ser considerados  como infectados e infectantes y tomarse las precauciones  necesarias para prevenir  la transmisión”

22 Prevención o limitación de los riesgosGarantizar la seguridad del personal de los laboratorios de microbiología y de los que le rodean. Evaluar todos los tipos de riesgos para Tomar medidas de seguridad. (CONTINGENCIAS)

23 Responsabilidad de la BioseguridadBIOSEGURIDAD es sinónimo de PREVENCIÓN y es responsabilidad de TODOS. Todos El personal La administración Los directivos

24 Niveles de Contención La Seguridad Biológica se fundamenta en cuatro componentes: Las Técnicas de Laboratorio. (Prácticas Estándar, Prácticas Especiales) El Equipo de Seguridad. (Contención Primaria) El Diseño de las Instalaciones Internas. (Contención Secundaria) El Diseño Estructural del Edificio Especializado. (Contención Terciaria)

25 De las técnicas de laboratorioTécnicas estándares Normas de higiene personal Manual de Bioseguridad

26 Lavado de Manos: MétodoModulo 7: Principios de Control de Infeccion y Equipos de Proteccion Personal Lavado de Manos: Método Mojarse las manos con agua limpia (no caliente). Aplicar el jabón. Frotarse las manos al menos por 20 segundos. Enjuagarse con agua limpia. Secarse con toallas desechables o con secador de aire. Usar toalla para cerrar el grifo. Aunque no es formalmente un tipo de EPP, primero discutiremos la higiene de las manos, ¡porque es la piedra angular del control de infección! Siempre recuerde lavarse las manos antes del contacto con cada nuevo paciente. Esta diapositiva describe técnicas efectivas de la higiene de manos: Cuando se lave las manos con jabón y agua, primero mójese las manos con agua, luego aplique la cantidad de jabón recomendada por el fabricante. Frótese las manos al menos por 20 segundos, cubriendo todas las superficies de las manos y dedos. Enjuague las manos con agua, séquelas bien con una toalla desechable y use la toalla para cerrar el grifo. Por supuesto, esto asume que hay agua limpia disponible. Si hay duda sobre esto, debe usarse agua hervida o embotellada o agua tratada con tabletas de cloro. *Fuente: Guideline for Hand Hygiene in Health-care Settings. MMWR 2002; vol. 51, no. RR-16. 26 26

27 Lavado de manos

28 Lavado de manos

29 De Los Equipos de Seguridad (Contención Primaria)CSB EPP Inmunizaciones Esterilización y desinfección de instrumentos y superficies

30 Cabinas de Seguridad Biológica:Cuando no es posible el aislamiento del foco de contaminación, la actuación va encaminada a la protección del trabajador mediante el empleo de prendas de protección personal.

31 Equipos de Protección Personal (EPP)

32 EPP: Mascarillas y Respiradores

33 Guantes: Protección para las manos

34 EL VESTUARIO COMO EQUIPO DE PROTECCIÓN

35 EPP Actualmente existen EPP que ofrecen un altísimo grado de protección, pero eso no significa que el EPP sea un substituto de una buena práctica de trabajo. La utilización de un equipo equivocado creará un riesgo adicional al operario al inspirar en éste un falso sentido de seguridad. El EPP se seleccionará en función del máximo nivel de riesgo que se espera encontrar al desarrollar la actividad.

36 Secuencia para Colocarse el EPPModulo 7: Principios de Control de Infeccion y Equipos de Proteccion Personal Secuencia para Colocarse el EPP Lavarse las manos Bata Respirador para partículas N95 Realizar el chequeo del sello Cobertor para el cabello Gafas protectoras o protector facial Guantes El siguiente segmento abordará la secuencia para colocar y quitarse el EPP específicamente cuando se cuida a pacientes con sospecha o confirmación de influenza aviar. Antes de colocarse el EPP, siempre realice las prácticas de higiene. Primero debe colocarse la bata. Luego debe colocarse el respirador ajustándolo apropiadamente; recuerde chequear el ajuste del respirador. Si usted va a estar involucrado en un procedimiento generador de aerosol, puede elegir usar cobertor para el cabello. Las gafas protectoras o protector facial debe colocarse después, y los guantes de último.

37 Respirador para Partículas N95Modulo 7: Principios de Control de Infeccion y Equipos de Proteccion Personal Respirador para Partículas N95 Ponga atención a la talla (S, M, L) Coloque sobre la nariz, boca y barbilla Ajuste pieza flexible de la nariz sobre el puente de la nariz Asegure en la cabeza con elástico Ajuste para que se adapte y verifique: Inhale – el respirador debe plegarse Exhale – chequear salida alrededor de la cara La técnica para colocarse un respirador para partículas, como un N95, N99 ó N100 es similar a colocarse una mascarilla pre-formada con bandas elásticas para la cabeza. Primero, observe qué talla es la suya. Luego coloque el respirador sobre la nariz, boca y barbilla. Ajuste la pieza flexible de la nariz sobre el puente de su nariz, asegure la mascarilla en su cabeza con elástico, y ajuste el elástico para que se adapte. Con N95 y otros respiradores de partículas sin embargo, usted debe seleccionar un respirador para el que ha probado el tamaño y debe chequear el ajuste del aparato antes de entrar un área en donde pueda haber enfermedad infecciosa por aire. Para chequear el ajuste de un respirador, inhale y el respirador debe plegarse. Cuando usted exhala, verifique si sale aire alrededor de la mascarilla en su cara. Asegúrese de seguir las instrucciones del fabricante para colocar el aparato. En algunos casos, las instrucciones del fabricante pueden diferir ligeramente de esta presentación.

38 Secuencia para Remover EPPModulo 7: Principios de Control de Infeccion y Equipos de Proteccion Personal Secuencia para Remover EPP Desatar la bata y remover cobertores de zapatos Guantes Lavarse las manos Bata Gafas protectoras Mascarilla Gorra (si se usa) Botas La secuencia para remover EPP se intenta que limite oportunidades de auto-contaminación; el orden exacto no es tan importante como limitar la contaminación, así que usted puede cambiarlo si es necesario. Lo ideal es remover el EPP en la antesala. Si no hay antesala, asegúrese que el ambiente (y la gente) fuera de la habitación de aislamiento no están en riesgo de contaminación. Si usted está usando una bata que se marra al frente, desamarre la bata (pero no la remueva) y remueva los cobertores de los zapatos. Luego, remueva los guantes, descártelos y luego lávese sus manos. Luego remueva la bata y delantal, si está usando uno. Luego remueva las gafas protectoras y la gorra (si se usa) y coloque esos artículos en contenedores apropiados. Siempre utilice el protocolo de su institución del cuidado de la salud para cualquier artículo que necesita descartar. El último artículo a remover serán las botas que está usando. Colóquelas en un contenedor apropiado. Entonces deberá lavarse las manos por segunda vez, esta vez hasta la muñeca, con jabón y agua, y secarlas. El paso final es descontaminar sus manos usando una loción para manos con base del 70% de alcohol antes de salir de la institución.

39 Removiendo los Guantes

40 Removiendo una Bata o Mandil

41 Removiendo una MascarillaModulo 7: Principios de Control de Infeccion y Equipos de Proteccion Personal Removiendo una Mascarilla Levante el elástico inferior sobre su cabeza primero. Luego levante el elástico superior. Descartar. No toque el frente de la mascarilla. El proceso de remover un respirador de partículas es similar al de la mascarilla. Levante el elástico inferior sobre la cabeza primero. Luego remueva el elástico superior. Esto debe hacerse despacio para evitar que el respirador se “suelte” en la cara. Cuando descarte la mascarilla, evite tocar el frente de la misma.

42 Removiendo Gafas Protectoras o Protector FacialModulo 7: Principios de Control de Infeccion y Equipos de Proteccion Personal Removiendo Gafas Protectoras o Protector Facial Tome las piezas de los oídos o la cabeza con las manos sin guantes Levántelos de la cara Colóquelos en receptáculo designado para desinfectar o eliminación Después de remover su bata, puede remover la protección de los ojos. Usando las manos sin guantes, tome la pieza “limpia” de los oídos o la cabeza y levante el equipo de protección de los ojos de la cara. Si las gafas profectoras o el protector facial son resusables, colóquelos en un receptáculo para limpiar y desinfectar. Si no, disponga de ellos en el receptáculo apropiado para basura.

43 Diseño y construcción del Laboratorio (Contención Secundaria)Contribuye a la protección del personal dentro y fuera de laboratorio. Consta de las siguientes consideraciones: Localización Acceso al personal Lavatorios y lavaojos Superficies interiores y trabajo Señalización Filtros Hepa

44 a) Localización. Es aconsejable se localice fuera del tráfico del Hospital y que no sea un lugar de paso para otras dependencias en las que no exista restricción para su acceso (cafeterías, almacenes, bibliotecas, aparcamientos). b) Acceso de personal. En general, debe ser restringido a las personas formadas para el manejo de agentes infecciosos.

45 Debe existir uno en el mismo laboratorio:c) Lavamano. Estará dotado de grifos que puedan accionarse sin utilizar las manos y situado preferiblemente cerca de la puerta de salida. d) Lavaojos. e) Duchas de emergencia.

46 f) Superficies interioresf) Superficies interiores. Los suelos, paredes y techos deben ser impermeables al agua y resistentes a diferentes productos químicos, de forma que permitan una limpieza a fondo y una posterior descontaminación.

47 f) Superficies de trabajof) Superficies de trabajo. Las mesas y bancos de trabajo deben ser resistentes al calor moderado, a disolventes orgánicos, ácidos y álcalis.

48 g) Señalización. Siempre que el trabajo esté en marcha, debe colocarse en la puerta del laboratorio la señal reglamentaria de peligro biológico.

49 h) Presión negativa Se recomienda que el laboratorio se mantenga a una presión negativa con respecto al exterior del mismo. i) Filtros HEPA. La frecuencia para su comprobación parece aconsejable hacerla cada 6 meses o, al menos, no dejar pasar más de 14 meses.

50 Laboratorio típico del nivel de bioseguridad 1Laboratorio típico del nivel de bioseguridad 1. (Manual de Bioseguridad en el Laboratorio, OMS. 2005)

51 Laboratorio típico del nivel de bioseguridad 2Laboratorio típico del nivel de bioseguridad 2. (Manual de Bioseguridad en el Laboratorio, OMS. 2005)

52 Laboratorio típico del nivel de bioseguridad 3Laboratorio típico del nivel de bioseguridad 3. (Manual de Bioseguridad en el Laboratorio, OMS. 2005)

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54 Espacios de trabajo por trabajadorLas dimensiones mínimas que deben reunir tales espacios son las siguientes: Altura desde el suelo hasta el techo 3 m. Superficie libre por trabajador 2 m2 Volumen (cubicaje) no ocupado por el trabajador 10 m3

55 Límites de temperatura, humedad y ventilaciónCONCEPTO ACTIVIDADES DESARROLLADAS LÍMITES Temperatura ºC ( ºC) Humedad relativa % Velocidad del aire Todos los trabajos llevados a cabo en los Laboratorios de Microbiología y de Biomedicina. 0,25 - 0,50 m/s Sistemas de aire acondicionado 0,25 m/s Renovación del aire 30 m3 por hora y trabajador

56 Condiciones mínimas de iluminaciónACTIVIDAD DESARROLLADA NIVEL MÍNIMO EN LUX Todos los trabajos llevados a cabo en los Laboratorios de Microbiología y de Biomedicina. 500 Vías de circulación y lugares de paso 50

57 Descontaminación de espacios y superficiesHipoclorito sódico (NaOCl). 1 g/l de cloro libre: para la limpieza general. 5 g/l de cloro libre: cuando se trate de situaciones de alto riesgo. Alcohol etílico al 70%. Peróxido de hidrógeno (H2O2) 3%

58 Resumen de Buenas Prácticas a observar en los laboratorios clínicosColocar la señal de riesgo biológico en todos los laboratorios en los que se manipulen agentes de los grupos 1, 2 ó 3. Evitar que trabaje una sola persona en el laboratorio, especialmente cuando se realicen operaciones de riesgo, y utilizar cabina, siempre que sea posible.

59 Resumen de Buenas PrácticasRevisar periódicamente la ventilación general, la instalación eléctrica y la de gas del laboratorio y mantenerlas siempre en perfectas condiciones. Realizar periódicamente un inventario de los reactivos para controlar sus existencias y caducidad y mantener las cantidades mínimas imprescindibles.

60 Resumen de Buenas PrácticasCuando sea preciso manipular productos que puedan originar emanaciones de sustancias peligrosas u olores desagradables, hacerlo bajo campana extractora, provista de filtros adecuados y someterla a un programa de mantenimiento preventivo acorde a sus características.

61 Resumen de Buenas PrácticasNo utilizar frigoríficos domésticos en el laboratorio. No comer, beber, fumar, usar cosméticos o guardar alimentos o bebidas en el laboratorio. No pipetear con la boca. Utilizar los EPP recomendados para cada tipo de trabajo. Etiquetar adecuadamente los productos preparados en el laboratorio y no reutilizar los envases para otros productos.

62 Normas de Seguridad en la Utilización de Equipos

63 Normas Generales Los equipos y aparatos nunca deben colocarse en zonas de paso. Todos los aparatos con toma eléctrica deberán cumplir las normativas de seguridad correspondientes. Las fuentes de calor, sobre todo si se alcanzan temperaturas elevadas, deberán estar debidamente señalizadas para evitar quemaduras accidentales. Todos los equipos deben contar obligatoriamente con procedimientos relativos a su utilización segura.

64 2. Refrigeradoras Un adecuado mantenimiento, limpieza y desinfección sistemáticos. No deben almacenarse cultivos de microorganismos patógenos por inhalación en recipientes que no estén convenientemente cerrados, especialmente si la cámara tiene un sistema de circulación de aire. No deben almacenarse reactivos que contengan compuestos volátiles inflamables (éter etílico, por ejemplo) en neveras que no posean un sistema de protección antideflagración.

65 3. Congeladoras Tratar de identificar en ficheros, listas, etc. el contenido de lo almacenado y sus riesgos potenciales. El material potencialmente infeccioso debe colocarse en tubos, recipientes, etc. bien cerrados. No se llenarán completamente, para evitar que rebosen por efecto del aumento de volumen tras la congelación. Descongelar periódicamente, limpiar y desinfectar si fuese procedente. Utilizar guantes para manipular el contenido.

66 4. Incubadoras La limpieza y la desinfección, periódicas y sistemáticas, son el método recomendable para reducir los riesgos derivados de la contaminación accidental del personal del laboratorio.

67 5. Microondas Los frascos o matraces deben tener el tapón aflojado, ya que si está cerrado estallan fácilmente. Estar siempre presente, con la ropa y pantalla facial adecuadas, y controlar la intensidad del aparato, que sólo puede ser la máxima con agua y la mínima si se usa con agar. Los microondas interfieren con los marcapasos. No deben ser colocados a una distancia inferior a 2 m de las personas que sean portadoras de uno de estos dispositivos.

68 6. Autoclaves Los autoclaves deben poseer manómetro y termostato, así como válvula de seguridad, sistema de desconexión rápido y la purga del vapor ha de realizarse a un recipiente estanco y con agua, jamás directamente al exterior. No deben usarse si no se conocen perfectamente todos los mandos y su fundamento. Usar guantes especiales para protegerse del calor. No abrir jamás si el manómetro no está a “0” y la purga no ha sido abierta. Controlar una vez al mes su capacidad de desinfección. El uso de registros de presión y temperatura de cada proceso y la instauración de un programa de mantenimiento.

69 7. Centrífugas Los mayores riesgos derivan, sobre todo, de la contaminación por los aerosoles generados durante la centrifugación de materiales biológicos y, en menor medida, de los traumatismos accidentales. Se recomienda: Deben utilizarse tubos cerrados. La rotura accidental de un tubo y su vertido en la cubeta representa una incidencia importante que debe ser comunicada inmediatamente, de forma que se proceda a la desinfección segura del aparato. No se deben utilizar centrífugas antiguas que no posean sistema de cierre de seguridad, del que disponen todos los aparatos actuales.

70 Almacenamiento, Transporte y Envío de Material Biológico

71 1. Almacenamiento Almacenar en zonas de acceso restringidoUsar crioviales de buena calidad Siempre se deberán utilizar gafas o mascarillas de protección, mandil y guantes.

72 2. Transporte y envío Si ampliamos la definición de estos organismos y los consideramos como “mercancías peligrosas” o “sustancias infecciosas”, hay varios documentos internacionales relacionados con el tema: Unión Postal Universal (UPU). Organización Internacional de Aviación (OIAC). Asociación Internacional de Transporte Aéreo (IATA).

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77 Manejo y Eliminación de los Desechos de LaboratorioUna solución es la gestión de desechos cuyos pilares básicos son la minimización, segregación y eliminación de residuos.

78 Tipos de desechos: Desechos Comunes Desechos BiocontaminadosDesechos Especiales o Químicos Desechos Líquidos Desechos Sólidos

79 a) Desechos líquidos La sangre, líquidos orgánicos, secreciones, etc. pueden eliminarse directamente por el desagüe con agua abundante. Por lo que se refiere a los líquidos infecciosos que genera el propio laboratorio, como los sobrenadantes de los cultivos, etc., es aconsejable recogerlos en un recipiente que contenga una solución de hipoclorito sódico recién preparada. Debe calcularse el volumen máximo aceptable para asegurar la eficacia del desinfectante. Luego podrían ser eliminados por los desagües.

80 b) Desechos sólidos Las formas más frecuentes de tratamiento de los residuos sólidos son: La incineración y La esterilización por autoclave.

81 CRITERIOS TÉCNICOS DE DESECHOS SÓLIDOSResiduos Bolsas Biocontaminados Químicos Comunes Rojo Amarillo Negro Las bolsas de polietileno (250 a 350 micras de espesor) con capacidad del 20% superior al volumen del recipiente

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83 Bibliografía SEIMC (Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica) Seguridad en el Laboratorio de Microbiología Clínica. Procedimientos en Microbiología Clínica. 2000 OMS.. Manual de Bioseguridad en el Laboratorio. Tercera Edición. 2005 INS (Instituto Nacional de Salud). NT 18. Manual de Bioseguridad en Laboratorios de Ensayos, Biomédicos y Clínicos. Edición N° CDC (Centro de Control y Prevención de Enfermedades).. Bioseguridad en Laboratorios de Microbiología y Biomedicina. Quinta Edición URL disponible en:

84 Bibliografía Comisión de Reglamentos Técnicos y comerciales, INDECOPI. Norma Técnica Peruana ISO 15189: Laboratorios médicos. Requisitos particulares para la calidad y la competencia. Lima; 2004 Guía para el uso de mascarillas y respiradores en el manejo de pacientes sospechosos o probables de SRAS. Ministerio de Salud Pública. Cuba [fecha de acceso 01 de diciembre de 2004]. URL disponible en:

85 Mas vale prevenir que lamentar

86 Gracias Jorge Enrique Bazán Mayra BIÓLOGO – MICROBIÓLOGO Pág. web: jorgebazan.es.tl (076) DIRECCION DE LABORATORIOS DE SALUD PUBLICA DIRECCION REGIONAL DE SALUD – CAJAMARCA Cajamarca, 04 de Mayo de 2009