1 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalRICARDO MOLINA GASSET, HOSPITAL VIRGEN DE LOS LIRIOS MAYO 2014

2 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalBases de cáncer Cancer is una compleja familia de enfermedades En el desarrollo de la mayoria de cánceres humanos estan implicados multiples alteraciones geneticas. En la transformación de una célula normal en una célula tumoral se existen diferentes mecanismos como son:encuentran una serie de alteraciones oncogenes Genes supresores de tumores Alteraciones en genes reparadores del daño del ADN Alteraciones en genes reparadores de excisiones Cancer is a disease of abnormal gene expression. This occurs through a number of mechanisms Oncogene – a gene that can cause cancer. It is a sequence of DNA that has been altered or mutated from its original form, the proto-oncogene. Proto-oncogenes promote the specialization and division of normal cells. A change in their genetic sequence can result in uncontrolled cell growth, ultimately causing the formation of a cancerous tumor. In humans, proto-oncogenes can be transformed into oncogenes in three ways: point mutation (alteration of a single nucleotide base pair), translocation (in which a segment of the chromosome breaks off and attaches to another chromosome), or amplification (increase in the number of copies of the proto-oncogene). Oncogenes were first discovered in certain retroviruses and were later identified as cancer-causing agents in many animals. Tumor Suppressor Gene – A gene whose inactivation contributes to the development of cancer. Example: p53, encoding transcription factor p53, functioning in the checkpoint control that arrests cells with damaged DNA in G1. G1 – Phase in the Cell Cycle One of the best characterized tumor-related genes is K-RAS, which somatically mutates in several types of sporadic human cancers. Since mutations of this gene occur exclusively in three hot spots (codons 12, 13 and 61), and are frequently detected and well characterized in colorectal, pancreas and lung cancers, molecular diagnosis and susceptibility (risk) assessment targeting K-RAS mutations are being developed The reported incidence of K-RAS mutations detected in these samples ranges from 7% to 80% for colorectal cancers, 25% to 87% for pancreatic cancers, and 25% to 48% for lung cancers

3 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalCancer Colorectal El cáncer colorectal (CRC) tiene lugar cuando las células del colon o recto crecen fuera de control y pierden su funcionamiento normal CRC en comun en paises desarrollados y menos frecuente en paises en vias de desarrollo. El 70% of CRC no son hederitarios y prevenibles, sobre el 20% tienen un componente hederitario o familiar. Factores de riesgo: historia familiar, edad, enfermedad inflamatoria intestinal, dietas de alto contenido en grasa o carnes rojas y sedentarismo. Cancers of the large bowel and rectum are referred to collectively as colorectal cancer. These cancers are common in developed countries, but occur much less frequently in the developing world. In 2008, 1.2 million new cases of colorectal cancer were diagnosed worldwide and there were over 60,000 deaths related to this disease.1 Most cases of colorectal cancer (approximately 70%) are non-hereditary and preventable.2 About 20% of cases have a hereditary or familial component.2 Besides family history, other risk factors for colorectal cancer include older age, inflammatory bowel disease, diets high in fat and/or red meat, and a sedentary lifestyle.3 Approximately 80% of colorectal cancers originate from mushroom-shaped growths in the gut called polyps.4 Although most polyps are benign, others can become cancerous and spread beyond the gut wall. Screening helps to identify polyps and localized tumors and prevent the development of advanced disease. References: 1. Ferlay J, Shin HR, Bray F, et al. GLOBOCAN 2008, Cancer Incidence and Mortality Worldwide: IARC CancerBase No. 10 [Internet]. Lyon, France: International Agency for Research on Cancer; Available from: 2. Benson AB 3rd. Epidemiology, disease progression, and economic burden of colorectal cancer. J Manag Care Pharm 2007;13(6 Suppl C):S5-18 3. Fearon ER, Bommer GT. Molecular Biology of Colorectal Cancer, In: DeVita VT, Lawrence TS, Rosenberg SA (Eds) Cancer: principles and practice of oncology, 8th edition 4. Cunningham D, Atkin W, Lenz HJ, et al. Colorectal cancer. Lancet 2010;375:

4 Incidencia y mortalidad de todo tipo cánceresKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal Incidencia y mortalidad de todo tipo cánceres Ambos sexos y todas las edades Worldwide incidence and mortality for cancers. Both sexes, all ages. Globocan, 2008 (IARC)( ) ASR(W): Age Standardized Incidence Rate (World)

5 Incidencia de cáncer colorectal por 100.000 habitantesKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal Incidencia de cáncer colorectal por habitantes USA: 4th most commonly diagnosed cancer Incidence (Colon + rectal): 149,000 cases (2008) Europe: Colon Cancer is the second most common cancer 5-year relative survival rate increased from 51% - 64% over past 30 years

6 KRAS-NRAS-BRAF Significado ClínicoCáncer Colorectal Síntomas del CCR pueden no ser específicos o no evidenciarse durantes las fase tempranas de la enfermedad. Sangrado, cambios en el apetito o en hábitos intestinales, dolor abdominal, pérdida de peso, debilidad. El diagnóstico esta basado en la colonoscopia y la biopsia. El tratamiento esta guiado por el estadio de la enfermedad: Estadio I-III: resección quirúrgica Estadio III: puede ser beneficioso la quimioterapia adjuvante o radioterapia (solamente en cáncer rectal) Estadio IV (Metástasis): Tratamientos sistémicos con agentes citotóxicos o agentes diana en forma combinada. The symptoms of colorectal cancer can be non-specific and may not be evident during early stages of the disease. They include bleeding, changes in appetite and bowel habits, abdominal pain, weight loss and weakness. Colorectal cancer is typically diagnosed on the basis of colonoscopy and biopsy. The treatment of colorectal cancer is guided by disease stage. The primary treatment for early-stage disease (stages I to III) is surgical resection. This is frequently curative when the disease is localized. Adjuvant chemotherapy or radiation therapy (rectal cancer only) may be beneficial in Stage III disease. For metastatic disease (stage IV), systemic treatment is required. Systemic treatment for metastatic colorectal cancer involves cytotoxic and targeted agents, given either in combination or as single agents. Fluoropyrimidines have been the core of chemotherapy for metastatic colorectal cancer for several decades. Both intravenous (5-fluorouracil) and oral (capecitabine) fluoropyrimidines are effective treatment options. Over the last decade, new cytotoxic (irinotecan, oxaliplatin) and targeted therapies (bevacizumab, cetuximab, panitumumab) have become available and have significantly changed the treatment of metastatic disease. As a result of these new therapies, the average overall survival time for patients with metastatic colorectal cancer has increased from 12 months with single-agent fluoropyrimidine therapy to around 2 years with contemporary multi-agent regimens.

7 Cancer Colorectal Representacion de la progression del cáncer de colonKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico Cancer Colorectal Representacion de la progression del cáncer de colon Stage I, II, and III cancers are considered potentially curable. In most cases, stage IV cancer is not curable. Stage 0 Very early cancer cells found on the innermost layer of the intestine Stage I Tumor cells found in the inner layers of the colon Stage II Tumor cells have spread through the muscle wall of the colon Stage III Tumor cells have spread to lymph nodes Stage IV Tumor cells have spread to other organs (metastasis)

8 Colorectal Cáncer: pronósticoKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal Colorectal Cáncer: pronóstico El cáncer de colon es en la mayoría de los casos una enfermedad tratable si se diagnostica de forma temprana. El pronóstico depende de muchos factores, incluyendo el estadio del cáncer. En general, cuando es tratado en fases tempranas, la mayoría de los pacientes sobrevive al menos 5 años despues de su diagnóstico. La tasa de supervivencia baja considerablemente una vez han aparecido las metástasis. El lugar mas comun de aparición de metástasis es el hígado. Si despues de 5 años no hay recaida del tumor, se considera curado. Estadios I, II, and III son considerados potencialmente curables . En la mayoría de los casos, el estadio IV no es curable..

9 Colorectal Cancer: pronósticoKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal Colorectal Cancer: pronóstico Mejora de la supervivencia con la inclusión de los tratamientos BSC: Best Supportive Care. No treatment against the cancer/tumor. Palliative.

10 EGFR (receptor factor de crecimiento epidérmico)KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal EGFR (receptor factor de crecimiento epidérmico) El EGFR tambien denominado ErbB1 o HER-1 es un miembro de la familia de receptores de superficie de las células ErbB (receptores tirosina kinasa). En células normales los factores de crecimiento se unen al EGFR y activan una ruta de transducción de señales en la célula. Las rutas incluidas son: La ruta de activación proteine Kinasa RAS/MAPK y la ruta del fosfatidil inositol 3-cinasa (PI3K)–AKT. Ambas rutas regulan la diferenciación, proliferación, migración, invasión, angiogénesis y apoptosiscelular. The epidermal growth factor receptor (EGFR) is a member of the ErbB family of cell-surface receptors. It is also referred to as HER-1 and ErbB1. In normal cells, growth factors bind to EGFR and activate several signal transduction pathways. These include the RAS-mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway and the phosphatidyl inositol 3-kinase (PI3K)-AKT pathway, which regulate cell differentiation, proliferation, migration, invasion, angiogenesis, and apoptosis.

11 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalProteinas RAS K-RAS Homólogo humano del oncogen del virus de l sarcoma murino cepa Kirsten H-RAS Homólogo humano del oncogen del virus de l sarcoma murino cepa Harvey N-RAS Homólogo humano del oncogen del virus del neuroblastoma Proteinas pequeñas de 21 KDa de la superfamilia G Unidad a la membrana plasmática Monoméricas de pequeño tamaño Se unen a moleculas GDP y GTP Tienen actividad GTPasa

12 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalEs una GTPase: el GTP se hidroliza a GDP inactivando el RAS, asegurando que la transducción de señales no es eterna. La activación del receptor provoca la unión de moléculas como Grb2 y SOS, que mediarán la activación de Ras. La función de Ras activada es unirse a las proteínas de la familia RAF y reclutarlas hacia la membrana, donde tendrá lugar su fosforilación y consiguiente activación. Las proteínas Raf (RAF-1/CRAF, ARAF y BRAF) son serina/treonina-cinasas que, una vez activadas por Ras, fosforilarán y activarán a la cinasa MEK. BRAF es, de los tres miembros de la familia, la que presenta una mayor actividad basal. Una vez activada la cinasa MEK, esta fosforilará y activará a las cinasas MAPK (mitogen activated protein kinase, también denominadas ERK, extracellular signal-regulated kinases) (Figura 1). Las proteínas MAPK regulan funciones celulares por fosforilación directa de substratos nucleares y citoplasmáticos. Cualquier defecto en la vía de transducción de señales Ras-Raf-MEK-MAPK que produzca una activación constitutiva de la misma, posee importantes implicaciones sobre patologías humanas. Proliferación, supervivencia Diferenciación, modulación del metabolismo

13 Cáncer colorectal y KRASKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal Cáncer colorectal y KRAS Las mutaciones KRAS esta presente en aproximadamente del 35-45% del los pacientes con CRC Mutación  activación constitutiva de KRAS  salta los requerimientos de señalización para el EGFR La presencia de algunas mutaciones de KRAS en CRC se ha relacionado con peor pronóstico. Source: Clinical Colorectal Cancer, Vol. 7, No. 3, , 2008, Freeman et al.

14 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal

15 cobas® 4800 KRAS Mutation Test KRAS Mutations in Colorectal CancersKRAS mutations occur in 35% to 45% of colorectal cancers. Several point mutations of the KRAS gene have been identified in colorectal cancers. >97% of patients with mutated KRAS have mutations in codons 12 or 13. Other KRAS mutations, which can occur in codons 61, 63, 117, 119 and 146, are much less common. Reference: Catalogue of somatic mutations (COSMIC), COSMIC release v42, large intestine; (COSMIC) is designed to store and display somatic mutation information and related details and contains information relating to human cancers. COSMIC is a worldwide database made available through the Wellcome Trust in the UK. The COSMIC database is frequently updated and is intended only to be a representative report of incidence and frequency of somatic mutations in given cancers.

16 Anticuerpos Monoclonales Anti-EGFRKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal Anticuerpos Monoclonales Anti-EGFR Un descontrol en la cascada del EGFR puede ser la causa de procesos neoplásicos debido a un incremento en el número de receptores del EGF Anticuerpos monoclonales anti-EGFR se unen al dominio extracelular del EGFR bloqueando la unión del ligando y la activación del receptor. Fármacos Panitumumab (Vectibix) – Amgen Cetuximab (Erbitux) –Merck

17 Fármacos Anti-EGFR y mutaciones del KRASKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal Fármacos Anti-EGFR y mutaciones del KRAS Mutaciones del KRAS (RAS) conducen a una transducción de señales independientes del EGFR (RTK) Las terapias Anti- EGFR no son útiles en células tumorales que contienen KRAS mutado. RAS Mutado se une al GTP pero no puede hidrolizarlo a GDP RAS siempre está en su ESTADO ACTIVO Descontrol de la transducción de señales Estimulación permanente de la proliferación celular CANCER

18 Ensayo clínico: Panitumumab y mutaciones KRASKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal Ensayo clínico: Panitumumab y mutaciones KRAS Los pacientes con mCRC : KRAS wild-type mejor pronóstico KRAS mutado peor pronóstico Recent phase II trials for Panitumumab alone as a mCRC therapy confirm this result. Clinical Colorectal Cancer, 7(3) pp , 2008

19 Ensayo clínico: Panitumumab y mutaciones KRASKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal Ensayo clínico: Panitumumab y mutaciones KRAS Solamente los pacientes con KRAS wild-type tienen beneficios con Panitumumab A phase III trial comparing Panitumumab monotherapy to Best Supportive Care (BSC) clearly showed, that only mCRC patients with WT status of K-RAS profit from Panitumumab therapy. Biodrugs, 22(6) pp , 2008

20 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalEnsayo clínico: Cetuximab y mutaciones KRAS Los pacientes con mCRC : KRAS wild-type mejor pronóstico KRAS mutado peor pronóstico Clinical phase II trials for the the use of Cetuximab therapy against mCRC show the same characteristics: Only mCRC patients with WT K-RAS profit from Cetuximab therapy. Cancer Research, 66(8) pp , 2006

21 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalGuías Clínicas para uso de Anticuerpos Anti EGFR en cáncer Colorectal metastásico KRAS mutation testing to determine the use of EGFR-targeted monoclonal antibodies in metastatic colorectal cancer is now endorsed by major oncology organizations in the US and Europe, including the American Society of Clinical Oncology (ASCO), the National Cancer Comprehensive Network (NCCN) and the European Society for Medical Oncology (ESMO). In addition, the European Committee for Medicinal Products for Human Use now specifies that cetuximab and panitumumab should be used in patients with KRAS wild type metastatic colorectal cancer. The FDA also recognizes that cetuximab and panitumumab do not benefit patients whose tumors have KRAS mutations in codons 12 or 13. References: 15. 16. European Medicines Agency: Committee for Medicinal Products for Human Use. 17. Food and Drug Administration. Class labeling changes to anti-EGFR monoclonal antibodies, cetuximab (Erbitux) and panitumumab (Vectibix): KRAS mutations.

22 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalBRAF and Cancer BRAF es una serina-treonina cinasa. Pertenece a la familia de proteinas RAF: RAF-1/CRAF, ARAF Y BRAF, siendo la que tiene mayor actividad. RAS activa BRAF que fosforila y activa la cinasa MEK. La mutación V600E en BRAF produce el cambio conformacional normalmente inducido por la fosforilación, produciendose una activación constitutiva. Así en la ruta de señalización intracelular RAF/MAPKo ERK se produce una activación oncogénica logrando un crecimiento celular anormal.

23 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalTipo Tumor Piel Freq* Tiroides Colorectal V600E 88.1% 99.3% 97.9% V600K 4.8% K601E 0.3% 0.1% V600R 1.1% Others** 0.4% D594G 0.5% D594N 2.3% 1.4%

24 Fármacos Anti-EGFR y mutaciones del BRAFKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal Fármacos Anti-EGFR y mutaciones del BRAF Las terapias Anti- EGFR no son útiles en BRAF mutado Wild-Type BRAF Is Required for Response to Panitumumab or Cetuximab in Metastatic Colorectal Cancer. Journal of Clinical Oncology Volumen 26, Número 35 Diciembre   Analysis of PTEN, BRAF, and EGFR Status in Determining Benefit From Cetuximab Therapy in Wild-Type KRAS Metastatic Colon Cancer. Journal of Clinical Oncology Volumen 27 Número 35 Diciembre  Effects of KRAS, BRAF, NRAS, and PIK3CA mutations on the efficacy of cetuximab plus chemotherapy in chemotherapy-refractory metastatic colorectal cancer: a retrospective consortium analysis. The Lancet Oncology Volume 11, Issue 8, Agosto 2010, Pages 753–762 ?????? Terapias Anti- EGFR independientes mutación en BRAF. Solo valor pronóstico Cetuximab Plus Irinotecan, Fluorouracil, and Leucovorin As First-Line Treatment for Metastatic Colorectal Cancer: Updated Analysis of Overall Survival According to Tumor KRAS and BRAF Mutation Status. Journal of Clinical Oncology Volumen 29 Número 15 Mayo BRAF mutation in metastatic colorectal cancer. N Engl Med 361;1 2009 No hay conclusiones claras de la mutación en BRAF y la terapia KRAS, BRAF, PIK3CA, and PTEN mutations: implications for targeted therapies in metastatic colorectal cancer. The Lancet Oncology Volume 12 Issue 6 Junio 2011, Pages 594–603

25 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalCáncer colorrectal metastásico Selección de pacientes para terapias anti-EGFR (hasta junio 2013) KRAS exón 2 wild type (60%) Mutado (40%) SÍ terapias anti-EGFR NO terapias anti-EGFR

26 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalEnsayo clínico PRIME (Amgen) junio’13 Panitumumab + FOLFOX vs FOLFOX en población RAS wt Biomarcadores: KRAS y NRAS exones 2,3,4 y BRAF exon 15 Aumento en la población mutada: 40% al 52% Los pacientes con BRAF mutado responden a panitumumab Los pacientes con RAS (KRAS+NRAS mutado) no responden a panitumumab Método diagnóstico: Transgenomic Wave Surveyor (Menarini)

27 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalEnsayo clínico FIRE-3 (Merck) sept’13 Cetuximab+FOLFIRI vs bevacizumab+FOLFIRI en RAS wt Biomarcadores: KRAS y NRAS exones 2,3,4 y BRAF exon 15 Aumento en la población mutada: 40% al 58% Los pacientes con BRAF mutado responden a cetuximab Los pacientes con RAS (KRAS+NRAS mutado) no responden a cetuximab Método diagnóstico: PyroMark de Qiagen Gen Exon 2 Exon 3 Exon 4 KRAS 40% 4% 6% NRAS 3% 1%

28 Resumen de ensayos clínicosKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal Resumen de ensayos clínicos El análisis del complejo RAS (KRAS+NRAS) y la diferenciación entre los pacientes RAS wild type y RAS mutado permitirá mejorar la toma de decisiones terapéuticas Datos clínicos Resumen PRIME FIRE-3 Las terapias anti-EGFR (cetuximab and panitumumab) se asociaron a una peor respuesta clínica al ampliar el número de pacientes mutados para el complejo RAS PEAK Mayor beneficio clínico de panitumumab en los pacientes RAS WT (KRAS WT y NRAS WT) Bevacizumab mostró un mayor beneficio clínico frente a cetuximab en pacientes RAS mutado

29 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalComplejo RAS Nuevo algoritmo diagnóstico para la selección de pacientes KRAS exones 2,3 y 4 wild type (53%) Mutado (47%) SÍ terapias anti-EGFR NO terapias anti-EGFR NRAS exones 2,3 y 4 wild type (91%) Mutado (9%)

30 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalMétodos determinación KRAS Los dos métodos mas usados son: Secuenciación directa del gen Métodos PCR No existe consenso sobre cual es el método óptimo para testar el den Ras en muestras clínicas. No hay ningún método aprovado por la FDA PCR a tiempo real es mas sensible que la secuenciación

31 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalTecnología TaqMan® Sondas de hidrólisis Los datos de fluorescencia son tomados en cada ciclo después de la elongación. El valor de Ct value es calculado usando el Algoritmo cinético KA 1.3. La secuencia diana es detectada en el canal 1 con la sonda FAM y la secuencia de control interno (Beta-gobina) es detectada en el canal 2 con la sonda HEX .

32 Cobertura de mutacionesKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal 32 cobas® 4800 Diagnóstico del complejo RAS (KRAS & NRAS) en un único instrumento Test Cobertura de mutaciones cobas® KRAS LightMix NRAS KRAS exon 4 Exon 2 Exon 3 12 13 59 61 cobas® KRAS * IVD UDF Test reflejo KRAS wt “Reflex WT” Exon 2 Exon 3 Exon 4 12 13 59 61 117 146 Tibmolbiol NRAS y KRAS exon 4 Exon 4 117 146 * Detectada por reactividad cruzada

33 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalDeterminaciones de KRAS desde Enero 2011 a Abril 2014 Año Nº Det. Nº Muta. % 2011 79 35 44 2012 89 56 62 2013 81 38 47 Abril 2014 29 19 65 Total 277 147 53 Julio 2012 introducción PCR tiempo real

34 KRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectalDeterminaciones de BRAF desde Enero 2011 a Abril 2014 Año Nº Det. Nº Muta. % 2011 47 2 4.3 2012 61 3 4.9 2013 46 5 10.9 Abril 2014 11 1 9.1 Total 165 6.7 Julio 2012 introducción PCR tiempo real

35 Purificar el AnticuerpoKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal Generar panel Ac. monoclonales murinos contra dominio extracelular de los receptores Pruebas en xenoinjertos de cáncer humano Pruebas en líneas celulares humanas (tumorales o normales) Pruebas en líneas celulares humanas en combinación con otros agentes quimioterápicos Seleccionar el anticuerpo mas eficaz Mediante ingenieria genética humanizar el Ac., sustituyendo secuencia de Ig. murinas por humanas Generar vector de expresión del Ac. Bevacizumab (Avastin®, Roche) Panitumumab (Vectibix®, Amgen) Cetuximab (Erbitux®, Merck KGaA). In case of questions: Bevacizumab (trade name Avastin, Genentech/Roche) is a monoclonal antibody against vascular endothelial growth factor-A (VEGF-A). It is used in the treatment of cancer, where it inhibits tumor growth by blocking the formation of new blood vessels (angiogenesis). 17-1A/Edrecolomab. Edrecolomab is a murine antibody that recognizes the human antigen Ep-CAM, also known as 17-1A, which is found on many gastrointestinal-tract tumor cells. It has been investigated as a primary agent against advanced cancers of the pancreas, colon, and rectum and as adjuvant therapy against colorectal cancer. Insertarlo en células en cultivo que en condiciones controladas segregan el Ac. al medio Purificar el Anticuerpo

36 Agentes terapeuticos en cáncer Colorectal Anticuerpos monoclonalesKRAS-NRAS-BRAF Significado Clínico en cáncer colorectal Agentes terapeuticos en cáncer Colorectal Anticuerpos monoclonales Bevacizumab (Avastin®, Roche) Panitumumab (Vectibix®, Amgen) Cetuximab (Erbitux®, Merck KGaA). In case of questions: Bevacizumab (trade name Avastin, Genentech/Roche) is a monoclonal antibody against vascular endothelial growth factor-A (VEGF-A). It is used in the treatment of cancer, where it inhibits tumor growth by blocking the formation of new blood vessels (angiogenesis). 17-1A/Edrecolomab. Edrecolomab is a murine antibody that recognizes the human antigen Ep-CAM, also known as 17-1A, which is found on many gastrointestinal-tract tumor cells. It has been investigated as a primary agent against advanced cancers of the pancreas, colon, and rectum and as adjuvant therapy against colorectal cancer. Edrecolomab is a mouse-derived monoclonal IgG2a antibody. It recognises the human tumour-associated antigen CO17-1A which is expressed on the cell surface of a wide variety of tumours and normal epithelial tissue.