1 La palinología como herramienta forense. Análisis de dos metodologías de muestreo y procesamiento. Fagúndez, G. 1 ; Bertos, M. 1 ; Trujillo, C. 1 ; Bordi, M. 2 ; Albornoz, L. 3 ; Overtello, M. S. 3 1 Laboratorio de Actuopalinología. CICyTTP-CONICET/FCyT-UADER. Diamante, Entre Ríos. E-mail: [email protected] Tel: 0343-4983086/[email protected] 2 Dirección de Criminalística, Policía de Entre Ríos. 3 Licenciatura en Criminalística. FCyT-UADER.

2 INTRODUCCIÓN

3 PALINOLOGÍA palyno o palynein (“esparcir” o “espolvorear”) pale (“polvo fino”) polen ( “harina fina”, “polvo”)

4 INTRODUCCIÓN PALINOLOGÍA Palynein: “polvo que desprenden las flores y se esparce”

5 INTRODUCCIÓN PALINOLOGÍA Ciencia que se ocupa del estudio del polen de las plantas superiores y de las esporas de musgos, helechos y hongos (recuperadas por medios químicos de los carbones y sedimentos minerales). 1940 1961 Entidades/especímenes microscópicos resistentes + PALINOMORFOS

6 INTRODUCCIÓN PALINOLOGÍA PALINOMORFOS -esporas -pequeñas fructificaciones de hongos, -mandíbulas de poliquetos, -quitinozoos, -fragmentos de tejidos vegetales y animales, -quistes algales, -granos de polen.

7 INTRODUCCIÓN PALINOLOGÍA Es una ciencia joven, que comprende una variedad de microfósiles vegetales y animales. Su contenido está circunscripto por sus técnicas más que por la unidad de los materiales estudiados. Ciencia de los palinomorfos

8 INTRODUCCIÓN PALINOLOGÍA La gran variedad de tipos polínicos, la fijeza de los caracteres morfológicos dentro de un mismo taxón, hacen de la Palinología una disciplina de suma utilidad para otras disciplinas, dentro de ellas a la CRIMINALÍSTICA.

9 INTRODUCCIÓN PALINOLOGÍA FORENSE Se centra en la evidencia legal que se deriva del estudio de los palinomorfos, tanto fósiles como modernos. La exina (capa externa) del polen es resistente -química y físicamente y degradación biológica-. Debido a esta característica, los granos de polen se encuentran bien conservados en la escena del crimen por un largo período. Los palinomorfos recuperados del suelo, ropa, pelo, sogas, y canastos y otros materiales pueden revelar el origen geográfico o unir un individuo o un artículo con la escena del crimen.

10 OBJETIVOS

11 Verificar el potencial del análisis polínico en la definición del escenario forense a través del espectro polínico identificado en dos diferentes tipos de muestras: ropa y sedimento, recolectadas en el mismo sitio de estudio y en la misma fecha. Comparar y discutir ambas metodologías de muestreo y procesamiento.

12 MATERIALES Y MÉTODOS

13 Sitio de muestreo Parque General San Martín, área natural protegida “Parque Escolar Rural Enrique Berduc” (Dpto. Paraná, Entre Ríos, Argentina). Sitio de muestreo

14 MATERIALES Y MÉTODOS Sitio de muestreo Fitogeográficamente ESPINAL con representantes PARANAENSES 3 ambientes: -Bosque nativo -Vegetación costera -Pajonales graminiformes Leñosas exóticas generan un bosque caducifolio dominado por “acacia negra”, y acompañado por “mora blanca”, “ligustro”, “ligustrina” y “paraíso”.

15 MATERIALES Y MÉTODOS Muestreos Fecha: 02 de noviembre de 2012 ROPA SEDIMENTOS 2 matrices

16 MATERIALES Y MÉTODOS Muestreos Matriz: ROPA -Prendas de algodón y jean limpias, colocadas en el momento en un voluntario, quien recorrió un sendero durante 1 h. -Recolección con cinta adhesiva, en hombros, piernas y tobillos. Testeos previos

17 MATERIALES Y MÉTODOS Muestreos 1) Cinta adhesiva de tela para uso sanitario “Sanacint” de 12,5mm x 2m. 2) Cinta adhesiva “3M” Microspore Hypoalergenic Surgical Tape. 3) Cinta adhesiva “3M” Nexcare Transpore TM hipoalergénica 12,9mm x 9,1m. 4) Cinta adhesiva de papel “Doble A” profesional 12mm 5) Cinta adhesiva “3M” Tartan TM 301 6) Cinta adhesiva ancha “Stiko” 24mm x 50m 7) Cinta adhesiva “3M” Steri-Strip TM 8) Cinta adhesiva “Motex 800” cinta invisible 18mm x 30m. 9) Cinta adhesiva “Scotch” cinta cristal 18mm. Matriz: ROPA

18 MATERIALES Y MÉTODOS Muestreos 1) Cinta adhesiva de tela para uso sanitario “Sanacint” de 12,5mm x 2m. 2) Cinta adhesiva “3M” Microspore Hypoalergenic Surgical Tape. 3) Cinta adhesiva “3M” Nexcare Transpore TM hipoalergénica 12,9mm x 9,1m. 4) Cinta adhesiva de papel “Doble A” profesional 12mm 5) Cinta adhesiva “3M” Tartan TM 301 6) Cinta adhesiva ancha “Stiko” 24mm x 50m 7) Cinta adhesiva “3M” Steri-Strip TM 8) Cinta adhesiva “Motex 800” cinta invisible 18mm x 30m. 9) Cinta adhesiva “Scotch” cinta cristal 18mm. Matriz: ROPA

19 MATERIALES Y MÉTODOS Muestreos Muestra sospechoso Muestra Control (sitio del hecho) ROPA Cinta adhesiva Matriz: ROPA Medio ? ? Matriz

20 MATERIALES Y MÉTODOS Muestreos Muestra sospechoso Muestra Control (sitio del hecho) Muestra Control (sitio del hecho) ROPA Cinta adhesiva Matriz: ROPA Relevamiento vegetación

21 MATERIALES Y MÉTODOS Muestreos Matriz: SEDIMENTO -Recolección de sedimento de calzado (SC) de un voluntario quien recorrió ida y vuelta una transecta de 3,5 m., con calzado limpio. -Recolección de sedimento superficial (SS) (Método de la pizca, o submuestras múltiples): Muestra control.

22 MATERIALES Y MÉTODOS Muestreos Muestra sospechoso Muestra Control (sitio del hecho) SEDIMENTO Calzado Matriz: SEDIMENTO SEDIMENTO Superficial Matriz

23 MATERIALES Y MÉTODOS Procesamiento - Despegar y cortar las cintas en trozos (tamaño de un portaobjetos). Matriz: ROPA

24 MATERIALES Y MÉTODOS Procesamiento - Despegar y cortar las cintas en trozos (tamaño de un portaobjetos). Matriz: ROPA - Acetólisis.

25 MATERIALES Y MÉTODOS Procesamiento - Cintas cortadas en trozos (tamaño de un portaobjetos). Matriz: ROPA - Acetólisis. -Montaje de las cintas y del residuo.

26 MATERIALES Y MÉTODOS Procesamiento Matriz: SEDIMENTO 1) Ruptura de partículas de gran tamaño en mortero. 2) Separación de los restos vegetales. 3) Tamizado con mallas de 500 µm y 250 µm, lavando con agua destilada a presión. 4) Tratamiento químico ( Metodología de Horrocks, 2004 modificada ).

27 MATERIALES Y MÉTODOS Procesamiento Matriz: SEDIMENTO 1) Digestión con Hidróxido de potasio – ruptura de la matriz (defloculación) para disolver los materiales húmicos. TRATAMIENTO QUÍMICO: 2) Tratamiento con Pirofosfato sódico –remoción de arcillas. 3) Oxidación – remoción de la materia orgánica (ácido acético glaciar, clorato de sodio y ácido sulfúrico). 4) Acetólisis – remoción de celulosa (mezcla de anhídrido acético y ácido sulfúrico).

28 RESULTADOS

29 Matriz: ROPA Se identificaron 40 palinomorfos: 25 tipos polínicos y 15 tipos esporales. Los tipos polínicos correspondieron a 16 familias botánicas; los tipos esporales correspondieron 1 a Bryophyta y el resto a hongos. El registro del polen obtenido permitió identificar elementos de las comunidades presentes en el área: -Bosque semixerófilo del Espinal, representado por Prosopis (“algarrobos”, “ñandubay”), Schinus (“molle”, “aguaribay”), Celtis (“tala”, “talitas”) y Ephedra (“tramontana”). -Bosques Higrófilos o en Galería de la provincia Paranaense por Salix (“sauces”); -representantes de los pajonales como Typha (“totora”), y -especies exóticas invasoras como Gleditsia triacanthos (“acacia negra”), Ligustrum spp. (“ligustrina”, “ligustro”) y Morus sp. (“mora blanca”).

30 RESULTADOS Matriz: SEDIMENTO SC SS

31 RESULTADOS Matriz: SEDIMENTO Análisis de similitud de las muestras: SC - SS MUESTRASPSMSPSMC PSMS1 PSMC0.651 Considerando: presencia (diversidad de tipos polínicos) Considerando: presencia (diversidad ) y abundancia de tipos polínicos Análisis de Agrupamiento o Cluster

32 DISCUSIÓN

33 Los resultados obtenidos con ambas metodologías de muestreo y procesamiento reflejaron una aproximación útil y valiosa para el reconocimiento del sitio de estudio ya que los tipos polínicos encontrados reflejaron el ambiente muestreado. Ambas metodologías resultaron adecuadas para el levantamiento de polen. enriquecidas en especies que se encontraban en plenitud de floración en el momento del muestreo. Muestra ROPAMuestra SEDIMENTO enriquecidas en especies de floración previa al momento del muestreo. DISCUSIÓN Se destaca la abundante cantidad de material relevado con ambos métodos de levantamientos y la buena calidad de preparados logrados con las metodologías de procesamiento empleadas.

34 DISCUSIÓN COMPARACIÓN DE LAS METODOLOGÍAS bajo costo. fácil transporte. rapidez en el procesamiento. CINTA ADHESIVASEDIMENTOS DISCUSIÓN VENTAJAS deben ser analizadas numerosas sub- muestras. Requiere analista con amplios conocimientos botánicos y fitogeográficos para asociar muestra. DESVENTAJAS VENTAJAS Solo se analiza una muestra (o pocas sub-muestras). Se cuenta con una muestra control. Mayor costo. Mayor tiempo de procesamiento. DESVENTAJAS

35 CONCLUSIONES

36 El análisis polínico es una valiosa herramienta para asociar personas u objetos con la escena del crimen, constituyéndose en un elemento más de valoración en el análisis de casos forenses. Se validan los métodos de recolección de muestras, así como las técnicas de procesamiento empleadas.

37 MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCIÓN Dra. Guillermina Fagúndez E-mail: [email protected][email protected] Tel.: 0343-4983086/7 www.actuopalinologia.wordpress.com