1 MARCADORES DE DETERMINACIÓN DIRECTA Introducción Enzimas de restricción La reacción en cadena de la polimerasa Secuenciación PCR cuantitativa Micromatrices (Microarrays) Técnicas complementarias Polimorfismos de longitud de los fragmentos de restricción Repeticiones en tándem de número variable Frecuencias alélicas de genes Polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs) ADN mitocondrial Inserciones Alu

2 EnzimaSecuenciaEnzimaSecuencia Eco RIGAATTCNar IGGCGCC Bcl ITGATCANae IGCCGGC Nco ICCATGGSma ICCCGGG Bam HIGGATCCAcc IIITCCGGA Alu IAGCTTaq ITCGA Hae IIIGGCCMae IIACGT Apa IGGGCCCMae ICTAG Not IGCGGCCGCNde ICATATG Bal ITGGCCASsp IAATATT Hind IIIAAGCTTSpe IACTAGT Cfo IGCGCSwa IATTTAAAT Enzimas de restricción Secuencias de corte de algunas enzimas de restricción

3 Enzimas de restricción Esquema de un análisis básico con enzimas de restricción

4 Enzimas de restricción

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6 MarcadorMarcador MarcadorMarcadorMadreMadreHijoHijo Padre alegado MixMix Tests sencillos de paternidad

7 Reacción en cadena de la polimerasa Número de cadenas obtenido. Ciclo 2: 2 - Ciclo 3: 2 - … - Ciclo 30: 2 1229

8 Reacción en cadena de la polimerasa

9 La PCR se realiza mediante termocicladores

10 Secuenciación Lectura manual de una secuencia

11 Secuenciación

12 Secuenciación Electroferograma de una secuencia

13 Secuenciación Analizador de ADN

14 Secuenciación

15 PCR cuantitativa

16

17 Micromatrices

18 Micromatrices

19 Extracción de ADN

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21 Cuantificación de ADN

22 Fluorímetro