1 MICOLOGIA BASICA

2 TERMINOLOGIA

3 Gr: Mykes = seta, miceto + logos= discurso, Etimología - Estudio de las setas. Los biólogos usan el término hongos : L: fungus = setas (plural: fungi) Gr: sphongos = esponja Setas están entre los hongos más grandes- Que atrajeron la atención de los naturistas. La etimología de la palabra hongo es variada y depende de los diferentes idiomas.

4 Terminología Micosis = Infección Micótica = Infección FúngicaInfección causada por un hongo (Micromiceto) Micología: Estudio de los hongos Micología médica: Estudio de los hongos patógenos humanos

5 UTILIDADES

6 Industria alimenticia Industria farmacológicaBeneficios Ecología forestal (Micorrizas) Lucha biológica (Control de insectos, nemátodos) Industria alimenticia (Quesos, pan, alcohol, Enzimas industriales, etc) Industria farmacológica (Antibióticos, Fito-hormonas) Biodegradación (Materia orgánica)

7 CARACTERISITICAS FUNDAMENTALES

8 HONGOS MICROSCOPICOS DEFINICIÓN GENERAL EucariotasUnicelulares o pluricelulares Inmóviles Heterótrofos por absorción Pared celular con quitina Membrana citoplasmática con ergosterol Incapaces de formar tejidos Reproducción por esporas: sexual o asexual Respiración aerobia estricta o anaerobia facultativa. Pueden fermentar azúcares.

9 Membrana citoplasmática Sensibilidad a los agentes químicosHongos Bacterias Tamaño Levaduras: µm Mohos: Tamaño indefinido mayor que las levaduras y multiformes. 1-5 µm Núcleo Eucariótico Procariótico Citoplasma Mitocondria, retículo endoplasmico No mitocondria o retículo endoplasmico Membrana citoplasmática Existencia de esteroles Sin esteroles (excepto micoplasmas) Pared celular Rígida: Glucanos; mananos; quitina, complejos proteicos con glucanos y mananos. No tiñen al Gram Péptidos con ácidos murámicos, ácidos teicoicos; acido diaminopimálico Metabolismo Heterotróficos, aerobios estrictos Aerobios obligados y facultativos y anerobios heterotroficos y autotroficos Sensibilidad a los agentes químicos Sensibles a los polienos y griseofulvina. Resistentes a antibióticos Sensibles a antibióticos Dimorfismo Característica diferencial de algunos Ausente

10 CARACTERISITICAS NUTRICIONALES

11 Los hongos… SAPRÓFITOS PARÁSITOS SIMBIOSIS

12 Modalidades econutricionalesHONGOS SAPRÓFITOS: Crecen en restos vegetales y animales muertos(no vertebrados) Patógenos oportunistas- Papel ecobiológico HONGOS ZOOTRÓFICOS Crecen en tejidos de organismos vivos durante parte de su ciclo de vida. Patógenos primarios- Enfermedad HONGOS NECROTRÓFICOS: Utilizan compuestos orgánicos producidos por animales vertebrados Patógenos oportunistas- Enfermedad

13 ESTRUCTURA CELULAR

14 Diferencias estructurales Quitina, mananos, glucanosHongo Bacteria Planta Animal Núcleo Sí No Cromosomas Varios Uno Membrana celular R. endoplasmico Mitocondrias Cloroplastos Clorofila Algunas Ribosomas 80S 70S Esteroles(M. C.) Ergosterol Colesterol Pared celular Quitina, mananos, glucanos Mureína Celulosa Cápsula Algunos

15 CLASIFICACION MORFOLOGICA

16 TALO FÚNGICO Cuerpo del HongoLos hongos están constituidos por un: Talo vegetativo, cuya función es: Nutrición Crecimiento Resistencia Fijación Talo de reproducción o de fructificación cuya función principal CONSERVACIÓN DE LA ESPECIE Dispersión a distancia a través de Propágulos de dispersión o ESPORAS.

17 Macroscópica /MicroscópicaMorfología Fúngica Mohos Levaduras Dos tipos crecimiento simultaneo (Pleomórficos) Dimórficos Endosporales Observación Macroscópica /Microscópica

18 Morfología Levaduras: Forma de crecimiento unicelular.De 3-10 μm de diámetro Estructuras Redondeadas Colonias Cremosas Reproducción por: Gemación Bipartición

19 MORFOLOGÍA DE LA LEVADURATalo Levaduriforme TALO UNICELULAR: Blastoconidia Unidad fúngica más simple Característico de las levaduras Se reproducen por gemación

20 MORFOLOGÍA DE LA LEVADURABlastoconidia Micelio verdadero Seudomicelio Clamidosporas Observación Microscópica

21 CRECIMIENTO In vitro: LEVADURAObservación Macroscópica

22 Morfología Hifas: Estructuras Tubulares Colonias AlgodonosasPluricelulares- Crecimiento longitudinal Formados por Micelios (conjunto de hifas) Vegetativos Reproductores Aéreo Producción de esporas

23 MORFOLOGÍA DE LOS MOHOSTalo Micelial TALO PLURICELULAR: Hifas Estructura filamentosa (tubular) Característico de hongos filamentosos Origen: Germinación de la espora Tipos: Septadas Aseptadas

24 MORFOLOGÍA DE LOS MOHOSEstructuras reproductoras MICELIO Hifas reproductoras Hifa septada SUSTRATO Hifas vegetativas Hifa cenocítica (Aseptadas)

25 CRECIMIENTO In vitro: MOHOHIALINOS Observación Microscópica Observación Macroscópica MICELIO = COLONIA HIFAS Estructuras cilíndricas, multicelulares, de 2 a 10 m de diámetro.

26 CRECIMIENTO In vitro: MOHODEMATIACEOS Observación Microscópica Observación Macroscópica HIFAS Estructuras cilíndricas, multicelulares, de 2 a 10 m de diámetro. MICELIO = COLONIA

27 OBSERVACIÓN MICROSCOPICADEMATIACEA Pigmentos (melanina). Función: tolerancia al estrés ambiental y contra oxidantes antimicrobianos. HIFAS HIALINA Hongos Levadurifomes, Hongos Miceliales AZUL DE LACTOFENOL

28 OBSERVACIÓN MICROSCÓPICASEPTADA O TABICADA 2-5 micras HIFAS ASEPTADA 10-15 micras Hongos Miceliales Micelio continuo o cenocítico AZUL DE LACTOFENOL

29 Dos tipos crecimiento simultaneo Micelio verdadero PseudomicelioTalo Levaduriforme/Micelial Dos tipos crecimiento simultaneo Micelio verdadero Pseudomicelio Blastoconidia PLEOMORFICOS Tienen la capacidad de presentar morfología macroscópica y microscópica de un hongo levaduriforme y un hongo micelial al mismo tiempo

30 Morfología Dimórficos:Capacidad de desarrollar cualquiera de las dos morfologías, dependiendo de la temperatura Según las características del ambiente A diferente tiempo

31 Forma en que se encuentra Forma en que se encuentraMedio ambiente (Tº 25-28ºC) Medios pobres (Hongo filamentoso) Forma saprofítica Forma en que se encuentra en la naturaleza DIMORFISMO FÚNGICO Forma parasitaria Tejido (parásito): (levaduriforme) Disponibilidad de monosacáridos Presencia de grupos sulfhídricos Agregado de proteínas como fuente de Nitrógeno Cultivo a 37ºC – 6% CO2 Forma en que se encuentra en el hospedero

32 CRECIMIENTO LEVADURIFORME OBSERVACIÓN MACROSCÓPICADIMORFISMO FUNGICO CRECIMIENTO MICELIAL TEMPERATURA AMBIENTE CRECIMIENTO LEVADURIFORME TEMPERATURA 37°C OBSERVACIÓN MACROSCÓPICA NO SIMULTANEA

33 Condicionada por factores del medio OBSERVACIÓN MICROSCÓPICADIMORFISMO FÚNGICO Estrecha Relación MORFOGENESIS FISIOLOGIA Condicionada por factores del medio Temperatura Nutrientes pH OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA

34 Morfología Endosporales:No tienen apariencia de hongos levaduriformes o miceliales- Forma parasitaria (Enfermedad) Tienen como características la formación de cavidades en forma saco Producen los endosporos por partición citoplasmática

35 ESFERULAS/ENDOSPORAS OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA OBSERVACIÓN MACROSCÓPICAENDOSPORALES CRECIMIENTO MICELIAL ESFERULAS/ENDOSPORAS OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA OBSERVACIÓN MACROSCÓPICA

36 No filamentosos. LevadurasCLASIFICACIÓN MORFOLOGICA Hongos Dimórficos Septados Filamentosos Aseptados No filamentosos. Levaduras Hialinos Dematiáceos Pleomórficos Endosporales

37 TAXONOMIA Y CLASIFICACION

38 ARBOL FILOGENETICOS DE EUCARIOTESCLASIFICACION TAXONÓMICA DE LOS HONGOS SECUENCIAS DNA 18S

39 TAXONOMIA FUNGICA Reino: Fungae División: Eumycota Subdivisión:ASEXUAL SEXUAL SEXUAL ASEXUAL SEXUAL ASEXUAL SEXUAL ASEXUAL

40 REPRODUCCION

41 Continuación de la especieREPRODUCCIÓN DE LOS HONGOS Asexual FASE- ANAMORFO Continuación de la especie Proceso Mitótico (Condiciones favorables) Sexual FASE- TELEMORFO Intercambio genético Proceso Meiótico (Condiciones adversas) Propágulos de dispersión ESPORAS Células uni o multinucleadas destinadas a propagación a distancia

42 REPRODUCCIÓN DE LOS HONGOSSEXUAL O TELEOMORFO: HONGOS PERFECTOS Unión de núcleos compatibles. Plasmogamia-Cariogamia-meiosis No frecuente en hongos patógenos humanos ESPORAS SEXUADAS: Clasificación taxonómica Zigosporas Zigomycota Basidiosporas Basidiomycota Ascosporas Ascomycota

43 REPRODUCCIÓN DE LOS HONGOSASEXUAL O ANAMORFO: HONGOS IMPERFECTOS No hay unión de núcleos, células u órganos sexuales. Más importante- Enfermedad Frecuente en hongos patógenos ESPORAS ASEXUADAS Identificación de especies DEUTEROMYCOTA

44 Reproducción asexual En hongos patógenos… Predomina Fisión y Gemación:Levaduras (Blastoconidios) Formación de esporas asexuales: Miceliales (Esporangiosporas) Formación de conidios: Miceliales (Hongos conidiales )

45 FORMACION DE ESPORAS ASEXUALES (FISION -GEMACIÓN)Ocurre por elongación de la célula a medida que el núcleo se duplica. GEMACION Aparición de un brote o yema en la pared Crece hasta alcanzar el tamaño de la célula madre Se produce un septo- Permite la separación de las dos células. Unipolar, bipolar, multipolar Simple, múltiple. Esporas Asexuadas HONGOS LEVADURIFORMES En hongos patógenos

46 FORMACION DE ESPORAS ASEXUALES (EN ESPORANGIOS)En hongos patógenos ESPORANGIOSPOROS: Esporas asexuales de carácter endógeno Producidas dentro de estructuras cerradas - Esporangios Que a su vez son sostenidas por hifas especializadas de micelio aéreo o reproductivo - Esporangióforo HONGOS MICELIALES ASEPTADOS Esporas Asexuadas

47 FORMACION DE ESPORAS ASEXUALES (CONIDIACION)En hongos patógenos CONIDIOS: Esporas asexuales de origen exógeno Característica de hongos con hifas septadas. Se forman a partir de una hifa reproductiva especializada- Célula conidiógena La sostiene una hifa especializada- Conidióforo Se emplean corrientemente para la identificación de los hongos HONGOS MICELIALES SEPTADOS Esporas Asexuadas

48 FORMACION DE ESPORAS ASEXUALES (CONIDIACION)En hongos patógenos Formacion De Conidios: Se identifican, por color Hialoconidios/Feoconidios Por Tamaño Macroconidos/Microconidios Por presencia de septos Ameroconidio/Didimoconidio/Fragmoconidio/Dictioconidios HONGOS MICELIALES SEPTADOS Esporas Asexuadas

49 FORMACION DE ESPORAS ASEXUALES (CONIDIACION)Esporas Asexuadas Fragmoconidio Didimoconidio Ameroconidio Dictioconidio Ameroconidio FORMAS DE CONIDIACION

50 EFECTOS DE LA SALUD SOBRE HUMANOS

51 Tener en cuenta: SOSPECHA CLÍNICA Antecedentes del pacienteOcupacional, Exposicional Hospedero inmunocomprometido-Factor de riesgo Trastornos endocrinos Inmunodeficiencias Enfermedades neoplásicas Alteraciones metabólicas y anatómicas Drogadicción endovenosa Pacientes bajo tratamiento prolongado con corticoides o citostáticos Sometidos a cirugía, dializados, quemados Trasplantados o con cateterización Tipo de muestra

52 PATOGENOS PRIMARIOS RECONOCER... Pueden causar enfermedad en pacienteinmunocompetente - Paciente “Sano” Zonas Endémicas 90% de curso asintomático Se pueden convertir en oportunista cuando las defensas del hospedero se deterioran Generalmente en inmunocompetente- Hay resolución de la infección Primoinfección- Pulmonar- cura espontanea Histoplasma capsulatum Paracoccidiodes brasiliensis Coccidioides immitis

53 PATOGENOS OPORTUNISTASRECONOCER... PATOGENOS OPORTUNISTAS Rara vez causan enfermedad en paciente inmunocompetente- Paciente inmunosuprimido Distribución mundial Producen enfermedad sintomática- Alteración de la respuesta inmune No resuelven espontáneamente Primoinfección cualquier lugar del cuerpo Son altamente virulentos si los mecanismos de defensa del hospedero están deteriorados Candida spp. Aspergillus spp. Cryptococcus neoformans Pneumocystis jirovecii

54 MICOPATOLOGIA

55 Estados patológicos provocados por hongosALERGIAS Sensibilización o respuesta alérgica a hongos saprófitos cuando hay contacto con mucosas o piel. Alternaria Asma Sinusitis alérgica Erupciones cutáneas Aspergillus, Mucor, levaduras Aspergillus

56 Estados patológicos provocados por hongosMICETISMO Consumo de hongos tóxicos, las toxinas son liberadas dentro de los tejidos humanos. Toxinas = Hongos venenosos Metabolitos secundarios Ciclopéptidos Amanita muscaria Amanita phalloides Síndromes hepáticos, digestivos Vasculares o nerviosos Hongos alucinógenos LSD, Psicocibina,etc TOXICIDAD DIRECTA Lycoperdon, Psilocibe, etc.

57 Estados patológicos provocados por hongosConsumo de alimentos contaminados con toxinas de hongos MICOTOXICOSIS Géneros: Aspergillus Fusarium Penicillium Aflatoxinas Sterigamatocistinas Ocratoxinas Zearalenonas Tricotecenos Patulina Luteoskinina

58 Estados patológicos provocados por hongosMICOSIS Infección por proliferación en los tejidos animales con desarrollo de respuesta inmune originada por el antígeno fúngico Micosis superficiales, cutáneas, subcutáneas, sistémicas, oportunistas

59 CLASIFICACION CLINICA

60 Pueden causar procesos infecciososClasificación clínica Enfermedades de interés reciente…. Infecciones oportunistas Aspergilosis Candidiasis Criptococosis Hialohifomicosis Zigomicosis Infecciones sistémicas Histoplasmosis Paracoccidiodomicosis Coccidiodomicosis Infecciones superficiales-cutáneas Dermatofitos Piedra negra y blanca Pitiriasis Infecciones subcutáneas Esporotricosis Cromoblastomicosis Micetoma Pueden causar procesos infecciosos Desde cuadros clínicos benignos o asintomático hasta cuadros graves y fatales.

61 INMUNOLOGIA

62 “HONGO PATOGENO”- POSEA Factores de virulencia:ADHERENCIA Estrato córneo o a las superficies mucosas CAPACIDAD DE PENETRACION En los tejidos del hospedero para facilitar el acceso a los órganos o líquidos corporales “diana” FACILIDAD DE MULTIPLICACION “In vivo" (Termotolerancia y adaptación a las condiciones físico-químicas del huésped) CAPACIDAD PARA ELUDIR Los mecanismos de defensa del hospedero.

63 “HONGO PATOGENO”- Produzca enfermedad Depende:Virulencia de la partícula infectante La cantidad La vía de infección La inmunidad del hospedero El órgano afectado La coexistencia con otras infecciones o enfermedades. Los Mecanismos de defensa- Acción manera coordinada- Inhibir su proliferación – Favorecer su eliminación. Cada agente etiológico- Según sus particularidades antigénicas- Evoca una respuesta celular y/o humoral

64 DIAGNOSTICO

65 INFECCIONES MICOTICASDiagnóstico problemático.. INDISPENSABLE.. integrar INFECCIONES MICOTICAS Datos Clínicos, Radiológicos DIAGNOSTICO Factores de Riesgo, Predisponentes Hallazgos Laboratorio

66 MÉTODOS DIAGNÓSTICOS PARA MICOSISExamen Directo- Microscopía Examen Histopatológico- Microscopía Cultivo e identificación- A.E. Detección de componentes fúngicos Detección de anticuerpos Detección de antígenos Métodos moleculares-PCR Detección de la resistencia Herramientas útiles… Aproximación diagnóstica

67 Diagnóstico Directo Mediante La Observacion Y Aislamiento Del Agente Etiologico

68 Examen Directo Puede hacer el diagnostico definitivo cuando los elementos estructurales son patognomónicos de ciertos hongos

69 EXAMEN DIRECTO- CONVENCIONALTINCIONES MICROBIOLOGICAS DIAGNOSTICO Hidróxido de Potasio (KOH) Calcofluor blanco con azul de evans Tinta china Coloración verde de malaquita Coloración de Wright Coloración de Giemsa Diff-Quick Coloración de Gram Kinyoun (Modificado de Ziehl-Neelsen)

70 EXAMEN DIRECTO- CONVENCIONALTINCIONES DE HISTOLOGIA DIAGNOSTICO, PRESUNCION Hematoxilina-Eosina (HE) Acido periódico de Schiff (PAS) Plata-Metenamina de Gomori (Grocott) Masson - Fontana Azul-alcian Mucicarmína

71 AISLAMIENTO DEL AGENTE ETIOLOGICOAutomatización hemocultivos- Avance procesamiento Elimina necesidad realizar subcultivos a ciegas – Iniciales o terminales Reduce riesgo punciones accidentales Disminuye tiempo de incubación Mejora tiempo de detección de los hemocultivos positivos Adicional- Datos epidemiológicos Sistemas Automatizados HEMOCULTIVOS: BACT-ALERT BACTEC-BD DIAGNOSTICO

72 CULTIVOS MICOLOGICOS Y PRUEBAS ESPECIALESAISLAMIENTO DEL AGENTE ETIOLOGICO CULTIVOS MICOLOGICOS Y PRUEBAS ESPECIALES PARA AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE GENERO Y ESPECIE: Agar Sabouraud- Dextrosa (SAB) Agar Papa Dextrosa (PDA) Agar Medio 3 Agar Sangre Agar SABHI DIAGNOSTICO

73 CULTIVOS MICOLOGICOS Y PRUEBAS ESPECIALESIDENTIFICACION DE ESPECIES DE LEVADURAS Perfiles de asimilación, perfiles de fermentación, Identificación de metabolitos (Paneles comerciales, identificadores rápidos de levaduras. CHROMagar-Candida   Prueba Filamentación (Tubo germinal) Formación de clamidosporas en Agar Cornmeal+ Tween 80 Agar acido cafeíco Agar GCB Medio YM DIAGNOSTICO CULTIVOS MICOLOGICOS Y PRUEBAS ESPECIALES

74 Clasificación de especie levaduriformePerfiles de asimilación Perfiles de fermentación Identificación de metabolitos Vitek, Api ID 32C, Api 20C AUX Yeast Star Auxacolor RapID Yeast Plus system Api Candida DIAGNOSTICO

75 DIAGNOSTICO IDENTIFICACION DE ESPECIES DE MICELIALES Agar CZAPEC-DOXAgar Malta Agar Lacrimel Agar Avena Agar Cornmeal+ Tween 80 Agar Micosel Agar CLA (hojas de clavel) Medio de Arroz Microcultivos con Agar Cornmeal+ Tween 80 CULTIVOS MICOLOGICOS Y PRUEBAS ESPECIALES DIAGNOSTICO

76 DIAGNOSTICO IDENTIFICACION DE ESPECIES DE MICELIALESIDENTIFICACION- Genero y Especie CARACTERES MACROSCOPICOS Diámetro de la colonia, color, textura…. CARACTERISTICAS MICROSCOPICOS Morfología de la hifas, de las estructuras fértiles…. DIAGNOSTICO

77 Diagnóstico Indirecto Mediante Detección De Acs, Ags Y Pcr

78 Diagnostico/Presunciónde Infección Fúngica SIN-Cultivo Microbiológico: Componentes del patógeno invasor Respuesta del hospedero Pruebas de Detección: ACS del hospedero AGS fúngicos Metabolitos fúngicos Ácidos nucleicos fúngicos

79 EXAMEN INDIRECTO- NO CONVENCIONAL PRUEBAS INMUNOLOGICAS Y MOLECULARESHERRAMIENTAS UTILES APROXIMACION DIAGNOSTICA RAPIDA EXAMEN INDIRECTO- NO CONVENCIONAL PRUEBAS INMUNOLOGICAS Y MOLECULARES PRESUNCION, PRONOSTICO, SEGUIMIENTO Detección de antígenos/anticuerpos Detección de metabólitos fúngicos Detección de componentes fúngicos

80 Los procedimientos moleculares e inmunológicos – Proveer una evidencia presumible y rápida de la infección. Las reacciones inmunológicas- Dar los primeros indicios que nos permitan revelar la existencia de infección fúngica.

81 Clasificación de especie: Métodos molecularesEscenarios para el uso de herramientas moleculares Clasificación de especie: Métodos moleculares Hibridización (Reasociación) del ADN PCR Huellas- Detección de Acidos nucleicos Secuenciación Diagnóstico de agentes etiológicos. (sangre, fluido ó tejidos). Identificación de género y especie de los hongos Cuantificación de la carga fúngica. Monitoreo del tratamiento. Himmelreich U. Appl. Environ. Microbiol. Aug 2003

82 MICOSIS HUMANA

83 MICOSIS SUPERFICIALES

84 CARACTERÍSTICAS MICOSISProceso infeccioso- Capas más externas Estrato córneo de la piel Cutícula del pelo Colonización de tejidos inertes No hay respuesta inmune celular No causan molestias físicas al paciente Problema cosmético, fácil de tratar.

85 MICOSIS CUTANEAS

86 CARACTERÍSTICAS MICOSISProceso infeccioso- Capas queratinizadas de la piel Estrato córneo de la piel Cutícula del pelo, uñas Colonización de tejidos inertes Si hay respuesta inmune celular Cambios patológicos (capas profundas) Problema cosmético, difícil de tratar. Grupo homogéneo de microorganismos- “Dermatofitos”

87 MICOSIS SUBCUTANEAS

88 CARACTERÍSTICAS MICOSISEnfermedades crónicas que afectan tejido cutáneo, subcutáneo y linfático. De larga evolución, difícil tratamiento Introducción traumática del hongo Se pueden presentar en individuos saludables- Frecuente en agricultores Si hay respuesta inmune celular Cambios patológicos (capas profundas) Los hongos causantes de estas patologías son ubicuos y habitan en el suelo o en la vegetación- “Hongos Negros”

89 MICOSIS SISTEMICAS

90 CARACTERÍSTICAS MICOSISDistribución geográfica específica- Endémicas Hongos Dimórficos Ingresan al hospedero produciendo una primoinfección pulmonar - Progresan por vía hemática y linfágica Afecta individuos inmunocompetentes y saludables Formas clínicas: Dependen de la inmunidad del hospedero Vía de infección: Inhalatoria- Fase saprofítica del hongo Curación espontánea en el 90% de los casos

91 MICOSIS OPORTUNISTAS

92 CARACTERÍSTICAS MICOSISSe presentan en circunstancias de inmunodeficiencia por cualquier causa- Factores de riesgo asociados Hongos saprofitos de la naturaleza o componentes de la flora normal del humano Son cosmopolitas Patología inicial- En cualquier sitio anatómico Son sintomáticas- Necesitan manejo y tratamiento clínico Alta incidencia de morbilidad y mortalidad Especies de Candida, Aspergillus, Rhizopus, Mucor

93 A.E.: Cryptococcus neoformansCRIPTOCOCOSIS A.E.: Cryptococcus neoformans Levaduras esféricas encapsuladas- Saprofito ambiental Colonias lisas color crema y mucoides. Capsula principal factor de virulencia Patogenia: Vía de infección = Inhalatoria Blastoconidias -→ Encapsulamiento (↑[CO2]+↓[Fe3+]) → Complejo ganglionar primario Anillo de Macrófagos y células gigantes que impiden diseminación Activación de Respuesta inflamatoria (TNFα, IL-1,6y8) → Reclutamiento PMN → Activación de LT y LB → Potenciación celular y Acs protectores

94 EXAMENES DIAGNOSTICOSDirecto: LCR (↑Presión, leucocitosis linfocítica, ↑Proteínas, ↓Glucosa) Blastoconidias Ovales al Gram – Aureola Clara a la Tinta China Cultivo: (inicia blanco y torna beige-amarillo-marrón) Serología:Detección de antígeno polisacárido –LCR y suero- Cryptolatex Histopatología: PAS (Granulomas histiocíticos – levaduras capsuladas)

95 A.E.: Aspergillus fumigatus, a. flavus, A. niger, A. terreusASPERGILOSIS A.E.: Aspergillus fumigatus, a. flavus, A. niger, A. terreus Moho filamentoso, hifas hialinas septadas y ramificadas-Reproducción asexuada por Conidias. Saprofito en vegetales, granos de cereal, materia orgánica en descomposición, abono, plantas. También en filtros de aire, paredes, techos húmedos, polvo, alimentos, cortinas. Patogenia: Vía de infección = Pulmonar Raramente la inoculación directa a tegumento por Trauma- Factor de riesgo asociado Conidias → Nasofaringe → Alveolos [↓ mecanismos de defensa, inoculo, virulencia]

96 EXAMENES DIAGNOSTICOSDirecto: KOH al 10%, Gram Hifas hialinas septadas, el conidióforo es visible. Cultivo (tarda de 24 a 48 horas en dar reporte). Serología. Detección del Ags. Galactomanano Histopatología: Infartos con invasión de vasos sanguíneos por hifas.

97 A.E.: Rhizopus sp. Mucor sp., Absidia sp., Rhizomucor sp.MUCORMICOSIS A.E.: Rhizopus sp. Mucor sp., Absidia sp., Rhizomucor sp. Colonias crecimiento rápido (2-5d), algodonosas Reproducción asexuada por esporangiosporas. Presencia en materia orgánica en descomposición, frutas y harinas Patogenia: Vía de infección = Inhalatoria o asentamiento en lesiones de continuidad DM, leucemia, Neoplasias SRE, trasplantes de órganos sólidos, DNT, deshidratación, citostáticos, corticosteroides, Quemaduras, Tx. Esporangiosporas→ Crecimiento micelar → Tropismo por vasos sanguíneos. Propensión a trombosis → Necrosis tisular

98 EXAMENES DIAGNOSTICOSDirecto: Gram- Crisis Hiperglucemicas Hifas gruesas, irregulares, septadas en ángulo 90º. Cultivo: (gran contaminante ambiental; algodonoso, blanco-grisaseas, puntos negros) Histopatología: de Zonas Necróticas Invasión vascular y necrosis tisular Hongo en lumen de vasos, trombos, hemorragias tisulares e infartos.

99 A.E.: Pneumocystis jirovecii (carinii)NEUMOCISTOSIS A.E.: Pneumocystis jirovecii (carinii) 60-80% VIH en los 80’s >30% VIH en tto con TMP/SMX ó pentamidina en los 90’s / 20-30% VIH pos-HAART (1996) 40-50% mortalidad: Cx, neoplasias hematológicas, inflamaciones crónicas, trasplantes de órganos sólidos o Médula Ósea. 80% primo-infecciones en la infancia – Asintomáticas Patogenia: Vía de infección = Inhalación. Trofozoítos → Unión a Neumocitos T1 (filopodos) → Transforma Pre-quistes → Quistes Maduros (8 trofozoítos)

100 EXAMENES DIAGNOSTICOSSospechoso: Hipoxemia, Alcalosis respiratoria, ↑ LDH e inmunosupresión Definitivo: Visualización directa por histopatología o de secreciones: Lavado Broncoalveolar,Esputo Coloración de metanol-Giemsa mas coloraciones Especificas: Azul de Ortotoluidina, Gomori-Grocott

101 CANDIDIASIS

102 Generalidades Grupo mas importante de hongos patógenos oportunistas.Candida spp componente normal de la flora humana (Saprófito en un 50%)- TGI, TGUF y Piel Patógena cuando la resistencia a la infección del hospedero se ve disminuida El 100% de los humanos tenemos una o mas especies de Candida en el intestino Cuando los mecanismos de supresión fallan su número aumenta Pasa fácilmente a los alimentos, el medio hospitalario y el ambiente general- Donde se la aísla en ocasiones. Presente en fómites, materia orgánica, animales, etc.

103 Microbiología Levadura 4-6m, ovoide, gemaciónPreparaciones en fresco: Levadura, pseudomicelio Cultivo: colonias crema, suaves en Agar saboraud Componentes de la pared (galactomanano, quitina, glucanos) Le dan resistencia estructural Polipéptidos y proteínas Le dan características antigénicas Adhesinas, enzimas Le dan características de virulencia Presente en fómites, materia orgánica, animales, etc.

104 Microbiología Hongo pleomórfico según condiciones ambientales.Tanto la levadura como la hifa pueden ser patógenos Mas de 150 especies, 15 en humanos C. albicans la más frecuente y estudiada Necesario- Identificar especie para definir susceptibilidad antimicótica Presente en fómites, materia orgánica, animales, etc.

105 Especies de Candida en enfermedad humanaFrecuentes: C. albicans C. glabrata C. guillermondiii C. krusei C. lusitaniae C. parapsilosis C. tropicalis Infrecuentes: C. albidus C. catenulate C. dubliniensis C. famata C. lambica C. rugosa C. lipolytica C. norvegensis Más de 200 especies, aproximadamente 20 causan enfermedad en humanos, especialmente inmunosuprimidos y pacientes críticamente enfermos

106 Factores de virulenciaAdhesividad: A las células epiteliales y endoteliales - A través de glucoproteínas Dimorfismo: Cambios morfológicos reversibles (Levadura- Pseudomicelio- Micelio)- Fase hifal atraviesa barrera Manano: Hidrofobicidad de la levadura- Tolerancia a efectos supresores de antifúngicos Proteinasas: Hidroliza proteínas hospedero Fosfolipasas: Facilitan la invasión a mucosas

107 Patogénesis Determinada por 3 factores:Aumento colonización por hongos Antibióticos amplio espectro Ruptura de barreras mucosas y piel: Dispositivos IV, trauma, cirugía, mucositis Disfunción sistema inmune: Alteraciones linfocitos T Neutropenia Inmunidad humoral: Opsonización

108 Candida sp: Patogenia y PatologíaCANDIDIASIS SUPERFICIAL Se establece por incremento de población Daño en la piel o epitelio que permite invasión local por levadura CANDIDIASIS SISTEMICA Se produce cuando entra en torrente sanguíneo y las defensas son inadecuadas Puede afectar riñones, fijarse a prótesis Produce abscesos piógenos o granulomas crónicos Patogenia: Vía de infección = sobrepoblación

109 SÍNDROMES CLINICOS Candidiasis invasiva Candidiasis mucosa CandidemiaCandidiasis aguda diseminada Endocarditis Meningitis Endoftalmitis Osteomielitis Candidiasis crónica diseminada Candidiasis mucosa Candidiasis orofaríngea Candidiasis esofágica Candidiasis mucocutánea crónica Candidiasis GU Candidiasis vuvovaginal ORIGEN ENDOGENO ORIGEN ENDOGENO ORIGEN EXOGENO

110 FACTORES DE RIESGO - Candidiasis MucosasDisrupción mucosa Mucositis Trauma ó cirugía Prótesis dentales Neoplasias Factores exógenos: Antibióticos Dieta: azúcares Inmunosupresores Duración hospitalización Edad: niños, ancianos Inmunidad celular Neutropenia, VIH Cualitativos Diabetes mellitus Endocrinopatías Enfermedades debilitantes

111 Ecologia Microbiana OralLa mucosa oral esta colonizada por alrededor de 200 especies microbianas Flora normal de cavidad oral (¼ de la población sana). Flora bacteriana predominante- Steptococcus sp. Cavidad oral- 4 nichos ecológicos, variables por flora indígena Saliva, lengua, superficie supragingival asociado al diente y las placas subgingivales Potencial infección bacteriana y fúngica- Alto Normalmente presencia de Candida: Lengua, paladar, resto de la cavidad oral. Superficie en contacto con prótesis

112 Alteraciones locales de la cavidad oral:Prótesis dentales Acrílico fácilmente colonizable. Prótesis mal ajustadas. Irritantes locales crónicos, higiene oral inadecuada, xerostomía, displasia epitelial, tabaquismo Radioterapia de cabeza y cuello Cantidad y tipo de saliva: Sequedad oral, humedad en comisuras labiales. Dieta Ferropenia o avitaminosis. pH. Temperatura. Algunas bacterias. Complejo potencial de factores de virulencia.

113 Factores de virulencia Candidiasis orofaríngeaHidrolasas extracelulares Proteasas y fosfolipasas. Adherencia/Pared celular. Pleomorfismo/Formación de hifas. Variabilidad del fenotipo. Metabolitos ácidos. Dificulta la fagocitosis. Interferencia en la fagocitosis, complemento y respuesta inmune. Sinergia con otros microorganismos orales.

114 1. Candidiasis orofaríngea -Manifestaciones Clínicas-Dolor, ardor, disgusia, sialorrea, sensación ardor Membranas blanquecinas, halo eritematoso No hay compromiso sistémico Prevalencia: 4 de cada 1000 pacientes odontológicos. Alto porcentaje de infecciones asintomáticas. Complicación: extensión esófago, fungemia Candidiasis endógena y exógena.

115 Candidiasis orofaríngea-Formas clínicas- Candidiasis orofaríngea Candidiasis seudomembranosa aguda o muguet. Candidiasis eritematosa aguda o Candidiasis atrófica aguda. Candidiasis hiperplásica crónica. Queilitis angular o boqueras. Glositis rómbica. Estomatitis protésica.

116 Candidiasis seudomembranosaPatogenia Invasión y proliferación del hongo en las capas epiteliales superficiales. Mucosa oral eritematosa y sangrante, acompañada de una capa cremosa blanca o amarilla, friable sobre la superficie. Frecuente en paladar, mucosa labial y dorso de lengua. La infección en esófago produce disfagia.

117 Candidiasis atrófica agudaPatogenia Placas rojas a rosadas en mucosa oral, acompañadas de lesiones algodonosas. Habitualmente ubicadas en el dorso de la lengua y el paladar. Pérdida de papilas filiformes en lengua.

118 Candidiasis hiperplásica crónicaPatogenia Placas o pápulas blancas sobre un fondo eritematoso que contiene hifas en la capa paraqueratinizada del epitelio engrosado.

119 Quelitis angular PatogeniaFisuras o pequeñas úlceras vecinas a los ángulos de la boca, acompañadas de pequeñas placas blancas. Es frecuente en pacientes inmunocompetentes con anemia, deficiencia de vitaminas o con alteración de la oclusión, al igual que en pacientes VIH-SIDA.

120 Glositis rómbica PatogeniaPlaca eritematosa, alargada y asintomática de la mucosa atrófica de la superficie dorsal de la lengua en su porción media, debida a infección por Candida albicans. Suele verse asociada también a trastornos sico-tensionales

121 Estomatitis protésicaPatogenia Inflamación crónica de la mucosa oral debida al contacto con una prótesis extraible. Es un proceso difícil de controlar en los pacientes portadores de este tipo de prótesis. Involucra diferentes factores predisponentes El más importante es la presencia de Candida.

122 6. Candidiasis DiseminadaExcluye candidiasis orofaríngea y esofágica Es la primera causa mundial de enfermedad fúngica invasiva Es la cuarta causa de enfermedad nosocomial hematógena Su incidencia es 7-15 veces mas alta que Aspergilosis invasiva La mortalidad atribuible es de 5-71%, en promedio 47%

123 6. Candidiasis DiseminadaFactores de Riesgo: Alteraciones inmunitarias por enfermedades oncológicas y medicación antineoplásica. Catéteres endovasculares o urinarios prolongados. Alteración biota normal por uso AB amplio espectro por tiempos prolongados Tras locación intestinal por Cx, poli-instrumentación, hospitalización prolongada. Uso profiláctico de Anfotericina B y fluconazol Glucocorticoides parenterales por tiempo prolongado Quemaduras graves RN-BPN Uso de drogas ilícitas intravenosas

124 6. Candidiasis DiseminadaClínica: Sepsis, Organomegalias, petequias, fenómenos embólicos. 15-30% Coriorretinitis Bronconeumonía con efusión 4x ↑Riesgo Meningitis en RN Endocarditis (Catéteres) Glomerulonefritis en DM Osteomielitis Fiebre persistente a pesar del manejo Ab. Crónica: en recuperación neutrofilica pos-quimioterapia múltiples abscesos hepatoesplénicos, nódulos pulmonares

125 DIAGNOSTICO Directo: KOH al 10% Gram Blastoconidias OvalesCultivo (50%Sensibilidad). Serología; Detección e Ag, señalan el proceso activo Biopsia (Visualización directa mas reacción granulomatosa inflamatoria Pruebas de Sensibilidad in vitro