1 POTENCIACIÓN DEL EFECTO ANTIDEPRESIVO DE LOS ACIDOS GRASOS OMEGA-3 CON DOSIS SUBTERAPÉUTICAS DE FLUOXETINA Carolina B. ROMAÑUK1,2, Ruben H. MANZO1,2, María E. OLIVERA1,2, Carlos H. LAINO3 1Unidad de Investigación en Farmacotecnia y Tecnología Farmacéutica, UNITEFA-CONICET. 2Departamento de Farmacia, Facultad de Ciencias Químicas-Universidad Nacional de Córdoba. 3Instituto de Biotecnología, Centro de Investigación e Innovación Tecnológica, CENIIT-Universidad Nacional de La Rioja.

2 DEPRESIÓN Síntomas ¿Qué es depresión? Causas Tratamiento DiagnósticoEs una enfermedad que nos afecta física y mentalmente en el modo de sentir y pensar. Puede alejarnos de nuestra familia, amigos, trabajo y estudios. Síntomas Angustia, estado de ánimo triste o melancólico. Sentimiento de desesperanza. Pérdida de interés en la actividad sexual. Fatiga, agotamiento. Dificultad para concentrase y recordar. Trastornos digestivos. Insomnio y dolor de cabeza. Pensamientos suicidas. Causas Antecedentes familiares. Abuso de alcohol y drogas. Pérdida del trabajo o dificultades en la vida. Fin de una relación amorosa importante. Esquemas mentales negativos y baja autoestima. Tratamiento Fármacos antidepresivos Psicoterapia Diagnóstico Puede afectar a cualquier persona, de cualquier nivel económico y en cualquier edad.

3 PRINCIPALES PROBLEMASTRATAMIENTO FARMACOLÓGICO INNOVADOR CONVENCIONAL Administración de FLUOXETINA. Fármaco antidepresivo con numerosos efectos adversos, dependientes de la dosis Desarrollo de una composición farmacéutica que combina FLUOXETINA (dosis menor) y ÁCIDOS GRASOS ω3, contrarrestando los efectos adversos. FLUOXETINA ÁCIDOS GRASOS ω3 FLUOXETINA PRINCIPALES PROBLEMAS Disfunción sexual, anorexia y pérdida de peso, palpitaciones, arritmias, ansiedad, nerviosismo, insomnio, temblores, somnolencia, nauseas, vómitos y diarrea, entre otros. Desbalance en la relación entre AGω-6 y AGω-3 en la dieta (particularmente relacionado con un déficit de AGω- 3) podría estar involucrado en la fisiopatología de diversos desórdenes psiquiátricos, como la depresión. Por lo tanto, las anormalidades generadas por el déficit de los AGω-3, podrían ser revertidas mediante el tratamiento o suplementación con dichos ácidos grasos.

4 HIPÓTESIS eficacia limitada de los antidepresivos manifestación de los efectos adversos durante el tratamiento efectos beneficiosos de los AGω-3 a nivel de sistema nervioso Hipótesis: la suplementación con AGω-3 permitiría utilizar dosis de FXT menores, lo que potencialmente se manifestaría en una reducción de los efectos adversos. Efectos terapéuticos de FXT y AGω-3 se observan a largo plazo, por lo que el desarrollo de una COMPOSICIÓN FARMACÉUTICA EN COMBINACIÓN A DOSIS FIJA de ambos resultaría conveniente. FXT-HCl: sustancia cristalina soluble en agua. En consecuencia, la administración conjunta de FXT-HCl y AGω-3 en una única formulación está limitada por la baja solubilidad de FXT-HCl en el aceite.

5 OBJETIVOS Desarrollar una composición farmacéutica constituida por FXT y AGω-3 y evaluar su efecto antidepresivo en modelos animales.

6 Compatibilización entre FXT y AGω-3Materiales y Métodos Compatibilización entre FXT y AGω-3 En un tubo de centrífuga se disolvió FXT-HCl en c.s. de agua destilada (pH aprox. 5). Posteriormente se agregó NaOH 1 N en cantidad equimolar y se obtuvo una dispersión blanca con un valor de pH de 10,5. Esta dispersión se centrifugó hasta lograr la separación de dos fases: la superior acuosa límpida y la inferior, constituida por FXT de consistencia aceitosa/gel opaca, la que fue separada y secada en estufa a 40 ºC hasta peso constante. Este aceite mostró ser libremente miscible en aceite de salmón marino.

7 Tratamientos farmacológicos y grupos experimentalesMateriales y Métodos Tratamientos farmacológicos y grupos experimentales GRUPOS TRATAMIENTOS G-Sal Animales alimentados con D-SC y tratados con una dosis diaria de solución salina. G-FXT-HCl Animales alimentados con D-SC y tratados con solución acuosa de FXT-HCl, por vía oral, en una dosis diaria sub-terapéutica (3 mg/kg/día). G-Sal-AGω-3 Animales alimentados con D-AGω-3 (720 mg/kg/día) y tratados con una dosis diaria de solución salina. G-FXT/AGω-3 Animales alimentados con D-SC a los cuales se administró por vía oral una composición farmacéutica FXT/AGω-3 (720 mg/kg/día de AGω-3 más 3 mg/kg/día de FXT).

8 Animales y dietas experimentalesMateriales y Métodos Animales y dietas experimentales Se utilizaron ratas Wistar macho con un peso de g, mantenidas en un ciclo de 12 horas de luz y 12 horas de oscuridad con acceso libre a agua y alimento, excepto durante las pruebas. Las ratas fueron alojadas en cajas individuales de polietileno (55 x 38 x 30 cm). Se utilizaron dos dietas, una estándar para los controles (D-SC) y otra suplementada con AGω-3 (D- AGω-3). Ambas contenían todos los nutrientes según las recomendaciones del American Institute of Nutrition. COMPOSICIÓN D-SC2 D- AGω-32,3 g/ 100 g dieta Caseinato de calcio 200 Aceite de maíz 50 Colina 1,5 Mezcla de vitaminas 10 Mezcla de minerales 35 Maltodextrina 696,9 AG-ω3 (DHA y EPA)1 ----- 11,93 1La fuente de AGω-3 utilizada fue aceite de salmón marino, el cual aportó un 30% de AGω-3 (EPA = 17% y DHA = 13%). El contenido en ácidos grasos de la dieta estándar y del aceite de salmón marino se determinó por cromatografía gaseosa. DHA: ácido docosahexaenoico; EPA: ácido eicosapentaenoico. 2Ambas dietas se suministraron como comida en forma de polvo en comederos especiales diseñados a tal efecto. 3La incorporación de aceite de salmón marino como suplemento de la dieta, se realizó diariamente y en el momento de ofrecer el recipiente de comida al animal, para evitar su posible deterioro.

9 Prueba de Natación Forzada (PNF) Prueba de Campo Abierto (PCA)Materiales y Métodos Prueba de Natación Forzada (PNF) Esta prueba permite evaluar el efecto antidepresivo a través del índice de disminución del tiempo de inmovilidad. Los animales se colocan en un cilindro de acrílico individual lleno de agua y se evalúa cada 5 seg. la conducta predominante en las siguientes 3 categorías: inmovilidad, natación y escalamiento. Los resultados se expresan como el número total de veces que se observa cada comportamiento. Prueba de Campo Abierto (PCA) Se utiliza para descartar que el efecto de los tratamientos evaluados con la PNF pudiera atribuirse a modificaciones inespecíficas relacionadas con la actividad locomotora. Se coloca la rata en el centro de un piso negro dividido en cuadrados con líneas blancas, limitados por cuatro paredes negras y se registra el número de cuadrados que la rata atraviesa con sus cuatro patas durante 5 min.

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13 CONCLUSIONES La neutralización de FXT-HCl condujo a la compatibilización de FXT con AGω-3 lo que permite la administración por vía oral de una composición farmacéutica FXT/AGω-3 en combinación a dosis fija. La misma, administrada en dosis de 720 mg/kg/día de AGω-3 y 3 mg/kg/día de FXT (dosis sub-terapéutica), durante 16 días, mostró un efecto anti-depresivo en ratas, superior a lo observado luego del tratamiento con cantidades equivalentes de sus componentes individuales. Esta composición farmacéutica FXT/AGω-3 podría ser una alternativa más efectiva y segura para el tratamiento de trastornos psiquiátricos (Solicitud de Patente Argentina, INPI: P ).

14 Muchas Gracias!!