1 Prácticas seguras en bioterios de experimentación con patógenos y en la manipulación de animales silvestres vectores de enfermedades. [email protected]

2 Tenemos una situación PELIGROSA Definir a el/los sujetos expuestos. Definir a el/los sujetos expuestos. Unidad experimental? Sujeto operador? Población Circundante? Identificar las necesidades de contención. Identificar las necesidades de contención. Buscamos una situación MENOS RIESGOSA

3 Preguntas para el Modelo Experimental Vía de ingreso? (Del huésped y del investigador) Vía de ingreso? (Del huésped y del investigador) Biología de la interacción microorganismo/huésped? Biología de la interacción microorganismo/huésped? Factibilidad de propagación/diseminación? Factibilidad de propagación/diseminación? Factibilidad de interacción de cepas? Factibilidad de interacción de cepas? Hay profilaxis? (vacuna) Hay profilaxis? (vacuna) Hay posibilidad terapéutica post exposición? Hay posibilidad terapéutica post exposición? Hay medios para protegerse? Hay medios para protegerse?

4 Clasificación de Microorganismos Nivel I: Agentes que no se conocen como generadores sistemáticos de enfermedades en adultos sanos o animales. Nivel II: Agentes de riesgo moderado que son generadores de enfermedades de variada gravedad, presentes en la comunidad, y cuya transmisión no sea por vía aérea. Nivel III: Agentes exóticos o autóctonos con potencial transmisión por vía respiratoria, y que pueden provocar enfermedades graves y potencialmente letales. Nivel IV: Agentes exóticos o autóctonos con transmisión por vía respiratoria o desconocida, que provoquen enfermedades con alta letalidad, y para las que no se conocen vacunas o terapias adecuadas.

5 Niveles de Contención Biológica OMS Nivel 1 Nivel 1 Mesada abierta +EPP?. Gestión de residuos Gestión de riesgos químicos y físicos Nivel 2 Nivel 2 NO Mesada abierta. +Cabina de Bioseguridad y/o EPP Nivel 3 Nivel 3 + Exclusa de acceso y flujo de aire direccional Nivel 4 Nivel 4 Hermeticidad total, trajes de aislación o cabinas herméticas con guantes

6 Nivel BIOSEGURIDAD 1

7 Nivel BIOSEGURIDAD 2

8 Nivel BIOSEGURIDAD 3

9

10 Nivel BIOSEGURIDAD 4

11

12 NIVEL DE CONTENCION DEL PELIGRO RELATIVO A LA SUCEPTIBILIDAD DEL HUESPED Enfoque basado en la concepción respecto de cual es la población que protejo con los sistemas de contención. Enfoque basado en la concepción respecto de cual es la población que protejo con los sistemas de contención.

13 Fuentes de riesgo en el Bioterio de Experimentación Injuria física, material de vidrio, elementos cortopunzantes. Injuria física, material de vidrio, elementos cortopunzantes. Riesgo químico. Riesgo químico. Mutágenos y carcinógenos Mutágenos y carcinógenos Riesgo de explosión expansiva (gases comprimidos) o combustiva (O2 / Gas natural o licuado). Riesgo de explosión expansiva (gases comprimidos) o combustiva (O2 / Gas natural o licuado). Crio-quemaduras y quemaduras. Crio-quemaduras y quemaduras. Radiación. Radiación. Riesgo biológico. Riesgo biológico.

14 Fuentes de riesgo con animales *Aerosoles. Orina (stress). Procedimientos invasivos. Pipeteo - jeringas. Heridas *Vectores (ectoparásitos).Pulgas - Garrapatas. *Mordeduras y arañazos *Picaduras

15 Equipamiento Disminución del riesgo Prácticas Instalaciones Profilaxis Practicas correctas de laboratorio Higiene Manejo de líquidos Responsabilidad Contención Primaria (sobre el usuario) Prevención de aerosoles Contención primaria (cabinas de seguridad biológica-protección respiratoria 42CFR84 y corporal) Centrífugas y Homogenizadores Propipetas Diseño del Bioterio Barreras secundarias

16 Inoculación –Inmovilización (cepos o maniobras adecuadas) Inoculación –Inmovilización (cepos o maniobras adecuadas) Sangrado (con sobrevida o no) Sangrado (con sobrevida o no) Excoriación-raspado Excoriación-raspado Necropsia-disección Necropsia-disección Marcado Marcado Prácticas

17 Norma de Protección Respiratoria 42CFR84 % de retención de aerosol standard PAO o Niebla salina Resistencia a los aceites

18 Descartables Respiradores De cartuchos Semimáscara Mascara completa Purificadores de aire portátiles con presión positiva

19 Equipamiento Contención primaria (cabinas de seguridad biológica) (estaciones de transferencia) Centrífugas Propipetas

20 Clases de Cabinas de Seguridad Biológica Clase I Clase II Clase III Estaciones de cambio de cama Estaciones de transferencia Equipamiento

21 CABINAS DE SEGURIDAD BIOLOGICA CSB Clase I CSB Clase I Suministra protección a: El personal Al ambiente -No suministra protección: Al producto

22 CABINAS DE SEGURIDAD BIOLOGICA CSB Clase II

23 CSB Clase II CSB Clase II Suministra protección a: Suministra protección a:  El personal  Al ambiente  Al producto CABINAS DE SEGURIDAD BIOLOGICA COMPONENTES: A- ABERTURA FRONTAL B- BASTIDOR C- FILTRO HEPA DE EXTRACCIÓN D-PLENUM TRASERO E- FILTRO HEPA DE SUMINISTRO F-VENTILADOR A B C D E F AIRE HABITACIÓN AIRE POTENCIALMENTE CONTAMINADO AIRE FILTRADO HEPA

24 CABINAS DE SEGURIDAD BIOLOGICA Cabina de Seguridad Biológica Clase III

25 El aire es descargado a través de un filtro HEPA sobre la superficie de trabajo y hacia el usuario. Nunca deben ser usadas para materiales con cultivos de células o formulaciones de drogas. No sirven para manipular materiales potencialmente infecciosos. Nunca debe ser utilizado como sustituto de una cabina de seguridad biológica BANCO DE TRABAJO LIMPIO DE FLUJO LAMINAR Vista lateral

26 BANCO DE TRABAJO LIMPIO FLUJO LAMINAR HORIZONTAL BANCO DE TRABAJO LIMPIO FLUJO LAMINAR VERTICAL BANCO DE TRABAJO LIMPIO DE FLUJO LAMINAR

27 NSF-49 ó EN-12469 Validación

28 AISLADORES AISLADORES Gabinetes con presión negativa *Estancos*Abiertos Equipamiento

29 AISLADORES AISLADORES Racks de cajas herméticas con conexión individual Racks de cajas herméticas con conexión individual Inyección-succión de aire Equipamiento

30 Centrifugación No emplear tubos sin tapa Emplear tubos con cierre hermético Usar canastas con tapa Usar rotores con la tapa provista Prestar especial atención a los mecanismos de cierre

31 Equipamiento Disruptores mecánicos “Licuadoras” Sonicadores Molinos Sierras Todos los generadores de aerosoles potencialmente peligrosos, deben operarse en condiciones que aseguren una disminución del riesgo tanto humano como ambiental

32 Instalaciones Diseño del laboratorio Concepción general Ergonomía, seguridad. Necesidad operativa Incompatibilidades Iluminación Previsiones para el mantenimiento Recomendaciones ANL Magazine NCCLS GP-18A

33 Bibliografía Cabinas de seguridad biológica, uso desinfección y mantenimiento, (2002 OPS) Cabinas de seguridad biológica, uso desinfección y mantenimiento, (2002 OPS) BMBL Bioseguridad en Laboratorios de Microbiología y Biomedicina 5th ed. (CDC) BMBL Bioseguridad en Laboratorios de Microbiología y Biomedicina 5th ed. (CDC) Desinfección, Desinfectantes, desinfestantes, limpieza. Miguel D’Aquino, Roberto Rezk (1995 EUDEBA) Desinfección, Desinfectantes, desinfestantes, limpieza. Miguel D’Aquino, Roberto Rezk (1995 EUDEBA) NCCLS – GP18A Lab-design, Approved guidelines NCCLS – GP18A Lab-design, Approved guidelines Laboratory Bosafety Manual(2003 OMS) Laboratory Bosafety Manual(2003 OMS)

34 Animales Silvestres

35 Selección del sitio de procesamiento Coordinación con las fuerzas vivas (política de compartir información). Cercanía a centros habitados, casas, escuelas etc. Síndrome NIMBY. Consideraciones atmosféricas y de sombra. Manejo de los residuos-incineración directa /entierro

36 Captura viva y transporte de los roedores

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39 Obtención de muestras de sangre y autopsia

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41 Desinfección del material de trampeo previo al retorno

42 MÉTODOS PARA TRAMPEO Y MUESTREO DE PEQUEÑOS MAMÍFEROS PARA ESTUDIOS VIROLÓGICOS