1

2 przeciwciała dwuswoisteandrzej rutkowski 18 maja 2004 przeciwciała dwuswoiste bsMAb na podstawie: Y. Cao, L. Lam: Advanced Drug Delivery Reviews, 55 (2003)

3 przeciwciała dwuswoisteczym one są?

4 - przecież mamy monoklonypo co? - przecież mamy monoklony przeciwciała dwuswoiste ELISA, chromatografia powinowactwa, terapia, immunocytochemia, fenowypowanie, wiele innych…

5 komórki odpornościowepo to: molekularne kajdanki: przeciwciała dwuswoiste komórki odpornościowe toksyny, leki wektory DNA komórka docelowa enzymy szczepionki radioizotopy

6 toksyny, leki MAb Produkcja sprzęganie cytokina antybiotykprzeciwciała dwuswoiste toksyny, leki Produkcja MAb sprzęganie cytokina antybiotyk małe związki etc…

7 przeciwciała dwuswoistetoksyny, leki

8 enzymy A D E P T ntibody irected nzyme rodrug herapy by-stander effectprzeciwciała dwuswoiste enzymy A D E P T ntibody irected nzyme rodrug herapy by-stander effect

9 przeciwciała dwuswoisteradioimmunoterapia

10 enzymy / radioizotopy MAb  sprzęganie → utrata specyficznościprzeciwciała dwuswoiste enzymy / radioizotopy MAb  sprzęganie → utrata specyficzności  działanie pozamiejscowe MAb-streptawidyna + znakowana biotyna – II faza

11 przeciwciała dwuswoisteenzymy / radioizotopy  wielkrotna iniekcja x

12 x przeciwciała dwuswoiste enzymy / radioizotopy endocytoza

13 przeciwciała dwuswoisteradioimmunoterapia CEA % CEA

14 antygen śródbłonka naczyń nowotworowychx przeciwciała dwuswoiste enzymy czynnik tkankowy antygen śródbłonka naczyń nowotworowych TF TF TF TF

15 immunoterapia przeciwnowotworowaprzeciwciała dwuswoiste immunoterapia przeciwnowotworowa + + + Fas TcR

16 x immunoterapia – MDX-210: III faza prób + + TcRprzeciwciała dwuswoiste immunoterapia x + + – TcR MDX-210: III faza prób

17 immunoterapia MDX-210: III faza prób FcγRI (CD64) xprzeciwciała dwuswoiste immunoterapia FcγRI (CD64) MA MO DC neutrofile MDX-210: III faza prób G-CSF, IFNg

18 x przeciwciała dwuswoiste terapia genowa -adenowirusy CAR integryna αv

19 terapia genowa -adenowirusy x specyficzny antygenprzeciwciała dwuswoiste terapia genowa -adenowirusy specyficzny antygen szczury: 20x więcej w płucach, 5x mniej w tkankach

20 szczepionki nowotworoweprzeciwciała dwuswoiste szczepionki nowotworowe CD28

21 szczepionki nowotworoweprzeciwciała dwuswoiste szczepionki nowotworowe CD28 cytokiny MHC I

22 szczepionki nowotworoweprzeciwciała dwuswoiste szczepionki nowotworowe % wyizolowane TL zabijały nowotwór in vitro

23 przeciwciała dwuswoisteprodukcja strategie  zalety  wady

24 produkcja fuzja hybrydom  1/10 bsMAb - jak to zrobi biolog?przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biolog? fuzja hybrydom  1/10 bsMAb

25 produkcja sprzęganie chemiczne - jak to zrobi chemik? pepsynaprzeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi chemik? sprzęganie chemiczne pepsyna DTT / 2ME

26 produkcja DTNB BMH p-PDM sprzęganie chemiczne - jak to zrobi chemik?przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi chemik? sprzęganie chemiczne HOOC O2N S COOH NO2 O N DTNB - grupy tiolowe BMH - grupy aminowe Bartlett et al., Nat Biotechn 17 (1999), S SH HS O N p-PDM - grupy tiolowe  powstają homokoniugaty

27 produkcja SPDP sprzęganie chemiczne - jak to zrobi chemik? pH > 7przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi chemik? sprzęganie chemiczne SPDP N O S H2N pH > 7 O S N NH DTT / 2-ME O HS NH Pierce Chemical Technical Library, Antibody Production,

28 produkcja DTNB BMH SPDP p-PDM sprzęganie chemiczneprzeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi chemik? sprzęganie chemiczne  utrata specyficzności O N HOOC O2N S COOH NO2 DTNB BMH O N N O S SPDP p-PDM

29 produkcja  mała stabilność  trawienie przez nukleazyprzeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biochemik? T G C A A C G T  mała stabilność  trawienie przez nukleazy

30 produkcja B  sprzęganie chemiczne Str - jak to zrobi biochemik?przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biochemik? Str B  sprzęganie chemiczne

31 produkcja Fab scFv - jak to zrobi biotechnolog? VH VL VH VLprzeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biotechnolog? VL VH Fab VL VH scFv

32 produkcja - jak to zrobi biotechnolog? jun fos scFv2 scFv1przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biotechnolog? jun fos scFv2 scFv1 VL1 VH1 VL2 VH2 suwak leucynowy

33 produkcja - jak to zrobi biotechnolog? scFv1 scFv2przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biotechnolog? scFv1 scFv2 VL1 VH1 VL2 VH2 VL2 VH1 VL1 VH2  błędne parowanie domen:

34 produkcja diabodies dwupciała - jak to zrobi biotechnolog? VL1 VH1 VH2przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biotechnolog? diabodies dwupciała VL1 VH1 VL2 VH2 VL1 VH1 VH2 VL2 VL1 VH2 VL2 VH1

35 produkcja  immunogenność dwupciała - jak to zrobi biotechnolog? VL1przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biotechnolog? dwupciała VL1 VL2 VH2 VH1 VH1 VL2 VL1 VH2 VL1 VH1 VL2 VH2  immunogenność

36 przeciwciała dwuswoistedziękuję za uwagę

37 przeciwciała dwuswoistekoniec